| 摘要 | 第1-7页 |
| ABSTRACT | 第7-14页 |
| 文献综述 | 第14-28页 |
| 第一章 BCL10 基因研究进展 | 第14-23页 |
| ·BCL10 蛋白的结构与功能特点 | 第14-15页 |
| ·BCL10 蛋白在免疫系统的作用机制 | 第15-23页 |
| ·黏膜相关淋巴组织（MALT）淋巴瘤的研究进展 | 第15-17页 |
| ·NF-кB 信号通路 | 第17-20页 |
| ·BCL10 基因在MALT 淋巴瘤中的作用机制 | 第20-23页 |
| 第二章 生物信息学在基因功能研究中的应用 | 第23-28页 |
| ·生物信息学的概念 | 第23页 |
| ·生物信息学的基本内容 | 第23-25页 |
| ·DNA 序列的比对和分析 | 第23-24页 |
| ·基因识别 | 第24页 |
| ·蛋白质结构分析与预测 | 第24-25页 |
| ·分子进化 | 第25页 |
| ·应用生物信息学手段寻找新基因 | 第25-26页 |
| ·生物信息学数据库 | 第26-28页 |
| ·信息检索系统 | 第26-27页 |
| ·蛋白质基本性质分析数据库 | 第27页 |
| ·蛋白质二级结构预测数据库 | 第27页 |
| ·蛋白质三级结构预测软件 | 第27-28页 |
| 试验研究 | 第28-75页 |
| 第三章 猪天然免疫新基因BCL10 的克隆与生物信息学分析 | 第28-46页 |
| ·材料 | 第28-30页 |
| ·组织来源 | 第28页 |
| ·主要试剂和工具酶 | 第28页 |
| ·菌株及载体 | 第28-29页 |
| ·主要仪器与设备 | 第29页 |
| ·试剂及溶液配制 | 第29-30页 |
| ·主要分子生物学软件 | 第30页 |
| ·主要数据库与在线分析工具 | 第30页 |
| ·方法 | 第30-36页 |
| ·候选基因BCL10 的电子克隆策略 | 第30-31页 |
| ·电子克隆BCL10 基因的识别 | 第31页 |
| ·BCL10 基因的分子克隆 | 第31-35页 |
| ·阳性重组质粒的酶切鉴定 | 第35页 |
| ·BCL10 基因序列测定与结果分析 | 第35页 |
| ·BCL10 基因核苷酸序列及推导氨基酸序列分析 | 第35页 |
| ·BCL10 基因系统发生进化关系分析 | 第35-36页 |
| ·BCL10 基因序列结构与生物信息学分析 | 第36页 |
| ·结果与分析 | 第36-43页 |
| ·BCL10 基因的电子克隆结果 | 第36-37页 |
| ·获得新序列的开放阅读框的寻找、全长cDNA 的识别及基因转录调控基序分析 | 第37页 |
| ·BCL10 基因的RT-PCR 扩增 | 第37-38页 |
| ·重组质粒的酶切鉴定结果 | 第38页 |
| ·测序结果及分析 | 第38-39页 |
| ·不同物种间BCL10 基因的同源性比对 | 第39-40页 |
| ·BCL10 基因系统发生进化关系分析 | 第40-41页 |
| ·猪BCL10 蛋白的生物信息学分析 | 第41-43页 |
| ·讨论 | 第43-44页 |
| ·小结 | 第44-46页 |
| 第四章 猪BCL10 基因的组织表达差异研究 | 第46-51页 |
| ·材料 | 第46页 |
| ·组织来源 | 第46页 |
| ·主要试剂和工具酶 | 第46页 |
| ·主要仪器 | 第46页 |
| ·方法 | 第46-47页 |
| ·RNA 提取 | 第46页 |
| ·反转录 | 第46页 |
| ·PCR 扩增 | 第46-47页 |
| ·RT-PCR 扩增产物的电泳和定量分析 | 第47页 |
| ·统计分析 | 第47页 |
| ·结果与分析 | 第47-49页 |
| ·猪各组织提取的RNA | 第47-48页 |
| ·各组织BCL10 及其β-actin 基因的扩增 | 第48页 |
