中文摘要 | 第1-10页 |
英文摘要 | 第10-13页 |
第一章 文献综述 | 第13-33页 |
1 多肽在内质网的折叠 | 第13-16页 |
1.1 糖调节蛋白78(GRP78/Bip) | 第13-14页 |
1.2 糖调节蛋白94(GRP94) | 第14页 |
1.3 蛋白二硫化物异构酶(PDI) | 第14-15页 |
1.4 钙联接蛋白(Calnexin) | 第15页 |
1.5 钙网霉素(Calreticulin) | 第15页 |
1.6 受体相关蛋白 | 第15页 |
1.7 成熟蛋白从内质网的运出 | 第15-16页 |
2 错误折叠的蛋白质在内质网的降解 | 第16-18页 |
2.1 蛋白酶体参与的蛋白质降解 | 第17页 |
2.2 程序性细胞器降解 | 第17页 |
2.3 泛素系统参与的蛋白质降解 | 第17-18页 |
2.4 特殊形式的蛋白质降解 | 第18页 |
3 细胞对内质网上的错误折叠蛋白的反应 | 第18-19页 |
3.1 聚集体的形成 | 第18页 |
3.2 未折叠蛋白反应(UPR) | 第18-19页 |
3.3 内源性蛋白质转移的下降 | 第19页 |
3.4 信号转导途径 | 第19页 |
4 应激与内质网分子伴侣 | 第19-22页 |
4.1 应激对内质网分子伴侣的诱导 | 第19-20页 |
4.2 应激诱导的主要内质网分子伴侣的作用 | 第20-22页 |
5 肺癌与内质网分子伴侣GRP78、GRP94和PDI | 第22-24页 |
5.1 肺癌的一般特性 | 第22页 |
5.2 肺癌与内质网分子伴侣 | 第22-24页 |
6 结语 | 第24页 |
7 前景展望 | 第24页 |
8 本研究的设计思路与具体安排 | 第24-26页 |
参考文献 | 第26-33页 |
第二章 实验材料和基本方法 | 第33-43页 |
1 实验材料 | 第33-36页 |
1.1 主要试剂 | 第33页 |
1.2 仪器、物品 | 第33-34页 |
1.3 实验患者的一般情况 | 第34-36页 |
2 基本实验方法 | 第36-43页 |
2.1 RNA提取 | 第36-37页 |
2.2 半定量RT-PCR | 第37-38页 |
2.3 蛋白提取及Western杂交 | 第38-40页 |
2.4 免疫组化染色 | 第40页 |
2.5 琼脂糖凝胶电泳 | 第40-41页 |
2.6 非变性聚丙烯酰胺凝胶 | 第41-42页 |
参考文献 | 第42-43页 |
第三章 内质网分子伴侣GRP94在人肺癌组织中的表达及其意义 | 第43-59页 |
1 实验材料 | 第43页 |
2 实验方法 | 第43-46页 |
2.1 RNA提取 | 第44页 |
2.2 半定量RT-PCR | 第44页 |
2.3 蛋白提取及Western杂交 | 第44-45页 |
2.4 免疫组化染色 | 第45-46页 |
2.5 统计学分析 | 第46页 |
3 结果与讨论 | 第46-53页 |
3.1 总RNA提取质量分析 | 第46页 |
3.2 GRP94 mRNA水平的表达 | 第46-48页 |
3.3 GRP94蛋白水平的表达 | 第48-53页 |
3.3.1 Western杂交结果 | 第48-50页 |
3.3.2 免疫组化染色结果 | 第50-53页 |
3.4 讨论 | 第53页 |
4 结论 | 第53-57页 |
参考文献 | 第57-59页 |
第四章 内质网分子伴侣GRP78在人肺癌组织中的高表达及其意义 | 第59-74页 |
1 实验材料 | 第59页 |
2 实验方法 | 第59-61页 |
2.1 RNA提取 | 第59页 |
2.2 半定量RT-PCR | 第59-60页 |
2.3 蛋白提取及Western杂交 | 第60-61页 |
2.4 免疫组化染色 | 第61页 |
2.5 统计学分析 | 第61页 |
3 结果与讨论 | 第61-69页 |
3.1 总RNA提取质量分析 | 第61-62页 |
3.2 GRP78 mRNA水平的表达 | 第62-64页 |
3.3 GRP78蛋白水平的表达 | 第64-68页 |
3.3.1 Western杂交结果 | 第64-66页 |
3.3.2 免疫组化染色结 | 第66-68页 |
3.4 讨论 | 第68-69页 |
4 结论 | 第69-72页 |
参考文献 | 第72-74页 |
第五章 内质网分子伴侣蛋白二硫化物异构酶(PDI)在肺癌中的表达及其意义 | 第74-89页 |
1 实验材料 | 第74页 |
2 实验方法 | 第74-76页 |
2.1 RNA提取 | 第74页 |
2.2 半定量RT-PCR | 第74-75页 |
2.3 蛋白提取及Western杂交 | 第75-76页 |
2.4 免疫组化染色 | 第76页 |
2.5 统计学分析 | 第76页 |
3 结果与讨论 | 第76-84页 |
3.1 总RNA提取质量分析 | 第76-77页 |
3.2 PDI mRNA水平的表达 | 第77-79页 |
3.3 PDI蛋白水平的表达 | 第79-83页 |
3.3.1 Western杂交结果 | 第79-81页 |
3.3.2 免疫组化染色 | 第81-83页 |
3.4 讨论 | 第83-84页 |
4 结论 | 第84-87页 |
参考文献 | 第87-89页 |
第六章 内质网分子伴侣GRP94、GRP78和PDI在人体肺癌组织中表达的比较 | 第89-104页 |
1 实验材料 | 第89页 |
2 实验方法 | 第89页 |
3 结果与讨论 | 第89-96页 |
3.1 分子伴侣GRP94、GRP78和PDI在mRNA水平表达的比较 | 第89-91页 |
3.2 分子伴侣GRP94、GRP78和PDI在蛋白水平表达的比较 | 第91-95页 |
3.2.1 Western杂交结果 | 第92-93页 |
3.2.2 免疫组化染色结果 | 第93-95页 |
3.3 讨论 | 第95-96页 |
4 结论 | 第96-103页 |
参考文献 | 第103-104页 |
第七章 结论与展望 | 第104-106页 |
1 主要结论 | 第104页 |
2 创新点 | 第104-105页 |
3 有待于进一步开展的工作 | 第105-106页 |
附录Ⅰ 缩略语表 | 第106-108页 |
附录Ⅱ 论文发表情况 | 第108-109页 |
致谢 | 第109-110页 |