中文摘要 | 第1-7页 |
英文摘要 | 第7-9页 |
文献综述 | 第9-25页 |
·水稻抗稻瘟病的研究进展 | 第9-12页 |
·稻瘟病的分布、危害、症状识别、发病特点、传播途径和发病条件 | 第9-12页 |
·分布与危害 | 第9页 |
·症状识别 | 第9-10页 |
·发病特点 | 第10-11页 |
·传播途径 | 第11页 |
·发病条件 | 第11-12页 |
·水稻抗稻瘟病的分子机理的研究 | 第12页 |
·稻瘟病抗性研究进展 | 第12页 |
·稻瘟病抗性基因的定位 | 第12页 |
·已克隆的抗稻瘟病基因 | 第12页 |
·植物抗病基因(Diseases Resistance Genes) | 第12-21页 |
·抗性基因(Resistance Genes)和防卫基因(Defense-Related Gene) | 第13-17页 |
·目前已经克隆的植物抗病基因 | 第14-15页 |
·植物抗性基因 | 第14-15页 |
·植物防卫基因 | 第15页 |
·植物的抗病机制 | 第15-17页 |
·宿主植物和病原物的识别 | 第16页 |
·超敏反应(Hypersensive Response简称HR) | 第16-17页 |
·系统获得抗性(Systematic Acquired Resistance简称SAR) | 第17页 |
·植物抗病基因的克隆策略 | 第17-21页 |
·功能克隆(Functional Cloning)-已知基因编码产物的克隆方法 | 第17-18页 |
·表型克隆(Phenotype Cloning) | 第18页 |
·转座子标签法和T-DNA标签技术 | 第18-19页 |
·鸟枪克隆法(Bird Gun Cloning) | 第19页 |
·mRNA差异显示技术(mRNA Differential Display) | 第19页 |
·定位克隆(Positional Cloning) | 第19-20页 |
·序列克隆(Sequence Cloning) | 第20-21页 |
·mRNA差异显示技术存在的问题及改进方法 | 第21-24页 |
·引物设计 | 第23页 |
·锚定引物和随机引物 | 第23-24页 |
·开题设想及本研究的目的和意义 | 第24-25页 |
材料与方法 | 第25-32页 |
·材料 | 第25页 |
·方法 | 第25-32页 |
·稻瘟病菌分生孢子悬浮液的制备 | 第25-26页 |
·病菌诱导及取材 | 第26页 |
·具体实验过程 | 第26-32页 |
·RNA的制备 | 第26-27页 |
·反转录 | 第27页 |
·DD-PCR反应 | 第27页 |
·PCR扩增产物的检测-聚丙烯酰胺凝胶电泳及银染 | 第27-28页 |
·胶上回收差异片段和cDNA重扩增 | 第28-29页 |
·Dot-blot验证 | 第29页 |
·克隆与测序 | 第29-31页 |
·对测序结果进行数据库搜索 | 第31-32页 |
结果与分析 | 第32-39页 |
·RNA粗提及纯化的结果 | 第32页 |
·差异显示结果(银染法) | 第32-34页 |
·回收差异片段的重扩增和Dot-blot验证 | 第34-35页 |
·核酸和氨基酸比较分析 | 第35-39页 |
讨论 | 第39-43页 |
·关于DDRT-PCR的假阳 | 第39页 |
·关于斑点杂交 | 第39-40页 |
·关于差异片段与水稻抗瘟性的关系 | 第40-41页 |
·关于植物受到外界刺激的防卫反应过程 | 第41-43页 |
附录一 6个片段的测序结果 | 第43-45页 |
附录二 6个片段在公共数据库上核酸比较结果 | 第45-49页 |
附录三 片段Z7和SSR-8的blastx氨基酸比较结果 | 第49-50页 |
附录四 pGEM-T载体结构示意图如下 | 第50-51页 |
参考文献 | 第51-60页 |
致谢 | 第60页 |