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mRNA差异显示分离水稻抗稻瘟病基因的相关cDNA片段

中文摘要第1-7页
英文摘要第7-9页
文献综述第9-25页
   ·水稻抗稻瘟病的研究进展第9-12页
     ·稻瘟病的分布、危害、症状识别、发病特点、传播途径和发病条件第9-12页
       ·分布与危害第9页
       ·症状识别第9-10页
       ·发病特点第10-11页
       ·传播途径第11页
       ·发病条件第11-12页
       ·水稻抗稻瘟病的分子机理的研究第12页
         ·稻瘟病抗性研究进展第12页
         ·稻瘟病抗性基因的定位第12页
         ·已克隆的抗稻瘟病基因第12页
   ·植物抗病基因(Diseases Resistance Genes)第12-21页
     ·抗性基因(Resistance Genes)和防卫基因(Defense-Related Gene)第13-17页
       ·目前已经克隆的植物抗病基因第14-15页
         ·植物抗性基因第14-15页
         ·植物防卫基因第15页
       ·植物的抗病机制第15-17页
         ·宿主植物和病原物的识别第16页
         ·超敏反应(Hypersensive Response简称HR)第16-17页
         ·系统获得抗性(Systematic Acquired Resistance简称SAR)第17页
     ·植物抗病基因的克隆策略第17-21页
       ·功能克隆(Functional Cloning)-已知基因编码产物的克隆方法第17-18页
       ·表型克隆(Phenotype Cloning)第18页
       ·转座子标签法和T-DNA标签技术第18-19页
       ·鸟枪克隆法(Bird Gun Cloning)第19页
       ·mRNA差异显示技术(mRNA Differential Display)第19页
       ·定位克隆(Positional Cloning)第19-20页
       ·序列克隆(Sequence Cloning)第20-21页
   ·mRNA差异显示技术存在的问题及改进方法第21-24页
     ·引物设计第23页
     ·锚定引物和随机引物第23-24页
   ·开题设想及本研究的目的和意义第24-25页
材料与方法第25-32页
   ·材料第25页
   ·方法第25-32页
     ·稻瘟病菌分生孢子悬浮液的制备第25-26页
     ·病菌诱导及取材第26页
     ·具体实验过程第26-32页
       ·RNA的制备第26-27页
       ·反转录第27页
       ·DD-PCR反应第27页
       ·PCR扩增产物的检测-聚丙烯酰胺凝胶电泳及银染第27-28页
       ·胶上回收差异片段和cDNA重扩增第28-29页
       ·Dot-blot验证第29页
       ·克隆与测序第29-31页
       ·对测序结果进行数据库搜索第31-32页
结果与分析第32-39页
   ·RNA粗提及纯化的结果第32页
   ·差异显示结果(银染法)第32-34页
   ·回收差异片段的重扩增和Dot-blot验证第34-35页
   ·核酸和氨基酸比较分析第35-39页
讨论第39-43页
   ·关于DDRT-PCR的假阳第39页
   ·关于斑点杂交第39-40页
   ·关于差异片段与水稻抗瘟性的关系第40-41页
   ·关于植物受到外界刺激的防卫反应过程第41-43页
附录一 6个片段的测序结果第43-45页
附录二 6个片段在公共数据库上核酸比较结果第45-49页
附录三 片段Z7和SSR-8的blastx氨基酸比较结果第49-50页
附录四 pGEM-T载体结构示意图如下第50-51页
参考文献第51-60页
致谢第60页

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