| 内容提要 | 第1-11页 |
| 第一章 前言 | 第11-48页 |
| ·古细菌 | 第11-17页 |
| ·古细菌的分类 | 第12-13页 |
| ·古细菌的形态与结构 | 第13-14页 |
| ·古细菌的遗传与代谢 | 第14-15页 |
| ·古细菌的繁殖及生态 | 第15页 |
| ·代表性古细菌 | 第15-16页 |
| ·古细菌研究展望 | 第16-17页 |
| ·嗜热酶 | 第17-20页 |
| ·嗜热酶的稳定性机制 | 第17-18页 |
| ·嗜热酶的应用 | 第18-20页 |
| ·脯氨酰寡肽酶家族 | 第20-34页 |
| ·POP（prolyl oligopeptidase）家族简介 | 第20-21页 |
| ·酰基氨肽酶/酰基肽水解酶简介 | 第21-23页 |
| ·脯氨酰寡肽酶家族的结构特征 | 第23-34页 |
| ·嗜热酶APE1547 | 第34-38页 |
| ·嗜热酶APE1547 简介 | 第34-36页 |
| ·嗜热酶APE1547 的结构研究进展 | 第36-38页 |
| ·本论文研究背景与设计思想 | 第38-39页 |
| ·参考文献 | 第39-48页 |
| 第二章 APE1547 酰基氨肽酶性质及钙离子对酶活的影响 | 第48-67页 |
| ·引言 | 第48页 |
| ·实验材料 | 第48-49页 |
| ·实验仪器 | 第48页 |
| ·实验试剂 | 第48-49页 |
| ·实验方法 | 第49-51页 |
| ·酰基氨肽酶活力测定 | 第49-50页 |
| ·温度对酶活力的影响 | 第50页 |
| ·pH 对酶活力的影响 | 第50页 |
| ·金属离子对酶活力的影响 | 第50页 |
| ·氨基酸对酶活力的影响 | 第50-51页 |
| ·酶的热稳定性研究 | 第51页 |
| ·不同浓度的CaCl_2 对酰基氨肽酶的影响 | 第51页 |
| ·Ca~(2+)对酶荧光的猝灭 | 第51页 |
| ·在最适温度下二级结构随Ca~(2+)浓度变化的研究 | 第51页 |
| ·结果与讨论 | 第51-64页 |
| ·底物特异性及动力学 | 第51-52页 |
| ·温度对酶活力的影响 | 第52-54页 |
| ·pH 对酶活力的影响 | 第54-55页 |
| ·金属离子对酶活力的影响 | 第55页 |
| ·氨基酸对APE1547 酯酶活力和酰基氨肽酶的影响 | 第55-57页 |
| ·不同浓度的CaCl_2 对酰基氨肽酶活力的影响 | 第57-58页 |
| ·荧光猝灭及荧光猝灭类型的确定 | 第58-60页 |
| ·钙离子与酶结合常数和结合位点数 | 第60-62页 |
| ·在最适温度下二级结构随Ca~(2+)浓度变化的研究 | 第62-64页 |
| ·小结 | 第64-65页 |
| ·参考文献 | 第65-67页 |
| 第三章 推进器结构域的基因克隆、表达、纯化及其性质研究 | 第67-90页 |
| ·引言 | 第67-68页 |
| ·实验材料与仪器 | 第68-70页 |
| ·实验材料 | 第68-70页 |
| ·主要仪器 | 第70页 |
| ·实验方法 | 第70-78页 |
| ·推进器结构域的基因克隆 | 第70-75页 |
| ·重组蛋白的表达与纯化 | 第75-77页 |
| ·蛋白质浓度的测定 | 第77页 |
| ·圆二色谱测定 | 第77页 |
| ·荧光光谱测定 | 第77页 |
| ·差式扫描量热测定酶热力学常数 | 第77-78页 |
| ·热稳定性测定 | 第78页 |
| ·盐酸胍和尿素诱导变性 | 第78页 |
| ·结果与讨论 | 第78-88页 |
| ·推进器结构域蛋白重组质粒的构建 | 第78-79页 |
| ·推进器结构域蛋白表达条件的优化及分离纯化 | 第79-81页 |
| ·重组蛋白的热稳定性研究 | 第81-83页 |
| ·变性剂对蛋白稳定性的影响 | 第83-88页 |
| ·小结 | 第88页 |
| ·参考文献 | 第88-90页 |
| 第四章 催化结构域的克隆、表达、纯化及性质研究 | 第90-120页 |
| ·引言 | 第90-91页 |
| ·实验材料与仪器 | 第91页 |
| ·实验材料 | 第91页 |
| ·实验仪器 | 第91页 |
| ·实验方法 | 第91-97页 |
| ·催化结构域表达载体的构建 | 第91-93页 |
| ·重组蛋白表达条件的优化 | 第93-94页 |
| ·重组蛋白的分离纯化 | 第94-95页 |
| ·蛋白浓度的测定 | 第95页 |
| ·酯酶活力测定 | 第95-96页 |
| ·温度对酶活力的影响 | 第96页 |
| ·pH 对酶活力的影响 | 第96页 |
| ·动力学测定 | 第96页 |
| ·酯酶的底物特异性 | 第96页 |
| ·金属离子和表面活性剂对酶活的影响 | 第96页 |
| ·酶的热稳定性测定 | 第96-97页 |
| ·实验结果与讨论 | 第97-117页 |
| ·催化结构域 | 第97-98页 |
| ·重组C1 和C2 蛋白的诱导表达 | 第98-103页 |
| ·催化结构域蛋白的分离纯化 | 第103-107页 |
| ·温度对催化结构域蛋白酯酶活力的影响 | 第107-108页 |
| ·pH 对酶活的影响 | 第108-109页 |
| ·动力学 | 第109-110页 |
| ·底物特异性 | 第110-111页 |
| ·金属离子对酶活的影响 | 第111-112页 |
| ·重组蛋白的热稳定性 | 第112-113页 |
| ·讨论 | 第113-117页 |
| ·小结 | 第117-118页 |
| ·参考文献 | 第118-120页 |
| 结论与展望 | 第120-122页 |
| 创新点 | 第122-123页 |
| 攻读博士期间主要成果 | 第123-124页 |
| 致谢 | 第124-125页 |
| 中文摘要 | 第125-128页 |
| ABSTRACT | 第128-131页 |
