中文摘要 | 第1-4页 |
英文摘要 | 第4-9页 |
1 前言 | 第9-23页 |
·课题研究的目的及意义 | 第9-10页 |
·林木遭受盐害机制 | 第10-12页 |
·离子过量 | 第10-11页 |
·水分胁迫 | 第11页 |
·养分离子不平衡 | 第11页 |
·盐胁迫对膜结构的影响 | 第11页 |
·盐胁迫诱导的氧化胁迫对植物的影响 | 第11-12页 |
·林木耐盐机理 | 第12-13页 |
·渗透调节 | 第12页 |
·清除活性氧的膜保护体系 | 第12-13页 |
·水孔蛋白的调节作用 | 第13页 |
·LEA蛋白 | 第13页 |
·耐盐基因工程研究进展 | 第13-18页 |
·抗氧化酶系与活性氧的清除基因工程 | 第13-14页 |
·与渗透调节有关的基因工程 | 第14-16页 |
·mtID基因和gutD基因 | 第14页 |
·otsBA基因和TPS基因 | 第14页 |
·P5CS基因 | 第14页 |
·甘氨酸甜菜碱 | 第14-16页 |
·大分子蛋白类基因工程 | 第16-17页 |
·水通道蛋白 | 第16页 |
·调渗蛋白 | 第16-17页 |
·与离子区域化有关的基因工程 | 第17-18页 |
·林木耐盐基因工程存在的问题及展望 | 第18-19页 |
·农杆菌介导的林木遗传转化概况 | 第19-21页 |
·受伤植物器官的直接感染法 | 第20页 |
·整体植株接种共感染法 | 第20页 |
·体细胞胚或胚性细胞转化法 | 第20-21页 |
·原生质体转化法 | 第21页 |
·附体腋芽转化法 | 第21页 |
·与基因枪结合共转化法 | 第21页 |
·林木遗传转化存在的问题及展望 | 第21-23页 |
2 材料和方法 | 第23-34页 |
·试验材料 | 第23-25页 |
·外植体来源 | 第23页 |
·菌种和质粒 | 第23页 |
·主要生化试剂 | 第23页 |
·主要仪器设备 | 第23-24页 |
·基本培养基 | 第24页 |
·常用溶液配制 | 第24-25页 |
·实验方法 | 第25-34页 |
·菌种的活化保存 | 第25页 |
·大肠杆菌质粒pRBA的小量制备(碱解法) | 第25-26页 |
·三亲交配法将中间载体(含betA基因)转入根癌农杆菌EHA105 | 第26-27页 |
·抗生素浓度的确定 | 第27页 |
·工程菌悬浮液的制备及转化程序 | 第27-28页 |
·根癌农杆菌介导的小黑杨花粉植株的遗传转化 | 第28-29页 |
·共培养时间对转化率的影响 | 第28页 |
·脱菌实验 | 第28页 |
·菌液浓度与侵染时间对转化率的影响 | 第28页 |
·不同浓度CaCl_2处理对转化率的影响 | 第28-29页 |
·转化植株的叶片再分化实验 | 第29页 |
·转化植株的生根 | 第29页 |
·转化植株的PCR检测 | 第29-30页 |
·植物总DNA的提取(CTAB法) | 第29-30页 |
·转化植株PCR检测 | 第30页 |
·转化植株Southern斑点杂交 | 第30-32页 |
·转化植株Southern印迹杂交 | 第32-33页 |
·转化植株的耐盐试验 | 第33页 |
·转化植株的移栽 | 第33-34页 |
3 结果与分析 | 第34-50页 |
·根癌农杆菌介导的小黑杨花粉植株的遗传转化 | 第34-50页 |
·卡那霉素浓度的确定 | 第34-35页 |
·抑菌抗生素及最佳浓度的确定 | 第35-38页 |
·共培养时间对转化率的影响 | 第38-39页 |
·不同的脱菌方法的比较 | 第39-40页 |
·菌液浓度与侵染时间对转化率的影响 | 第40-41页 |
·不同浓度CaCl_2处理对转化率的影响 | 第41页 |
·转化植株叶片再分化 | 第41-42页 |
·转化植株的生根 | 第42页 |
·转化植株的PCR检测 | 第42-43页 |
·转化植株Southern斑点杂交 | 第43-44页 |
·转化植株Southern印迹杂交 | 第44页 |
·转基因株系耐盐性比较 | 第44-49页 |
·转基因株系的移栽 | 第49-50页 |
4 讨论 | 第50-57页 |
·农杆菌介导的遗传转化体系的优化 | 第50-53页 |
·预培养与转化率的关系 | 第50页 |
·共培养与转化率的关系 | 第50-51页 |
·除菌抗生素与转化率之间的关系 | 第51-52页 |
·其他因素对转化率的影响 | 第52-53页 |
·转基因植株的检测 | 第53-54页 |
·转基因株系的耐盐效果 | 第54-55页 |
·问题及展望 | 第55-57页 |
5 结论 | 第57-58页 |
参考文献 | 第58-62页 |
图版 | 第62-63页 |
致谢 | 第63页 |