小鼠胚胎干细胞定向诱导分化成骨细胞研究
| 引言 | 第1-17页 |
| 第一篇 文献综述 | 第17-71页 |
| 第一章 胚胎干细胞研究进展 | 第17-71页 |
| 1 胚胎发育与干细胞 | 第17-26页 |
| ·EC细胞 | 第18-19页 |
| ·EC细胞系的建立 | 第18-19页 |
| ·EC细胞的分化潜能 | 第19页 |
| ·EC细胞与正常胚胎细胞的关系 | 第19页 |
| ·ES细胞 | 第19-22页 |
| ·ES细胞系的建立 | 第20-21页 |
| ·ES细胞的分化潜能 | 第21页 |
| ·ES细胞与EC细胞和ICM的异同 | 第21-22页 |
| ·EG细胞 | 第22-24页 |
| ·EG细胞系的建立 | 第22-23页 |
| ·EG细胞的分化潜能 | 第23页 |
| ·EG细胞与ES细胞的异同 | 第23-24页 |
| ·AS细胞 | 第24-26页 |
| ·AS细胞的分离培养 | 第24-25页 |
| ·AS细胞的分化潜能 | 第25页 |
| ·AS细胞的局限性 | 第25-26页 |
| 2 ES细胞的分离培养 | 第26-48页 |
| ·ES细胞的分离培养方法 | 第26-31页 |
| ·胚胎发育阶段的选择 | 第26-27页 |
| ·早期胚胎的处理 | 第27-29页 |
| ·ES细胞的分离培养 | 第29-31页 |
| ·ES细胞的冻存与解冻 | 第31页 |
| ·影响ES细胞分离培养的因素 | 第31-39页 |
| ·动物的遗传背景 | 第31-32页 |
| ·培养基及其添加物 | 第32-34页 |
| ·饲养层种类及状态 | 第34-37页 |
| ·细胞分化抑制因子 | 第37-39页 |
| ·ES细胞的鉴定 | 第39-48页 |
| ·形态及生长特征 | 第39-41页 |
| ·碱性磷酸酶活性 | 第41-42页 |
| ·染色体数目和核型分析 | 第42页 |
| ·体外分化能力 | 第42-43页 |
| ·体内分化能力 | 第43-45页 |
| ·嵌合体形成能力 | 第45-48页 |
| 3 ES细胞的体外定向诱导分化 | 第48-67页 |
| ·分化诱导因素 | 第48-51页 |
| ·化学诱导物 | 第48-49页 |
| ·细胞因子 | 第49-50页 |
| ·转录因子 | 第50-51页 |
| ·诱导分化方法 | 第51页 |
| ·单层ES细胞诱导分化 | 第51页 |
| ·EBs培养和诱导分化 | 第51页 |
| ·体外诱导分化细胞类型 | 第51-67页 |
| ·造血系细胞 | 第52-54页 |
| ·心肌细胞 | 第54-56页 |
| ·神经细胞 | 第56-60页 |
| ·脂肪细胞 | 第60-62页 |
| ·胰岛细胞 | 第62-63页 |
| ·内皮细胞 | 第63-64页 |
| ·上皮细胞 | 第64页 |
| ·肝细胞 | 第64-65页 |
| ·成骨细胞 | 第65页 |
| ·软骨细胞 | 第65页 |
| ·树状细胞 | 第65-66页 |
| ·黑素细胞 | 第66页 |
| ·角膜缘干细胞 | 第66页 |
| ·表皮样干细胞 | 第66-67页 |
| 4 ES细胞的潜在应用前景 | 第67-69页 |
| ·研究基因的表达与调控 | 第67页 |
| ·生产克隆动物 | 第67页 |
| ·生产转基因动物 | 第67页 |
| ·用于疾病治疗 | 第67-68页 |
| ·建立药效评价模型 | 第68-69页 |
| 5 小结 | 第69-71页 |
| 第二篇 试验研究 | 第71-111页 |
| 第二章 MEF分离培养及生长曲线测定 | 第71-79页 |
| 1 材料与方法 | 第71-74页 |
| ·材料 | 第71-72页 |
| ·试验动物 | 第71页 |
| ·主要试剂 | 第71-72页 |
| ·主要器材 | 第72页 |
| ·方法 | 第72-74页 |
| ·溶液配制 | 第72-73页 |
| ·MEF的分离培养 | 第73页 |
| ·MEF生长曲线的测定 | 第73-74页 |
| 2 结果 | 第74-77页 |
| ·MEF的生长行为 | 第74-75页 |
