| 摘要 | 第1-4页 |
| Abstract | 第4-8页 |
| 第一章 绪论 | 第8-17页 |
| ·纤维素简介 | 第8页 |
| ·纤维素酶研究进展 | 第8-13页 |
| ·纤维素酶的来源 | 第9页 |
| ·纤维素酶的分子结构 | 第9-11页 |
| ·纤维素酶的作用机制 | 第11-12页 |
| ·纤维素酶基因的克隆 | 第12-13页 |
| ·纤维素酶的应用 | 第13-14页 |
| ·食品工业中的应用 | 第13页 |
| ·在饲料工业中的应用 | 第13-14页 |
| ·在纺织工业中的应用 | 第14页 |
| ·在其它工业中的应用 | 第14页 |
| ·巴斯德毕赤酵母表达系统简介 | 第14-15页 |
| ·毕赤酵母的生物学特点 | 第14-15页 |
| ·毕赤酵母表达宿主菌 | 第15页 |
| ·毕赤酵母的表达载体 | 第15页 |
| ·研究目的和立题依据 | 第15-16页 |
| ·研究内容 | 第16-17页 |
| 第二章 中性内切型葡聚糖酶基因的克隆与序列分析 | 第17-25页 |
| ·引言 | 第17页 |
| ·材料 | 第17-18页 |
| ·主要仪器 | 第17页 |
| ·化学试剂 | 第17页 |
| ·质粒与菌株 | 第17页 |
| ·溶液配制 | 第17-18页 |
| ·PCR 扩增引物 | 第18页 |
| ·培养基 | 第18页 |
| ·方法 | 第18-20页 |
| ·DNA 琼脂糖电泳后的割胶回收 | 第18-19页 |
| ·大肠杆菌质粒的小量制备 | 第19页 |
| ·大肠杆菌感受态的制备 | 第19页 |
| ·转化感受态大肠杆菌 | 第19页 |
| ·草菇总RNA 提取 | 第19-20页 |
| ·cDNA 第一条链的合成 | 第20页 |
| ·目的基因的PCR 扩增、克隆和测序 | 第20页 |
| ·结果与分析 | 第20-24页 |
| ·草菇总RNA 的提取 | 第20页 |
| ·目的基因的PCR 扩增和克隆 | 第20-21页 |
| ·草菇中性EG1cDNA 的序列分析 | 第21-24页 |
| ·小结 | 第24-25页 |
| 第三章 egⅠ在大肠杆菌和毕赤酵母中的表达 | 第25-35页 |
| ·引言 | 第25页 |
| ·材料 | 第25-26页 |
| ·化学试剂 | 第25页 |
| ·实验仪器 | 第25页 |
| ·菌株与质粒 | 第25页 |
| ·PCR 引物 | 第25页 |
| ·培养基 | 第25-26页 |
| ·SDS-PAGE 凝胶电泳试剂配制 | 第26页 |
| ·方法 | 第26-30页 |
| ·中性内切型EG1 的酶活力测定 | 第26-27页 |
| ·表达重组蛋白的SDS-PAGE 电泳检测 | 第27-28页 |
| ·EGⅠ在大肠杆菌中的表达 | 第28页 |
| ·EGⅠ在毕赤酵母中的表达 | 第28-30页 |
| ·结果与分析 | 第30-34页 |
| ·大肠杆菌表达载体的构建 | 第30页 |
| ·大肠杆菌工程菌株的表达产物分析 | 第30-31页 |
| ·毕赤酵母表达载体的构建 | 第31-32页 |
| ·毕赤酵母工程菌株的筛选和验证 | 第32页 |
| ·毕赤酵母工程菌株的表达产物分析 | 第32-33页 |
| ·毕赤酵母工程菌株的稳定性检测 | 第33页 |
| ·G418 抗性与毕赤酵母工程菌株产酶量的关系 | 第33-34页 |
| ·小结 | 第34-35页 |
| 第四章 egⅠ在毕赤酵母中表达条件的优化和酶学性质研究 | 第35-41页 |
| ·引言 | 第35页 |
| ·材料 | 第35页 |
| ·试验仪器 | 第35页 |
| ·化学试剂 | 第35页 |
| ·培养基 | 第35页 |
| ·方法 | 第35-36页 |
| ·重组毕赤酵母摇瓶发酵条件的优化 | 第35-36页 |
| ·粗酶液的酶学性质研究 | 第36页 |
| ·结果与分析 | 第36-39页 |
| ·摇瓶发酵条件的优化 | 第36-38页 |
| ·粗酶酶学性质的研究 | 第38-39页 |
| ·小结 | 第39-41页 |
| 结论和展望 | 第41-43页 |
| 致谢 | 第43-44页 |
| 参考文献 | 第44-48页 |
| 附录：作者在攻读硕士学位期间发表的论文 | 第48页 |