| 摘要 | 第1-5页 |
| ABSTRACT | 第5-12页 |
| 第1章 引言 | 第12-34页 |
| ·Wnt 及其信号转导通路 | 第12-22页 |
| ·Wnt 基因的发现及Wnt 信号传导通路的建立 | 第13-14页 |
| ·经典Wnt 信号通路 | 第14-15页 |
| ·非经典Wnt 通路 | 第15-16页 |
| ·经典 Wnt 通路的传递及调控 | 第16-22页 |
| ·Dapper 蛋白家族的研究 | 第22-27页 |
| ·Dpr 的发现 | 第22-23页 |
| ·Dpr 蛋白的结构域特征 | 第23-24页 |
| ·Dpr 在胚胎发育中的功能 | 第24-25页 |
| ·Dpr 对Wnt 信号的调控 | 第25-26页 |
| ·Dpr 在TGF-β/Nodal 信号通路中的作用 | 第26页 |
| ·Dpr 与肿瘤的关系 | 第26-27页 |
| ·Dpr 的亚细胞定位 | 第27页 |
| ·信号分子的核质穿梭 | 第27-33页 |
| ·核孔复合体（nuclear pore complex, NPC）简介 | 第27-28页 |
| ·跨核膜转运受体 | 第28-29页 |
| ·特异的定位信号序列 | 第29-30页 |
| ·跨核膜转运机制 | 第30-32页 |
| ·Wnt 信号通路分子的核质穿梭现象 | 第32-33页 |
| ·本研究的目的及内容 | 第33-34页 |
| 第2章 实验材料与方法 | 第34-42页 |
| ·实验材料 | 第34-36页 |
| ·主要试剂 | 第34页 |
| ·溶液配置 | 第34-36页 |
| ·实验仪器 | 第36页 |
| ·实验方法 | 第36-42页 |
| ·细胞培养 | 第36页 |
| ·细胞转染 | 第36-37页 |
| ·免疫印迹 | 第37页 |
| ·免疫共沉淀 | 第37-38页 |
| ·siRNA 质粒的构建 | 第38页 |
| ·稳定细胞系的建立 | 第38-39页 |
| ·细胞总 RNA 提取及反转录 PCR | 第39页 |
| ·染色体免疫共沉淀 | 第39页 |
| ·报告基因检测 | 第39-40页 |
| ·免疫荧光 | 第40-41页 |
| ·体外转录和显微注射斑马鱼胚胎 | 第41页 |
| ·流式细胞仪方法检测细胞周期 | 第41-42页 |
| 第3章 Dpr1 是一种核质穿梭蛋白质 | 第42-51页 |
| ·Dpr1 的亚细胞定位 | 第42-44页 |
| ·外源Dpr1 的亚细胞定位 | 第42-43页 |
| ·内源Dpr1 的亚细胞定位 | 第43-44页 |
| ·Dpr1 的定位信号序列 | 第44-49页 |
| ·Dpr1 信号序列的大概定位 | 第44-46页 |
| ·Dpr1 有高度保守的出核定位信号（NES） | 第46-47页 |
| ·Dpr1 蛋白有高度保守的入核定位信号（NLS） | 第47-49页 |
| ·总结与讨论 | 第49-51页 |
| 第4章 Dpr1 在核内抑制Wnt 信号 | 第51-58页 |
| ·核内Dpr1 在细胞水平的抑制作用 | 第51-55页 |
| ·核内Dpr1 对Wnt-1 激活的报告基因的作用 | 第51-52页 |
| ·核内Dpr1 对β-catenin 激活的报告基因的作用 | 第52-54页 |
| ·核内Dpr1 对响应报告基因基底水平的作用 | 第54-55页 |
| ·核内Dpr1 在体内的抑制作用 | 第55-56页 |
| ·核内 Dpr1 突变体不影响 Dvl2 的稳定性 | 第56页 |
| ·核内 Dpr1 突变体不影响 β-catenin 入核 | 第56-57页 |
| ·总结与讨论 | 第57-58页 |
| 第5章 Dpr1 在核内抑制Wnt 信号的作用机制1 | 第58-67页 |
| ·Dpr1 与LEF1 相互作用 | 第58-59页 |
| ·Dpr1 与LEF1 特异结合 | 第58-59页 |
| ·Dpr1 的C 端是与LEF1 结合的区域 | 第59页 |
| ·Dpr1 与 β-catenin 相互作用 | 第59-63页 |
| ·Dpr1 与β-catenin 特异结合 | 第59-61页 |
| ·Dpr1 的C 端是与β-catenin 结合的区域 | 第61页 |
| ·β-catenin 的266-408 对与Dpr1 的结合重要 | 第61-63页 |
| ·Dpr1 在核内干扰 β-catenin/LEF1 复合物的形成 | 第63-66页 |
| ·Dpr1 在核内打散β-catenin/LEF1 复合物 | 第63-64页 |
| ·RNAi 沉默Dpr1 增强β-catenin/LEF1 复合物 | 第64-65页 |
| ·核内Dpr1 干扰β-catenin 与DNA 结合 | 第65-66页 |
| ·总结与讨论 | 第66-67页 |
| 第6章 Dpr1 在核内抑制Wnt 信号的作用机制2 | 第67-74页 |
| ·Dpr1 与HDAC1 相互作用 | 第67-69页 |
| ·Dpr1 与HDAC1 相互作用 | 第67-68页 |
| ·Dpr1 的N 端和C 端分别与HDAC1 结合 | 第68-69页 |
| ·HDAC1 在核内增强Dpr1 对Wnt 信号的抑制 | 第69-70页 |
| ·HDAC1 增强核内Dpr1 对Wnt 信号的抑制 | 第69页 |
| ·TSA 部分挽救核内Dpr1 对Wnt 信号的抑制 | 第69-70页 |
| ·Dpr1 在核内增强HDAC1 和LEF1 的相互作用 | 第70-73页 |
| ·Dpr1 在核内增强HDAC1 和LEF1 的相互作用 | 第70-72页 |
| ·Dpr1 在核内增强HDAC1 与DNA 的结合 | 第72-73页 |
| ·总结与讨论 | 第73-74页 |
| 第7章 Dpr1 影响细胞周期的正常运转 | 第74-78页 |
| ·RNAi 沉默 Dpr1 稳定细胞系的建立 | 第74页 |
| ·Dpr1 抑制 Wnt 下游靶基因的表达 | 第74-76页 |
| ·Dpr1 表达沉默上调 Wnt 靶基因 mRNA | 第74-75页 |
| ·Dpr1 表达沉默上调Wnt 靶基因启动子表达 | 第75-76页 |
| ·Dpr1 抑制细胞周期 | 第76-77页 |
| ·Dpr1 表达沉默增强细胞突破G1 arrest 的能力 | 第76页 |
| ·核内Dpr1 表达抑制细胞突破G1 arrest 的能力 | 第76-77页 |
| ·总结与讨论 | 第77-78页 |
| 结论 | 第78-80页 |
| 参考文献 | 第80-92页 |
| 致谢 | 第92-93页 |
| 个人简历、在学期间发表的学术论文与研究成果 | 第93页 |
