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小尾寒羊朊蛋白核心片段的基因克隆、原核表达、纯化与鉴定

中文摘要第1-7页
英文摘要第7-9页
符号说明第9-10页
第一部分 文献综述第10-26页
 1 绵羊痒病研究概况第10-11页
 2 病原第11-18页
   ·朊蛋白第11-14页
   ·朊病毒第14-15页
   ·朊病毒的形成第15-17页
   ·抗PrP~(Sc)形成的研究第17页
   ·朊病毒作用于细胞的可能机制第17-18页
 3 流行病学第18-24页
   ·易感动物第18-19页
   ·潜伏期与发病年龄第19页
   ·传播途径第19-20页
   ·临床症状第20-21页
   ·诊断第21-24页
 4 防制第24-26页
第二部分 实验部分第26-64页
 第一章 小尾寒羊朊蛋白核心片段的基因克隆和序列分析第26-38页
  1 材料和方法第27-32页
   ·材料第27-28页
   ·方法第28-32页
  2 结果第32-34页
   ·小尾寒羊PrP~c核心片段基因PCR扩增第32-33页
   ·PCR筛选重组质粒PrP-pET-32a(+)阳性克隆第33-34页
   ·PrP-pET-32a(+)基因序列分析结果第34页
  3 讨论第34-38页
 第二章 小尾寒羊朊蛋白核心片段原核表达特性的研究和融合蛋白鉴定第38-55页
  1 材料和方法第39-43页
   ·材料第39-40页
   ·方法第40-43页
  2 结果第43-52页
   ·表达质粒PrP-pET-32a(+)在不同条件下的稳定性第43-44页
   ·不同诱导温度对融合蛋白Trx-PrP~c27-30表达量的影响第44-45页
   ·不同诱导时间对融合蛋白Trx-PrP~c27-30表达量的影响第45-46页
   ·不同浓度AMP对融合蛋白Trx-PrPC27-30表达量的影响第46-48页
   ·不同IPTG浓度对融合蛋白Trx-PrP~c27-30表达量的影响第48-49页
   ·不同乳糖浓度对融合蛋白Trx-PrP~c27-30表达量的影响第49-50页
   ·融合蛋白Trx-PrPC27-30在细菌E.coli BL21(DE3)内的分布第50页
   ·融合蛋白Trx-PrP~c27-30的纯化第50-51页
   ·Western-Blot鉴定小尾寒羊PrP~c核心蛋白第51-52页
  3 讨论第52-55页
 第三章 串联克隆表达小尾寒羊朊蛋白核心片段初探第55-64页
  1 材料和方法第56-57页
   ·酶切第56-57页
   ·连接第57页
  2 结果第57-59页
   ·PCR鉴定串联重组表达质PrPx-pET-32a(+)阳性克隆第57-58页
   ·使用串联克隆PrPx-pET-32a(+)表达和纯化小尾寒羊朊蛋白核心片段第58-59页
  3 讨论第59-64页
全文总结第64-65页
参考文献:第65-69页
附录一 各种溶液的配制第69-71页
附录二 PrP-pET-32a(+)测序结果第71-74页
致谢第74页

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