中文摘要 | 第1-7页 |
英文摘要 | 第7-9页 |
符号说明 | 第9-10页 |
第一部分 文献综述 | 第10-26页 |
1 绵羊痒病研究概况 | 第10-11页 |
2 病原 | 第11-18页 |
·朊蛋白 | 第11-14页 |
·朊病毒 | 第14-15页 |
·朊病毒的形成 | 第15-17页 |
·抗PrP~(Sc)形成的研究 | 第17页 |
·朊病毒作用于细胞的可能机制 | 第17-18页 |
3 流行病学 | 第18-24页 |
·易感动物 | 第18-19页 |
·潜伏期与发病年龄 | 第19页 |
·传播途径 | 第19-20页 |
·临床症状 | 第20-21页 |
·诊断 | 第21-24页 |
4 防制 | 第24-26页 |
第二部分 实验部分 | 第26-64页 |
第一章 小尾寒羊朊蛋白核心片段的基因克隆和序列分析 | 第26-38页 |
1 材料和方法 | 第27-32页 |
·材料 | 第27-28页 |
·方法 | 第28-32页 |
2 结果 | 第32-34页 |
·小尾寒羊PrP~c核心片段基因PCR扩增 | 第32-33页 |
·PCR筛选重组质粒PrP-pET-32a(+)阳性克隆 | 第33-34页 |
·PrP-pET-32a(+)基因序列分析结果 | 第34页 |
3 讨论 | 第34-38页 |
第二章 小尾寒羊朊蛋白核心片段原核表达特性的研究和融合蛋白鉴定 | 第38-55页 |
1 材料和方法 | 第39-43页 |
·材料 | 第39-40页 |
·方法 | 第40-43页 |
2 结果 | 第43-52页 |
·表达质粒PrP-pET-32a(+)在不同条件下的稳定性 | 第43-44页 |
·不同诱导温度对融合蛋白Trx-PrP~c27-30表达量的影响 | 第44-45页 |
·不同诱导时间对融合蛋白Trx-PrP~c27-30表达量的影响 | 第45-46页 |
·不同浓度AMP对融合蛋白Trx-PrPC27-30表达量的影响 | 第46-48页 |
·不同IPTG浓度对融合蛋白Trx-PrP~c27-30表达量的影响 | 第48-49页 |
·不同乳糖浓度对融合蛋白Trx-PrP~c27-30表达量的影响 | 第49-50页 |
·融合蛋白Trx-PrPC27-30在细菌E.coli BL21(DE3)内的分布 | 第50页 |
·融合蛋白Trx-PrP~c27-30的纯化 | 第50-51页 |
·Western-Blot鉴定小尾寒羊PrP~c核心蛋白 | 第51-52页 |
3 讨论 | 第52-55页 |
第三章 串联克隆表达小尾寒羊朊蛋白核心片段初探 | 第55-64页 |
1 材料和方法 | 第56-57页 |
·酶切 | 第56-57页 |
·连接 | 第57页 |
2 结果 | 第57-59页 |
·PCR鉴定串联重组表达质PrPx-pET-32a(+)阳性克隆 | 第57-58页 |
·使用串联克隆PrPx-pET-32a(+)表达和纯化小尾寒羊朊蛋白核心片段 | 第58-59页 |
3 讨论 | 第59-64页 |
全文总结 | 第64-65页 |
参考文献: | 第65-69页 |
附录一 各种溶液的配制 | 第69-71页 |
附录二 PrP-pET-32a(+)测序结果 | 第71-74页 |
致谢 | 第74页 |