| ·各组织BCL10 基因mRNA 表达丰度的差异性检验 | 第48-49页 |
| ·讨论 | 第49-50页 |
| ·小结 | 第50-51页 |
| 第五章 猪BCL10 基因在哺乳动物细胞中的表达 | 第51-64页 |
| ·材料 | 第51-53页 |
| ·质粒与菌株 | 第51页 |
| ·工具酶、主要试剂和耗材 | 第51页 |
| ·质粒纯化试剂 | 第51-52页 |
| ·细胞培养用试剂 | 第52页 |
| ·细胞消化试剂 ATV（Antibiotic trypsin versen） | 第52-53页 |
| ·主要仪器与设备 | 第53页 |
| ·方法 | 第53-58页 |
| ·BCL10 重组克隆载体质粒的构建 | 第53-54页 |
| ·BCL10 基因重组真核表达质粒的构建 | 第54-55页 |
| ·重组质粒的鉴定 | 第55页 |
| ·阳性重组表达质粒pEGFP-BCL10 及pEGFP-C1 质粒的纯化 | 第55-56页 |
| ·新霉素（G418）最佳筛选浓度的确定 | 第56页 |
| ·pEGFP-BCL10 及pEGFP-C1 质粒转染 PK-15 细胞 | 第56-57页 |
| ·G418 筛选及阳性细胞的获得 | 第57页 |
| ·转染后阳性细胞的鉴定 | 第57-58页 |
| ·结果与分析 | 第58-61页 |
| ·BCL10 基因的 PCR 扩增结果 | 第58页 |
| ·BCL10 基因重组克隆载体质粒的构建结果 | 第58-59页 |
| ·BCL10 基因重组真核表达载体pEGFP-BCL10 的构建结果 | 第59页 |
| ·重组表达质粒及pEGFP-BCL10 及pEGFP-C1 质粒的纯化结果 | 第59页 |
| ·新霉素（G418）对PK-15 细胞最佳筛选浓度的确定 | 第59页 |
| ·转染成功的鉴定及转染条件的确定 | 第59-60页 |
| ·转染后阳性细胞的获得 | 第60页 |
| ·阳性细胞克隆的PCR 鉴定 | 第60-61页 |
| ·讨论 | 第61-63页 |
| ·脂质体介导的基因转染 | 第61-62页 |
| ·真核表达载体的选择 | 第62页 |
| ·表达BCL10 蛋白阳性细胞的获得 | 第62-63页 |
| ·小结 | 第63-64页 |
| 第六章 猪BCL10 基因在大肠杆菌中的表达 | 第64-75页 |
| ·材料 | 第64-67页 |
| ·菌株与质粒 | 第64页 |
| ·主要工具酶和试剂 | 第64页 |
| ·主要仪器和设备 | 第64-65页 |
| ·普通试剂的配制 | 第65页 |
| ·SDS-PAGE 常用试剂配制 | 第65-67页 |
| ·方法 | 第67-70页 |
| ·BCL10 基因原核表达载体质粒的构建 | 第67-68页 |
| ·重组质粒的提取及鉴定 | 第68-69页 |
| ·重组质粒在大肠杆菌中的表达 | 第69页 |
| ·表达产物的SDS-PAGE 检测 | 第69-70页 |
| ·结果与分析 | 第70-72页 |
| ·BCL10 基因的 PCR 扩增结果 | 第70页 |
| ·BCL10 基因克隆载体的构建结果 | 第70-71页 |
| ·BCL10 基因原核表达载体质粒的构建结果 | 第71-72页 |
| ·重组质粒pET-BCL10 原核表达产物的 SDS-PAGE 检测结果 | 第72页 |
| ·讨论 | 第72-74页 |
| ·大肠杆菌表达系统的选择策略 | 第72页 |
| ·表达条件的优化 | 第72-73页 |
| ·BCL10 外源蛋白融合表达的特点 | 第73-74页 |
| ·小结 | 第74-75页 |
| 结论 | 第75-76页 |
| 参考文献 | 第76-83页 |
| 附录1 | 第83-84页 |
| 附录2 | 第84-85页 |
| 论文中应用的缩略词 | 第84-85页 |
| 致谢 | 第85-86页 |
| 个人简介 | 第86页 |
