拟南芥氨基脱氧分支酸裂解酶的生物学功能研究
| 缩略词表 | 第1-9页 |
| 中文摘要 | 第9-11页 |
| Abstract | 第11-13页 |
| 第一章 绪论 | 第13-22页 |
| ·叶酸 | 第13-17页 |
| ·叶酸的合成 | 第14-16页 |
| ·植物中叶酸的提取 | 第16页 |
| ·叶酸的检测方法 | 第16-17页 |
| ·pABA分支合成途径的研究进展 | 第17-21页 |
| ·本文的研究目的和意义 | 第21-22页 |
| 第二章 材料与方法 | 第22-42页 |
| ·实验材料 | 第22-23页 |
| ·植物材料 | 第22页 |
| ·菌种 | 第22页 |
| ·载体 | 第22页 |
| ·工具酶 | 第22页 |
| ·分子量标准 | 第22页 |
| ·测序及引物合成 | 第22-23页 |
| ·试剂盒 | 第23页 |
| ·化学试剂 | 第23页 |
| ·实验方法 | 第23-42页 |
| ·拟南芥的栽培 | 第23页 |
| ·简易法提取拟南芥基因组DNA | 第23-24页 |
| ·CTAB法提取拟南芥基因组DNA | 第24页 |
| ·拟南芥RNA提取 | 第24-25页 |
| ·反转录合成单链cDNA | 第25页 |
| ·拟南芥突变体的鉴定 | 第25-27页 |
| ·黑暗诱导离体叶片凋亡 | 第27页 |
| ·氮限制处理 | 第27-28页 |
| ·叶酸含量测定 | 第28-31页 |
| ·基因AtADCL的RNAi载体构建 | 第31-34页 |
| ·基因AtADCL的超表达载体构建 | 第34-35页 |
| ·叶酸合成代谢相关基因的转录水平分析 | 第35-36页 |
| ·基因AtADCL的原核表达载体构建 | 第36-40页 |
| ·拟南芥转化(Floral Dipping法) | 第40页 |
| ·转基因植株的筛选和鉴定 | 第40-42页 |
| 第三章 实验结果 | 第42-58页 |
| ·基因AtADCL的时空表达模式分析 | 第42-43页 |
| ·拟南芥突变体Atadcl的鉴定 | 第43-46页 |
| ·DNA水平鉴定突变体 | 第43-44页 |
| ·转录水平的鉴定 | 第44-45页 |
| ·拟南芥突变体Atadcl的表型观察 | 第45-46页 |
| ·黑暗诱导离体叶片凋亡 | 第46页 |
| ·氮限制处理 | 第46-48页 |
| ·突变体Atadcl的叶酸含量分析 | 第48-49页 |
| ·微生物法 | 第48-49页 |
| ·高效液相色谱-质谱联用法 | 第49页 |
| ·基因AtADCL的RNAi转基因植株的获得 | 第49-50页 |
| ·RNAi载体的构建 | 第49-50页 |
| ·RNAi载体转化拟南芥及筛选RNAi阳性幼苗 | 第50页 |
| ·基因AtADCL的超表达转基因植株的获得 | 第50-51页 |
| ·超表达载体的构建 | 第50-51页 |
| ·超表达载体转化拟南芥及筛选超表达阳性幼苗 | 第51页 |
| ·转录水平分析 | 第51-52页 |
| ·叶酸含量分析 | 第52-53页 |
| ·叶酸合成代谢相关基因的转录水平分析 | 第53-54页 |
| ·基因AtADCL的原核表达载体的构建 | 第54-58页 |
| ·原核表达载体的构建 | 第54页 |
| ·含靶基因的质粒在大肠杆菌中的诱导表达及电泳检测 | 第54-56页 |
| ·AtADCL重组蛋白表达产物的质谱分析 | 第56-58页 |
| 第四章 讨论 | 第58-62页 |
| 第五章 结论 | 第62-64页 |
| 参考文献 | 第64-70页 |
| 致谢 | 第70-71页 |
| 在读期间研究成果 | 第71页 |
