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农杆菌介导的草坪草遗传转化研究

摘要第1-7页
英文摘要第7-9页
第一部分 文献综述第9-24页
 引言第9-10页
 1 草坪草遗传转化研究进展第10-24页
   ·草坪草的组织培养第11-14页
     ·愈伤组织培养第11-12页
     ·花药培养第12-13页
     ·悬浮细胞和原生质体培养第13页
     ·茎尖分生组织培养第13-14页
   ·遗传转化方法第14-21页
     ·原生质体DNA直接吸入法第14-15页
     ·基因枪法第15页
     ·碳化硅纤维介导转化法第15-18页
     ·农杆菌介导转化法第18-21页
   ·转基因细胞或植株的筛选和鉴定第21-24页
第二部分 研究报告第24-65页
 第一章 高羊茅植株再生体系的建立第24-38页
  1 材料与方法第24-27页
   ·材料第24-26页
     ·草坪草品种第24页
     ·化学试剂和仪器第24-25页
     ·试验方案和培养基第25-26页
   ·方法第26-27页
     ·种子的组织培养第26-27页
     ·数据处理第27页
  2 结果与分析第27-36页
   ·不同培养基中种子的发芽情况第27页
   ·生长激素和ABA对高羊茅愈伤诱导和分化的影响第27-30页
   ·不同浓度2,4-D对高羊茅植株再生的影响第30页
   ·氨基酸对高羊茅组织培养的影响第30-33页
   ·有机成分对高羊茅愈伤诱导和植株再生的影响第33-35页
   ·6-BA不同浓度对高羊茅组织培养的影响第35页
   ·再生苗的移栽和在田间的生长情况第35-36页
  3 讨论第36-38页
 第二章 几种作用因子对多年生黑麦草组织培养影响的研究第38-49页
  1 材料与方法第39-40页
   ·材料第39页
     ·草坪草品种第39页
     ·化学试剂和仪器第39页
     ·培养基第39页
   ·方法第39-40页
     ·材料处理第39页
     ·培养方法第39页
     ·数据处理第39-40页
  2 结果和分析第40-47页
   ·组织培养基本情况第40-41页
   ·2,4-D浓度对愈伤组织诱导和再生的影响第41-43页
   ·不同的激素和激素组合对愈伤诱导和植株再生的影响第43-44页
   ·不同碳源对愈伤组织诱导和分化的影响第44-45页
   ·不同浓度的有机添加物对植株再生的影响第45-46页
   ·耐热多年生黑麦草植株的获得第46页
   ·白化苗的产生第46-47页
  3 讨论第47-49页
 第三章 农杆菌介导的抗除草剂基因对草坪草的遗传转化第49-65页
  1 材料与方法第49-58页
   ·材料第49-52页
     ·草坪草品种第49页
     ·菌株第49-50页
     ·质粒载体第50页
     ·主要试剂和酶类第50页
     ·培养基第50-52页
   ·方法第52-58页
     ·质粒DNA的制备第52-53页
     ·大肠杆菌的转化第53页
     ·碱裂解法提取质粒第53-54页
     ·质粒DNA的酶切鉴定第54页
     ·农杆菌的转化第54-55页
     ·农杆菌转化子的鉴定第55页
     ·根癌农杆菌介导的草坪草遗传转化第55-56页
     ·转化植株的鉴定第56-58页
  2 结果与分析第58-63页
   ·筛选压的选择第58页
   ·质粒的酶切鉴定第58-59页
   ·草坪草的遗传转化第59-62页
     ·遗传转化体系的建立第59-60页
     ·抗性愈伤的筛选第60页
     ·抗性植株的再生第60-62页
   ·转基因植株的检测第62-63页
     ·转基因植株的PCR检测第62-63页
     ·转基因植株的田间检测结果第63页
  3 讨论第63-65页
参考文献第65-72页
附录A 主要化学试剂、分子生物学试剂及仪器第72-73页
附录B 培养基母液及其配制方法第73-76页
附录C 本文所用缩略词-中英文对照第76-77页
致谢第77页

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