v-Src蛋白酪氨酸激酶的表达优化及活性的初步研究
| 第一章 Src蛋白国内外研究进展 | 第1-30页 |
| 1 Src蛋白的结构 | 第10-13页 |
| ·基因组成 | 第10页 |
| ·氨基酸组成 | 第10-12页 |
| ·结构域组成 | 第12页 |
| ·空间结构 | 第12-13页 |
| 2 Src蛋白的调控 | 第13-15页 |
| ·c-Src蛋白的转录调控 | 第13-14页 |
| ·c-Src蛋白的翻译后调控 | 第14-15页 |
| 3 Src蛋白的功能 | 第15-21页 |
| ·细胞的粘着和运动 | 第15-18页 |
| ·细胞的分裂增殖 | 第18-19页 |
| ·细胞存活 | 第19-20页 |
| ·血管收缩 | 第20-21页 |
| ·胞内运输 | 第21页 |
| 4 Src蛋白信号转导途径 | 第21-23页 |
| ·Src蛋白与生长因子信号转导 | 第21页 |
| ·Src蛋白与细胞因子信号转导 | 第21页 |
| ·Src蛋白与整合蛋白受体信号转导 | 第21-22页 |
| ·Src蛋白与G蛋白信号转导 | 第22页 |
| ·其他 | 第22-23页 |
| 5 Src蛋白与肿瘤的相关性 | 第23-24页 |
| 6 Src蛋白抑制剂 | 第24-26页 |
| 参考文献 | 第26-30页 |
| 第二章 v-src基因的克隆与融合表达 | 第30-36页 |
| 1 概述 | 第30页 |
| 2 实验方法和结果 | 第30-34页 |
| ·PCR引物设计及T-A克隆 | 第30-32页 |
| ·pGEX-KT／v-src表达质粒的构建 | 第32页 |
| ·GST-Src蛋白的诱导表达 | 第32-33页 |
| ·GST-Src蛋白的纯化 | 第33-34页 |
| 3 本章小结 | 第34-35页 |
| 参考文献 | 第35-36页 |
| 第三章 GST-Src融合蛋白的表达优化 | 第36-67页 |
| 1 概述 | 第36-38页 |
| 2 实验材料和仪器 | 第38-42页 |
| ·感受态细胞和菌株 | 第38页 |
| ·质粒 | 第38页 |
| ·酶 | 第38页 |
| ·分子量标准 | 第38页 |
| ·试剂盒 | 第38-39页 |
| ·常用缓冲液和贮存液 | 第39-40页 |
| ·培养基 | 第40-41页 |
| ·化学试剂 | 第41页 |
| ·仪器设备 | 第41-42页 |
| 3 实验方法 | 第42-49页 |
| ·pGEX-KT／v-src表达质粒的抽提 | 第42-43页 |
| ·酶切检测与琼脂糖凝胶电泳 | 第43-44页 |
| ·大肠杆菌转化 | 第44-45页 |
| ·GST-Src蛋白的诱导表达 | 第45-47页 |
| ·GST-Src蛋白的纯化 | 第47-48页 |
| ·GST-Src蛋白包涵体的抽提 | 第48页 |
| ·蛋白浓度的测定 | 第48-49页 |
| 4 实验结果 | 第49-64页 |
| ·酶切检测质粒pGEX-KT／v-src | 第49-50页 |
| ·GST-Src蛋白的诱导表达 | 第50-56页 |
| ·GST-Src蛋白的纯化 | 第56-58页 |
| ·GST-Src蛋白包涵体的抽提 | 第58-60页 |
| ·蛋白浓度的测定 | 第60-64页 |
| 5 本章小结 | 第64-66页 |
| 参考文献 | 第66-67页 |
| 第四章 Src蛋白酪氨酸激酶活性的研究 | 第67-76页 |
| 1 概述 | 第67-68页 |
| 2 实验材料和仪器 | 第68-69页 |
| ·试剂盒 | 第68页 |
| ·缓冲液和贮存液 | 第68页 |
| ·化学试剂 | 第68页 |
| ·仪器设备 | 第68-69页 |
| 3 实验方法 | 第69-70页 |
| ·磷酸肽标准曲线的制备 | 第69页 |
| ·酪氨酸激酶活性分析 | 第69-70页 |
| 4 实验结果 | 第70-75页 |
| ·最适反应时间的确定 | 第70-71页 |
| ·酪氨酸激酶活性分析 | 第71-75页 |
| 5 本章小结 | 第75页 |
| 参考文献 | 第75-76页 |
| 第五章 应用前景及后续工作的建议 | 第76-78页 |
| 1 应用前景 | 第76-77页 |
| 2 后续工作建议 | 第77-78页 |
| 致谢 | 第78页 |
