| 第一章 文献综述 | 第1-23页 |
| 一、 纤维原始细胞分化 | 第9-10页 |
| 二、 纤维细胞的初生伸长 | 第10-18页 |
| 1 与液泡膨压有关的基因表达 | 第10-13页 |
| 2 与细胞质骨架组织化有关的基因表达 | 第13-15页 |
| 3 与细胞壁生长有关的基因表达 | 第15-18页 |
| 三、 纤维细胞次生加厚 | 第18-21页 |
| 四、 纤维成熟 | 第21-23页 |
| 第二章 GhCEL真的克隆及其序列特征分析 | 第23-49页 |
| 前言 | 第23-25页 |
| 材料与方法 | 第25-34页 |
| 1 材料 | 第25-27页 |
| ·试验材料 | 第25页 |
| ·试剂 | 第25-27页 |
| ·引物 | 第27页 |
| 2 方法 | 第27-34页 |
| ·感受态寄主菌的制备 | 第27-28页 |
| ·无菌96孔板的准备 | 第28页 |
| ·棉纤维cDNA文库的筛选 | 第28-29页 |
| ·噬菌体单斑的挑取 | 第29页 |
| ·Phagemid释放 | 第29页 |
| ·序列测定 | 第29-30页 |
| ·序列分析 | 第30页 |
| ·原核表达 | 第30-34页 |
| ·质粒提取 | 第30-31页 |
| ·质粒酶切 | 第31页 |
| ·酶切片段回收 | 第31-32页 |
| ·回收片段连接 | 第32页 |
| ·重组质粒转化DH5 α | 第32-33页 |
| ·重组质粒检测 | 第33页 |
| ·诱导表达 | 第33页 |
| ·SDS-PAGE | 第33-34页 |
| 结果与分析 | 第34-44页 |
| 一 棉纤维cDNA文库筛选体系的建立及筛选结果 | 第34-37页 |
| 1 PCR筛选cDNA文库的策略 | 第34-35页 |
| 2 棉纤维cDNA文库筛选体系的优化 | 第35页 |
| 3 棉纤维cDNA文库筛选 | 第35-37页 |
| ·第一轮96孔板筛选 | 第35-37页 |
| ·阳性孔的筛选 | 第35-36页 |
| ·最大5’端上游序列的筛选 | 第36-37页 |
| ·第二轮96孔板筛选 | 第37页 |
| ·Phagemid释放 | 第37页 |
| 4 文库筛选的结果 | 第37页 |
| 二 GhCEL蛋白全长cDNA的克隆及其特征分析 | 第37-44页 |
| 1 棉花GhCEL全长cDNA的筛选 | 第37-39页 |
| 2 GhCEL与其它植物EGase蛋白的同源性比较 | 第39-41页 |
| 3 GhCEL的亲水性分析 | 第41页 |
| 4 GhCEL酶切位点分析 | 第41-43页 |
| 5 原核表达 | 第43-44页 |
| 讨论 | 第44-49页 |
| 一、 棉纤维cDNA文库筛选 | 第44-46页 |
| 1 PCR筛选重组文库的特点 | 第44-46页 |
| 2 影响PCR筛选重组文库的因素 | 第46页 |
| 二、 GhCEL基因可能的生物学功能及其应用意义 | 第46-49页 |
| 参考文献 | 第49-56页 |
| 附录 | 第56-64页 |