英文缩略表 | 第1-10页 |
摘要 | 第10-12页 |
英文摘要 | 第12-14页 |
1 引言 | 第14-32页 |
·杨树研究进展 | 第14-20页 |
·常规育种 | 第14-15页 |
·杨树的组织培养 | 第15-17页 |
·基因工程育种 | 第17-20页 |
·几丁质酶研究进展 | 第20-24页 |
·几丁质酶的结构与功能 | 第20-21页 |
·几丁质酶的抗病作用机理 | 第21-23页 |
·几丁质酶在抗真菌病害中的应用 | 第23-24页 |
·β-1,3-葡聚糖酶研究进展 | 第24-29页 |
·β-1,3-葡聚糖酶的分类及性质 | 第24-26页 |
·β-1,3-葡聚糖酶的抗病机理 | 第26-28页 |
·β-1,3-葡聚糖酶在抗真菌病害中的应用 | 第28-29页 |
·选题依据 | 第29-32页 |
·杨树抗病研究的重要性 | 第29-30页 |
·几丁质酶和β-1,3-葡聚糖酶应用于植物抗真菌病害的可行性 | 第30页 |
·杨树转基因的可行性 | 第30-32页 |
2 材料与方法 | 第32-45页 |
·材料 | 第32-37页 |
·植物材料 | 第32页 |
·菌株与质粒 | 第32-33页 |
·细菌培养基 | 第33-34页 |
·植物激素和植物培养基 | 第34页 |
·植物激素 | 第34页 |
·植物培养基 | 第34页 |
·试剂 | 第34-37页 |
·抗生素 | 第34-35页 |
·植物基因组DNA提取液 | 第35页 |
·大肠杆菌质粒提取液 | 第35-36页 |
·提取农杆菌双元载体质粒试剂 | 第36页 |
·电泳缓冲液配制 | 第36页 |
·Southern杂交试剂 | 第36页 |
·GUS染色液的配制 | 第36-37页 |
·转基因植株细胞粗提缓冲液(TES) | 第37页 |
·酶与生化试剂 | 第37页 |
·PCR引物 | 第37页 |
·实验方法 | 第37-45页 |
·G1黑杨高频再生体系的建立 | 第37-38页 |
·组培苗得获得 | 第37-38页 |
·组培苗的壮苗培养 | 第38页 |
·组培苗的叶片再生 | 第38页 |
·组培苗根的诱导 | 第38页 |
·农杆菌介导法转基因 | 第38-39页 |
·几丁质酶基因的转化 | 第38-39页 |
·β-1,3-葡聚糖酶基因的转化 | 第39页 |
·转化植株的分子检测 | 第39-43页 |
·大肠杆菌DH5α感受态细胞的制备及转化 | 第39-40页 |
·碱法提取少量质粒DNA | 第40页 |
·提取农杆菌双元载体质粒 | 第40-41页 |
·植物基因组DNA的提取 | 第41页 |
·PCR检测 | 第41-42页 |
·PCR-Southern检测 | 第42-43页 |
·GUS基因稳定表达的组织化学染色 | 第43-44页 |
·转基因植株的体外抑菌实验 | 第44-45页 |
3 结果与分析 | 第45-62页 |
·G1黑杨高频再生体系的建立 | 第45-51页 |
·组培苗的壮苗 | 第45-47页 |
·激素的影响 | 第45-46页 |
·其他理化因素的影响 | 第46-47页 |
·玻璃化问题的解决 | 第47页 |
·组培苗的叶片再生 | 第47-50页 |
·叶片再生芽的获得 | 第47-48页 |
·不同激素浓度对G1杨叶片再生的影响 | 第48-49页 |
·叶片因素对芽分化的影响 | 第49-50页 |
·组培苗根的诱导 | 第50-51页 |
·G1黑杨组培苗生根培养基的筛选 | 第50-51页 |
·封口材料的影响 | 第51页 |
·农杆菌侵染和转基因植株的获得 | 第51-57页 |
·选择压的确定 | 第51-53页 |
·抑菌性抗生素的选择 | 第53-54页 |
·浸染时间对转化的影响 | 第54页 |
·农杆菌介导法的改良 | 第54-56页 |
·转基因植株的获得 | 第56-57页 |
·转基因植株的生物学鉴定 | 第57-60页 |
·PCR扩增检测 | 第57-58页 |
·PCR-Southern杂交检测 | 第58-59页 |
·GUS基因稳定表达的组织化学染色 | 第59-60页 |
·转基因植株的体外抑菌实验 | 第60-62页 |
4 讨论 | 第62-65页 |
·G1黑杨再生体系的建立 | 第62-63页 |
·G1黑杨转化频率问题的讨论 | 第63-64页 |
·下一步工作设想 | 第64-65页 |
5 结论 | 第65-66页 |
参考文献 | 第66-77页 |
致谢 | 第77-78页 |
攻读学位期间发表的学术论文 | 第78页 |