提要 | 第1-8页 |
第一章 绪论 | 第8-21页 |
·概述 | 第8-12页 |
·溶菌酶简介 | 第12-17页 |
·溶菌酶的分类 | 第12-13页 |
·溶菌酶的组成及性质 | 第13页 |
·溶菌酶的基因、结构与功能 | 第13-14页 |
·溶菌酶的应用 | 第14-16页 |
·溶菌酶的表达 | 第16-17页 |
·核肽酶简介 | 第17-19页 |
·研究内容 | 第19-21页 |
第二章 实验材料 | 第21-31页 |
·仪器与试剂 | 第21-30页 |
·实验仪器 | 第21-22页 |
·试剂及配制方法 | 第22-28页 |
·酶和其它试剂及来源 | 第28-30页 |
·菌株和质粒 | 第30-31页 |
第三章“双功能”酶与“双中心”酶的构建和表达 | 第31-66页 |
·实验设计 | 第31-32页 |
·“双功能”酶基因的构建和表达 | 第32-51页 |
·“双功能”酶基因的构建 | 第32-38页 |
·HLY-RD(HLY-2R)基因的表达 | 第38-41页 |
·目的蛋白的纯化 | 第41-43页 |
·实验结果 | 第43-51页 |
·“双中心”酶基因的构建和表达 | 第51-66页 |
·“双中心”酶基因的构建 | 第51-56页 |
·“双中心”酶基因的表达 | 第56-58页 |
·目的蛋白的纯化 | 第58-59页 |
·实验结果 | 第59-66页 |
第四章“双功能”酶的酶学性质及结构与功能的研究 | 第66-81页 |
·“双功能”酶的酶学性质 | 第66-70页 |
·“双功能”酶的溶菌酶活性测定[82] | 第66-67页 |
·“双功能”酶针对溶菌酶活性的热稳定性研究. | 第67页 |
·“双功能”酶针对溶菌酶活性的pH 稳定性研究 | 第67页 |
·体外类RNase 活性检测 | 第67-70页 |
·HLY-RD(HLY-2R)结构与功能研究 | 第70-71页 |
·HLY-RD(HLY-2R)圆二色谱的测定 | 第70页 |
·HLY-RD(HLY-2R)荧光光谱的测定 | 第70页 |
·HLY-RD(HLY-2R)紫外吸收光谱的测定 | 第70-71页 |
·三级结构的模拟 | 第71页 |
·实验结果与讨论 | 第71-81页 |
·HLY-RD(HLY-2R)的酶学性质 | 第71-74页 |
·HLY-RD(HLY-2R)结构与功能研究 | 第74-80页 |
·讨论 | 第80-81页 |
第五章 “双中心”酶双活性中心的确定及性质功能研究 | 第81-98页 |
·双活性中心的确定 | 第81-90页 |
·实验原理 | 第81-82页 |
·“双中心”酶基因突变体的构建 | 第82-84页 |
·“双中心”溶菌酶突变体在大肠杆菌中的诱导表达 | 第84页 |
·“双中心”溶菌酶突变体的纯化 | 第84页 |
·“双中心”溶菌酶突变体活性分析 | 第84页 |
·实验结果与讨论 | 第84-90页 |
·“双中心”溶菌酶的酶学性质 | 第90-93页 |
·“双中心”溶菌酶热稳定性的测定 | 第90页 |
·“双中心”溶菌酶pH 稳定性的测定 | 第90页 |
·金属离子对“双中心”溶菌酶活性的影响 | 第90-91页 |
·实验结果与讨论 | 第91-93页 |
·“双中心”酶结构与功能研究 | 第93-98页 |
·三级结构的模拟 | 第93页 |
·HLY-E2 的圆二色谱 | 第93页 |
·HLY-E2 的荧光光谱 | 第93-94页 |
·实验结果与讨论 | 第94-98页 |
第六章 结论 | 第98-99页 |
参考文献 | 第99-108页 |
摘要 | 第108-111页 |
Abstract | 第111-116页 |
致谢 | 第116-117页 |
攻读博士期间发表的论文 | 第117页 |