| 第1章 绪论 | 第1-21页 |
| ·本文研究背景、目的及意义 | 第12-13页 |
| ·质粒DNA的生产工艺 | 第13-18页 |
| ·发酵 | 第14-15页 |
| ·细胞裂解 | 第15页 |
| ·回收与净化 | 第15-16页 |
| ·纯化和精制 | 第16-18页 |
| ·工作基础 | 第18-20页 |
| ·构建携带人肝细胞生长因子基因的重组载体pUDKH | 第18-19页 |
| ·质粒的制备 | 第19-20页 |
| ·质量控制考虑 | 第20-21页 |
| 第2章 质粒pUDKH浓度及纯度的分析 | 第21-24页 |
| ·吸光度法 | 第21-22页 |
| ·仪器与试剂 | 第21页 |
| ·实验步骤 | 第21页 |
| ·结果与讨论 | 第21-22页 |
| ·电泳法 | 第22-23页 |
| ·仪器与试剂 | 第22页 |
| ·实验步骤 | 第22-23页 |
| ·结果与讨论 | 第23页 |
| ·本章小结 | 第23-24页 |
| 第3章 离子交换色谱分析质粒pUDKH | 第24-35页 |
| ·液相色谱的种类 | 第24-27页 |
| ·正相液相色谱 | 第24-25页 |
| ·反相液相色谱 | 第25页 |
| ·离子对液相色谱 | 第25-26页 |
| ·凝胶色谱 | 第26-27页 |
| ·离子交换色谱 | 第27-29页 |
| ·原理与特点 | 第27-28页 |
| ·离子交换剂填料 | 第28页 |
| ·离子交换色谱流动相 | 第28-29页 |
| ·实验仪器和方法 | 第29-30页 |
| ·仪器与试剂 | 第29页 |
| ·色谱条件 | 第29-30页 |
| ·结果与讨论 | 第30-34页 |
| ·成分鉴定 | 第30-32页 |
| ·质粒pUDKH生产过程的监测 | 第32-34页 |
| ·最终质粒pUDKH产品分析 | 第34页 |
| ·本章小节 | 第34-35页 |
| 第4章 pUDKH稳定性试验 | 第35-41页 |
| ·稳定性观察 | 第35页 |
| ·配方 | 第35页 |
| ·温度 | 第35页 |
| ·光照 | 第35页 |
| ·仪器与方法 | 第35-36页 |
| ·实验步骤 | 第36-37页 |
| ·温度及pH影响实验 | 第36页 |
| ·pUDKH光照条件下稳定性观察 | 第36-37页 |
| ·结果与讨论 | 第37-40页 |
| ·pUDKH不同温度及pH值条件下超螺旋型式比例 | 第37-38页 |
| ·未光照样品与光照样品进行比较(HPLC分析) | 第38-40页 |
| ·电泳图分析 | 第40页 |
| ·本章小节 | 第40-41页 |
| 第5章 反相液相色谱法定量分析质粒pUDKH样品中Triton X-100 | 第41-46页 |
| ·试剂与方法 | 第41-42页 |
| ·仪器与试剂 | 第41页 |
| ·色谱条件 | 第41-42页 |
| ·Triton X-100标准液的配制 | 第42页 |
| ·实验结果 | 第42-44页 |
| ·标准曲线、线性范围及最小检测量 | 第42页 |
| ·精密度试验 | 第42-43页 |
| ·回收率试验 | 第43-44页 |
| ·pUDKH产品中Triton X-100含量分析 | 第44页 |
| ·本章小节 | 第44-46页 |
| 第6章 细菌内毒素试验 | 第46-49页 |
| ·实验仪器和试剂 | 第46-47页 |
| ·仪器 | 第46页 |
| ·试剂 | 第46-47页 |
| ·实验步骤 | 第47-48页 |
| ·样品内毒素检查 | 第47页 |
| ·鲎试剂灵敏度复核 | 第47页 |
| ·结果与讨论 | 第47-48页 |
| ·本章小结 | 第48-49页 |
| 第7章 细菌基因组DNA测定 | 第49-55页 |
| ·实验方法与试剂 | 第49-51页 |
| ·C_A~-菌DNA提取(试剂盒) | 第49-50页 |
| ·配置试剂 | 第50-51页 |
| ·实验步骤 | 第51-53页 |
| ·制备阳性对照 | 第51-52页 |
| ·点膜 | 第52页 |
| ·制备探针 | 第52页 |
| ·预杂交 | 第52页 |
| ·杂交 | 第52-53页 |
| ·显色 | 第53页 |
| ·结果与讨论 | 第53-54页 |
| ·本章小结 | 第54-55页 |
| 第8章 菌体蛋白含量测定 | 第55-60页 |
| ·BCA法测蛋白质含量 | 第55-57页 |
| ·材料与方法 | 第55页 |
| ·标准溶液的配制 | 第55页 |
| ·工作液(Standard Working Reagent)S-WR配制 | 第55-56页 |
| ·实验步骤 | 第56页 |
| ·结果与讨论 | 第56-57页 |
| ·ELISA法测蛋白含量 | 第57-59页 |
| ·试剂与仪器 | 第57-58页 |
| ·实验步骤 | 第58页 |
| ·结果与讨论 | 第58-59页 |
| ·本章小结 | 第59-60页 |
| 结论 | 第60-61页 |
| 参考文献 | 第61-67页 |
| 攻读硕士学位期间发表的论文 | 第67-68页 |
| 致谢 | 第68-70页 |
