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猪轮状病毒地方株的分离鉴定及其VP6基因的克隆与原核表达

摘要第1-9页
英文摘要第9-11页
1 前言第11-24页
   ·RV的基本特性第11-14页
     ·病毒粒子形态结构第11-12页
     ·RV的抗原及分型第12-13页
     ·RV的培养特性和理化学特性第13页
     ·RV血凝及蚀斑形成特性第13-14页
   ·RV的分子生物学研究进展第14-19页
     ·RV的基因组结构特征第14-15页
     ·RV的遗传变异第15页
     ·RV蛋白及其功能第15-19页
   ·RV诊断技术综述第19-20页
     ·RV诊断方法及特点第19-20页
     ·猪RV诊断第20页
   ·RV疫苗研究进展第20-23页
     ·RV口服减毒活疫苗第20-21页
     ·RV多价重组疫苗第21页
     ·RV亚单位疫苗或多肽疫苗第21-22页
     ·RV DNA疫苗第22页
     ·RV疫苗开发前景第22-23页
   ·本课题研究的目的意义第23-24页
2 材料与方法第24-33页
   ·实验材料第24-25页
     ·病料与细胞第24页
     ·质粒与菌株第24页
     ·引物第24页
     ·酶类及主要生化试剂第24页
     ·主要实验仪器设备第24-25页
   ·实验方法第25-33页
     ·病毒的分离鉴定及其部分特性研究第25-27页
     ·VP6基因的克隆与序列测定第27-30页
     ·JL94株VP6基因原核表达载体的构建第30页
     ·VP6基因在大肠杆菌中的表达与纯化第30-33页
3 实验结果第33-40页
   ·病毒的分离鉴定及部分特性研究第33-34页
     ·细胞病变第33页
     ·电镜观察第33页
     ·RNA电泳型第33-34页
     ·病毒蚀斑第34页
     ·病毒血凝特性第34页
   ·VP6基因的克隆与序列测定第34-36页
     ·RT-PCR结果第35页
     ·pMD18-T-VP6重组质粒鉴定第35页
     ·VP6核苷酸序列测定及同源性比较第35-36页
   ·重组原核表达载体pET-30a-VP6的鉴定第36页
   ·VP6基因在大肠杆菌中的表达与纯化第36-40页
     ·表达产物的SDS-PAGE第36页
     ·融合蛋白表达效率第36-37页
     ·包函体的SDS-PAGE第37-38页
     ·表达产物的Western-blot第38-39页
     ·融合蛋白纯化SDS-PAGE和Western-blot检测第39-40页
4 讨论第40-44页
   ·病毒的分离及其部分特性研究第40页
   ·VP6基因的克隆与序列分析第40-41页
   ·VP6的表达及抗原反应性检测第41-42页
   ·VP6的纯化第42-44页
5 结论第44-45页
参考文献第45-52页
附录第52-59页
攻读硕士期间发表的学术论文第59-60页
致谢第60页

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