摘要 | 第1-5页 |
Abstract | 第5-9页 |
第1章 绪论 | 第9-15页 |
·肺癌的基本概况 | 第9-10页 |
·UTRN 概述 | 第10-11页 |
·UTRN 基因结构特征 | 第10页 |
·UTRN 基因不同转录本和截短体概况 | 第10-11页 |
·细胞骨架蛋白与肿瘤的关系 | 第11-12页 |
·RNAi 技术简述 | 第12-13页 |
·课题前期工作基础 | 第13页 |
·研究目的和意义 | 第13-15页 |
第2章 材料和方法 | 第15-30页 |
·材料 | 第15-20页 |
·细胞系 | 第15页 |
·临床肺癌病例及细胞系RNA 样品 | 第15页 |
·质粒载体 | 第15页 |
·主要试剂 | 第15-16页 |
·缓冲液及其他溶液 | 第16-18页 |
·实验中的相关引物及siRNA 序列 | 第18页 |
·主要实验仪器 | 第18-20页 |
·主要软件 | 第20页 |
·方法 | 第20-29页 |
·UTRN 在肺癌中的表达分析 | 第20-22页 |
·siRNA 的设计 | 第22页 |
·shRNA-pSilencer? 4.1-CMV neo vectors 表达载体的构建 | 第22-25页 |
·shRNA 重组体的稳定转染 | 第25页 |
·单克隆细胞株的筛选 | 第25页 |
·各单克隆细胞株的全长UTRN 沉默效果检测 | 第25-29页 |
·本章小结 | 第29-30页 |
第3章 UTRN 在肺癌中的表达分析 | 第30-37页 |
·UTRN 在肺癌细胞系中的表达分析 | 第30-33页 |
·短转录本Up71 和Up140 在肺癌细胞系中的表达分析 | 第30-31页 |
·UTRN 全长转录本在肺癌中的表达分析 | 第31-33页 |
·UTRN 全长转录本在非小细胞肺癌临床病例中的表达分析 | 第33-34页 |
·讨论 | 第34-35页 |
·本章小结 | 第35-37页 |
第4章 利用RNAi 技术分析全长UTRN 的细胞生物学作用 | 第37-53页 |
·利用RNAi 技术沉默UTRN 表达 | 第37-43页 |
·siRNA 序列设计 | 第37-38页 |
·shRNA 重组体的构建和验证 | 第38-39页 |
·shRNA 重组体的稳定转染及单克隆的筛选 | 第39-40页 |
·各单克隆细胞株的UTRN 全长转录本沉默效果检测 | 第40-43页 |
·核全长UTRN 对NCI-H520 细胞增殖能力的影响 | 第43-47页 |
·核全长UTRN 对NCI-H520 细胞锚定依赖生长的影响 | 第43-44页 |
·核全长UTRN 对NCI-H520 细胞非锚定依赖生长的影响 | 第44-47页 |
·全长UTRN 对NIH3T3 的细胞生物学影响 | 第47-50页 |
·全长UTRN 对NIH3T3 细胞锚定生长的影响 | 第47页 |
·全长UTRN 对NIH3T3 细胞非锚定依赖生长的影响 | 第47-48页 |
·全长UTRN 表达沉默后黏着斑分子的变化 | 第48-50页 |
·讨论 | 第50-52页 |
·蛋白分子核转位与肿瘤 | 第50-51页 |
·黏着斑与肿瘤 | 第51-52页 |
·本章小结 | 第52-53页 |
结论 | 第53-54页 |
参考文献 | 第54-58页 |
附录 1 pSilencer 重组子测序结果图 | 第58-60页 |
附录 2 增殖曲线数据 | 第60-62页 |
攻读学位期间发表的学术论文 | 第62-64页 |
致谢 | 第64页 |