中文摘要 | 第1-7页 |
英文摘要 | 第7-9页 |
前言 | 第9-10页 |
第一部分 PP3105全长cDNA的分离及基因基本性状的描述 | 第10-34页 |
材料与方法 | 第10页 |
材料 | 第10-13页 |
1、 引物 | 第10页 |
2、 主要试剂和实验材料 | 第10-11页 |
3、 细胞株和组织标本 | 第11页 |
4、 培养基和常用溶液 | 第11-12页 |
5、 实验仪器 | 第12-13页 |
方法 | 第13-16页 |
1、 全长cDNA克隆 | 第13-14页 |
2、 Northern杂交 | 第14-15页 |
3、 RH基因染色体定位 | 第15-16页 |
结果 | 第16-31页 |
1、 全长cDNA克隆 | 第16-23页 |
2、 NorthernBlotting多组织膜片结果 | 第23-24页 |
3、 PP3105-A及PP3105-B的同源性比较 | 第24-28页 |
4、 PP3105-A和PP3105-B的多种分子生物学功能位点 | 第28-29页 |
5、 RH基因染色体定位 | 第29-31页 |
讨论与小结 | 第31页 |
讨论 | 第31-33页 |
1、 功能克隆 | 第31页 |
2、 PP3105Northern杂交 | 第31页 |
3、 PP3105的可变剪切 | 第31-32页 |
4、 RH基因染色体定位 | 第32-33页 |
小结 | 第33-34页 |
第二部分 全长新基因PP3105对癌细胞生长的影响及其在细胞中的定位 | 第34-44页 |
材料与方法 | 第34页 |
材料 | 第34-35页 |
1、 引物 | 第34页 |
2、 细胞株 | 第34页 |
3、 载体 | 第34页 |
4、 培养基和常用溶液 | 第34-35页 |
5、 仪器 | 第35页 |
方法 | 第35-37页 |
1、 质粒的构建 | 第35页 |
2、 细胞转染及阳性克隆的筛选 | 第35-36页 |
3、 亚细胞定位 | 第36页 |
4、 细胞集落形成实验 | 第36页 |
5、 筛选单克隆及绘制生长曲线 | 第36-37页 |
结果 | 第37-41页 |
1、 pcDNA4/HisMaxTOPO/PP3105-A质粒 | 第37页 |
2、 pEGFP-N1/PP3105-A质粒 | 第37-38页 |
3、 亚细胞定位结果 | 第38-39页 |
4、 PP3105-A抑制肝癌细胞SMMC7721的生长 | 第39-41页 |
讨论与小结 | 第41页 |
讨论 | 第41-43页 |
1、 重组表达载体的酶切鉴定 | 第41-42页 |
2、 亚细胞定位 | 第42页 |
3、 细胞集落形成实验和生长曲线 | 第42-43页 |
小结 | 第43-44页 |
参考文献 | 第44-46页 |
综述 | 第46-50页 |
参考文献 | 第50-53页 |
致谢 | 第53页 |