| 中文摘要 | 第1-5页 |
| ABSTRACT | 第5-7页 |
| 第一部分 前言与文献综述 | 第7-26页 |
| 1 生物农药--世界发展新动向 | 第7-8页 |
| 2 昆虫神经肽--有希望的新型昆虫防治剂 | 第8-16页 |
| ·主要神经肽种类及其生理机制 | 第9-14页 |
| ·神经肽研究应用于害虫防治的可能性和前景分析 | 第14-16页 |
| 3 大肠杆菌表达系统 | 第16-19页 |
| ·在胞内直接表达重组蛋白 | 第17页 |
| ·以融合形式表达重组蛋白 | 第17-18页 |
| ·重组蛋白分泌到周质 | 第18页 |
| ·重组蛋白分泌到胞外培养基中 | 第18-19页 |
| 4 抗血清的制备 | 第19-24页 |
| ·半抗原免疫原的制备 | 第19-21页 |
| ·免疫动物 | 第21-23页 |
| ·免疫吸附测定 | 第23-24页 |
| 5 本实验的研究目的和意义 | 第24-25页 |
| 6 本实验的技术路线 | 第25-26页 |
| 第二部分 Grb-AST_7的构建与表达 | 第26-49页 |
| 材料与方法 | 第26-37页 |
| 1 材料与试剂 | 第26页 |
| ·质粒与菌种 | 第26页 |
| ·试剂 | 第26页 |
| ·引物合成与DNA测序 | 第26页 |
| 2 Grb-AST_7串联体的构建 | 第26-32页 |
| ·引物设计与合成 | 第26页 |
| ·PCR法拼接 | 第26-27页 |
| ·PCR产物回收 | 第27-28页 |
| ·PCR拼接产物的克隆 | 第28-32页 |
| 3 Grb-AST_7串联体的表达 | 第32-37页 |
| ·表达载体的构建 | 第33-35页 |
| ·Grb-AST_7串联体基因在BL21(DE3)pLysS中的表达 | 第35-36页 |
| ·表达产物的SDS-PAGE | 第36-37页 |
| 结果与分析 | 第37-46页 |
| 1 串联体的拼接 | 第37-39页 |
| ·引物的设计 | 第37页 |
| ·Grb-AST_7串联体的拼接 | 第37-39页 |
| 2 Grb-AST_7串联体的克隆 | 第39-42页 |
| 3 Grb-AST_7串联体的表达分析 | 第42-46页 |
| ·表达载体的构建 | 第42-45页 |
| ·表达分析 | 第45-46页 |
| 结论 | 第46-47页 |
| 讨论 | 第47-49页 |
| 1 Grb-AST_7串联体的构建 | 第47页 |
| 2 Grb-AST_7串联体的表达 | 第47-49页 |
| 第三部分 抗血清的制备 | 第49-57页 |
| 1 材料与试剂 | 第49-50页 |
| ·材料 | 第49页 |
| ·实验动物 | 第49页 |
| ·试剂 | 第49-50页 |
| 2 方法与步骤 | 第50-53页 |
| ·试剂的配制 | 第50页 |
| ·半抗原与载体的连接 | 第50-51页 |
| ·弗氏佐剂(Freund adjuvant)的制作 | 第51页 |
| ·多肽的快速乳化 | 第51-52页 |
| ·免疫兔子 | 第52页 |
| ·抗血清的收集与保存 | 第52页 |
| ·酶联免疫吸附测定抗血清的效价 | 第52-53页 |
| 3 结果与分析 | 第53-55页 |
| ·合成多肽 | 第53-54页 |
| ·AST_7与BSA的偶联 | 第54页 |
| ·乳化剂鉴定 | 第54页 |
| ·ELISA测定抗体效价 | 第54-55页 |
| 4 结论 | 第55页 |
| 5 讨论 | 第55-57页 |
| ·半抗原与载体的偶联 | 第55页 |
| ·抗血清的制作 | 第55-57页 |
| 参考文献 | 第57-62页 |
| 致谢 | 第62页 |