第一部分 综述 | 第1-23页 |
一、 活性氧与盐胁迫 | 第9-18页 |
1 活性氧的产生机制 | 第9-10页 |
2 活性氧造成的氧化损伤 | 第10页 |
3 谷胱甘肽转移酶(GST) | 第10-17页 |
3.1 谷胱甘肽转移酶(GST)的分布及分类 | 第10-11页 |
3.2 谷胱甘肽转移酶(GST)的结构及特点 | 第11页 |
3.3 谷胱甘肽转移酶(GST)在细胞中的脱毒机制 | 第11-12页 |
3.4 谷胱甘肽转移酶(GST)与除草剂抗性 | 第12-13页 |
3.5 谷胱甘肽转移酶(GST)与活性氧胁迫 | 第13-14页 |
3.6 谷胱甘肽转移酶(GST)的GPOX活性 | 第14-16页 |
3.7 谷胱甘肽转移酶(GST)与生长素(auxin) | 第16页 |
3.8 谷胱甘肽转移酶GST基因的表达调控 | 第16-17页 |
4 酶促反应系统的其它酶类 | 第17-18页 |
二、 突变体功能研究 | 第18-23页 |
1 功能缺失突变(loss-of-function) | 第19-20页 |
2 功能获得突变(gain-of-function) | 第20-23页 |
第二部分 实验论文 | 第23-41页 |
第一章 盐地碱蓬GST基因cDNA的克隆与表达分析 | 第23-33页 |
一、 材料和方法 | 第23-27页 |
1 实验材料 | 第23-24页 |
2 实验方法 | 第24-27页 |
2.1 基本分子生物学方法 | 第24-25页 |
2.2 GST基因cDNA的克隆 | 第25页 |
2.3 植物表达框架的构建 | 第25页 |
2.4 基因组DNA的Southern杂交 | 第25-26页 |
2.5 Northern印迹杂交 | 第26-27页 |
二、 实验结果与分析 | 第27-31页 |
1 GST基因的cDNA全长序列 | 第28-30页 |
1.1 EST的BLAST分析 | 第28页 |
1.2 GST cDNA的全长序列 | 第28-30页 |
2 植物表达框架的构建 | 第30-31页 |
3 盐地碱蓬GST基因拷贝数的检测 | 第31页 |
4 盐地碱蓬GST基因的诱导表达 | 第31页 |
三、 讨论 | 第31-32页 |
匹、 结论 | 第32-33页 |
第二章 碱蓬cDNA过量表达文库转化拟南芥的研究 | 第33-41页 |
一、 材料和方法 | 第33页 |
1 实验材料 | 第33页 |
二 实验方法 | 第33-37页 |
2.1 基本分子生物学方法 | 第34页 |
2.2 过量表达载体的构建 | 第34页 |
2.3 cDNA过量表达文库的构建 | 第34页 |
2.4 cDNA过量表达文库的鉴定 | 第34页 |
2.5 农杆菌的电击转化 | 第34-35页 |
2.6 拟南芥的转化 | 第35-36页 |
2.7 转化植株的筛选 | 第36页 |
2.8 转基因植株的分析 | 第36-37页 |
二、 实验结果与分析 | 第37-39页 |
1 cDNA表达文库的检测 | 第37-38页 |
1.1 随机单克隆的酶切鉴定 | 第37-38页 |
1.2 质粒的PCR鉴定 | 第38页 |
1.3 随机克隆的测序 | 第38页 |
2 农杆菌的电击转化检测 | 第38页 |
3 拟南芥的遗传转化 | 第38-39页 |
4 转基因植株的分析 | 第39页 |
4.1 转基因植株的PCR鉴定 | 第39页 |
4.2 转基因植株的遗传学分析 | 第39页 |
4.3 转基因植株的耐盐性分析 | 第39页 |
三、 讨论 | 第39-41页 |
1 转基因植株的鉴定 | 第39-40页 |
2 转基因植株的耐盐性分析 | 第40页 |
3 碱蓬cDNA过量表达文库的意义 | 第40-41页 |
附图 | 第41-48页 |
附页 | 第48-50页 |
参考文献 | 第50-58页 |
致谢 | 第58页 |