| 摘要 | 第1-10页 |
| ABSTRACT | 第10-13页 |
| 缩略词表 | 第13-15页 |
| 第一章 前言 | 第15-38页 |
| ·课题提出 | 第15-16页 |
| ·前人研究进展 | 第16-37页 |
| ·植物体细胞无性系变异研究进展 | 第16-22页 |
| ·植物体细胞无性系突变体产生的来源 | 第16-17页 |
| ·植物体细胞无性系变异的遗传学基础 | 第17-22页 |
| ·原生质体再生植株变异的研究进展 | 第22-27页 |
| ·原生质体再生植株变异的主要类型 | 第22-25页 |
| ·原生质体再生植株变异的原因及影响因素 | 第25-26页 |
| ·原生质体再生植株变异在育种上的应用 | 第26-27页 |
| ·柑橘细胞融合与变异研究 | 第27-29页 |
| ·柑橘原生质体融合方法 | 第27页 |
| ·柑橘原生质体融合方式 | 第27-28页 |
| ·柑橘体细胞融合后再生植株的遗传与变异研究 | 第28-29页 |
| ·体细胞融合后再生植株变异的研究手段 | 第29-31页 |
| ·细胞遗传学 | 第29-30页 |
| ·生物化学 | 第30页 |
| ·分子标记 | 第30页 |
| ·差异显示技术 | 第30页 |
| ·抑制消减杂交(SSH) | 第30-31页 |
| ·柑橘果实粒化研究进展 | 第31-37页 |
| ·与柑橘汁胞粒化有关的因素 | 第32-36页 |
| ·降低粒化的调控措施 | 第36-37页 |
| ·本研究的目的与内容 | 第37-38页 |
| 第二章 变异体的遗传背景分析 | 第38-57页 |
| ·材料 | 第38-39页 |
| ·试验方法 | 第39-46页 |
| ·倍性分析 | 第39页 |
| ·总DNA的提取、RAPD、SSR分析、CAPS、RFLP分析 | 第39-45页 |
| ·DNA提取及检测 | 第39-40页 |
| ·RAPD分析 | 第40页 |
| ·SSR分析 | 第40-42页 |
| ·cpSSR分析 | 第42页 |
| ·mtCAPS分析 | 第42-43页 |
| ·mtRFLP分析 | 第43-45页 |
| ·植株的形态学观察 | 第45-46页 |
| ·叶形指数的调查 | 第45页 |
| ·气孔观察与比较 | 第45页 |
| ·果实形态特征及生理指标测定 | 第45-46页 |
| ·结果与分析 | 第46-55页 |
| ·倍性分析 | 第46-47页 |
| ·核DNA来源 | 第47-48页 |
| ·胞质DNA来源 | 第48-50页 |
| ·突变体植株的形态学观察 | 第50-55页 |
| ·叶形指数的调查 | 第50-52页 |
| ·气孔观察与比较 | 第52页 |
| ·果实形态,可溶性固形物,可滴定酸等生理指标的测定 | 第52-55页 |
| ·讨论 | 第55-57页 |
| 第三章 粒化突变体果实发育过程中细胞壁代谢研究 | 第57-73页 |
| ·材料与方法 | 第58-61页 |
| ·材料 | 第58页 |
| ·细胞壁物质各组分的测定 | 第58-59页 |
| ·果胶物质的测定: | 第58-59页 |
| ·纤维素,半纤维素,木质素含量的测定 | 第59页 |
| ·果实细胞壁降解酶活性的测定 | 第59-60页 |
| ·多聚半乳糖醛酸酶活性测定 | 第59-60页 |
| ·果胶甲酯酶活性测定 | 第60页 |
| ·纤维素酶活性测定 | 第60页 |
| ·几种酶的基因表达实时定量分析 | 第60-61页 |
| ·结果与分析 | 第61-71页 |
| ·汁胞果胶、水溶性原果胶、总果胶含量变化 | 第61-62页 |
| ·果皮果胶、原果胶、总果胶含量变化 | 第62-63页 |
| ·汁胞纤维素,半纤维素,木质素含量变化 | 第63页 |
| ·汁胞含水量变化 | 第63-64页 |
| ·果皮纤维素,半纤维素,木质素含量变化 | 第64-65页 |
| ·汁胞多聚半乳糖醛酸(PG),果胶甲酯酶(PME),纤维素酶(Cx)活性变化 | 第65-66页 |
| ·果皮多聚半乳糖醛酸(PG),果胶甲酯酶(PME),纤维素酶(Cx)活性变化 | 第66-67页 |
| ·几种酶的基因表达实时定量分析 | 第67-71页 |
| ·汁胞中多聚半乳糖醛酸酶(PG),果胶甲酯酶(PME),纤维素酶(Cx)以及多聚半乳糖醛酸酶抑制蛋白(PGIP)基因的表达分析 | 第67-69页 |
| ·果皮中多聚半乳糖醛酸酶(PG),果胶甲酯酶(PME),纤维素酶(Cx)以及多聚半乳糖醛酸酶抑制蛋白(PGIP)基因的表达分析 | 第69-71页 |
| ·讨论 | 第71-73页 |
| 第四章:粒化突变体果实SSH文库构建与差异表达基因研究 | 第73-95页 |
| ·实验材料 | 第73页 |
| ·RNA提取和mRNA分离 | 第73-75页 |
| ·RNA提取的试剂 | 第73-74页 |
| ·RNA提取的步骤 | 第74页 |
| ·mRNA分离 | 第74-75页 |
| ·差减cDNA文库构建 | 第75-80页 |
| ·抑制差减杂交 | 第75-78页 |
| ·双链cDNA合成与RsaI酶切 | 第75-76页 |
| ·接头连接 | 第76页 |
| ·差减杂交 | 第76-77页 |
| ·两次PCR选择性扩增 | 第77-78页 |
| ·差减效率检测 | 第78页 |
| ·差减文库生成 | 第78-79页 |
| ·反向Northern筛选 | 第79页 |
| ·Real time RT-PCR分析 | 第79-80页 |
| ·生物信息学分析 | 第80页 |
| ·结果分析 | 第80-91页 |
| ·果实RNA提取方法的改进 | 第80-81页 |
| ·差减文库构建 | 第81-84页 |
| ·mRNA质量检测 | 第81页 |
| ·cDNA合成与酶切 | 第81-82页 |
| ·接头连接及连接效率检测 | 第82-83页 |
| ·文库插入片段的检测 | 第83页 |
| ·差减效率检测 | 第83-84页 |
| ·差减产物克隆 | 第84页 |
| ·反向Northern筛选 | 第84-85页 |
| ·RNA质量检测 | 第84-85页 |
| ·杂交筛选 | 第85页 |
| ·序列EST分析,功能分类 | 第85-91页 |
| ·序列EST分析 | 第85-89页 |
| ·粒化突变体果实性状形成过程中涉及的代谢途径 | 第89页 |
| ·一些候选基因的Real-time验证 | 第89-91页 |
| ·讨论 | 第91-95页 |
| 参考文献 | 第95-113页 |
| 附录Ⅰ Real-time PCR测定基因相对表达所用引物 | 第113-114页 |
| 附录Ⅱ Real-time PCR测定基因相对表达Protocol | 第114-115页 |
| 附录Ⅲ 粒化突变体与对照‘朋娜脐橙'果实发育过程中的差异克隆 | 第115-126页 |
| 附录Ⅳ 与粒化突变体果实性状形成相关的代谢途径 | 第126-132页 |
| 附录Ⅴ 博士期间发表的论文及投稿论文 | 第132-133页 |
| 致谢 | 第133页 |