| ·MEF生长曲线的测定结果 | 第75-77页 |
| 3 讨论 | 第77-78页 |
| ·关于MEF的分离与培养 | 第77页 |
| ·不同接种密度对MEF的影响 | 第77-78页 |
| ·不同换液时间对MEF的影响 | 第78页 |
| 4 小结 | 第78-79页 |
| 第三章 小鼠ES细胞分离与克隆 | 第79-89页 |
| 1 材料和方法 | 第79-82页 |
| ·材料 | 第79-80页 |
| ·试验动物 | 第79页 |
| ·主要试剂 | 第79-80页 |
| ·主要器材 | 第80页 |
| ·方法 | 第80-82页 |
| ·溶液配制 | 第80页 |
| ·MEF饲养层的制备 | 第80-81页 |
| ·小鼠ES细胞的分离与克隆 | 第81-82页 |
| 2 结果 | 第82-86页 |
| ·丝裂霉素C对MEF生长的影响 | 第82-84页 |
| ·MEF饲养层的制备 | 第84页 |
| ·小鼠ES细胞的分离与克隆 | 第84-86页 |
| 3 讨论 | 第86-88页 |
| ·丝裂霉素C对MEF生长的影响 | 第86-87页 |
| ·MEF饲养层的制备及其特性 | 第87页 |
| ·小鼠ES细胞的分离与克隆 | 第87-88页 |
| 4 小结 | 第88-89页 |
| 第四章 小鼠ES细胞扩增与分化能力检测 | 第89-100页 |
| 1 材料与方法 | 第89-91页 |
| ·材料 | 第89页 |
| ·试验细胞 | 第89页 |
| ·主要试剂 | 第89页 |
| ·主要器材 | 第89页 |
| ·方法 | 第89-91页 |
| ·MEF和STO饲养单层的制备 | 第89-90页 |
| ·小鼠ES细胞的扩增培养 | 第90页 |
| ·小鼠ES细胞分化能力检测 | 第90-91页 |
| 2 结果 | 第91-96页 |
| ·STO细胞的生长行为 | 第91-92页 |
| ·小鼠ES细胞的扩增培养 | 第92-93页 |
| ·不同血清对小鼠ES细胞生长的影响 | 第92页 |
| ·不同饲养层对小鼠ES细胞生长的影响 | 第92-93页 |
| ·小鼠ES细胞的体外分化能力 | 第93-96页 |
| 3 讨论 | 第96-99页 |
| ·小鼠ES细胞的体外扩增培养 | 第96-97页 |
| ·小鼠ES细胞的悬浮培养 | 第97-98页 |
| ·小鼠ES细胞的分化能力 | 第98-99页 |
| 4 小结 | 第99-100页 |
| 第五章 小鼠ES细胞定向诱导分化成骨细胞 | 第100-111页 |
| 1 材料与方法 | 第100-103页 |
| ·材料 | 第100-101页 |
| ·试验动物 | 第100页 |
| ·试验细胞 | 第100页 |
| ·主要试剂 | 第100-101页 |
| ·主要器材 | 第101页 |
| ·方法 | 第101-103页 |
| ·溶液的配制 | 第101页 |
| ·小鼠成骨细胞条件培养基的制备 | 第101-102页 |
| ·小鼠ES细胞的成骨细胞诱导分化 | 第102-103页 |
| 2 结果 | 第103-107页 |
| ·小鼠成骨细胞条件培养基的制备 | 第103-104页 |
| ·小鼠成骨细胞的生长行为 | 第103页 |
| ·小鼠成骨细胞的BCIP/NBT染色 | 第103-104页 |
| ·小鼠成骨细胞条件培养基的制备 | 第104页 |
| ·EBs单细胞的生长行为 | 第104页 |
| ·不同添加物的成骨细胞诱导分化作用 | 第104-107页 |
| 3 讨论 | 第107-110页 |
| ·小鼠原代成骨细胞条件培养基的制备 | 第107-108页 |
| ·条件培养基的成骨细胞诱导分化作用 | 第108页 |
| ·化学诱导物的成骨细胞诱导分化作用 | 第108-109页 |
| ·关于成骨细胞的鉴定 | 第109-110页 |
| 4 小结 | 第110-111页 |
| 结论 | 第111-112页 |
| 进一步研究的课题 | 第112-113页 |
| 参考文献 | 第113-139页 |
| 英汉缩略语 | 第139-145页 |
| 作者简介 | 第145-146页 |
