| 摘要 | 第1-13页 |
| ABSTRACT | 第13-17页 |
| 缩略词表 | 第17-18页 |
| 第一章 文献综述 | 第18-34页 |
| 1 鹰嘴豆简介 | 第18页 |
| 2 植物NAC家族转录因子的研究概况 | 第18-31页 |
| ·NAC转录因子的起源与分类 | 第19-21页 |
| ·NAC转录因子的结构与功能机制 | 第21-22页 |
| ·NAC转录因子的生物学功能 | 第22-27页 |
| ·NAC转录因子参与多个植物生长发育过程 | 第22-26页 |
| ·NAC转录因子参与多种植物逆境防御反应 | 第26-27页 |
| ·NAC转录因子的表达调控 | 第27-30页 |
| ·NAC基因的转录调控 | 第27-28页 |
| ·NAC基因的转录后调控 | 第28-29页 |
| ·NAC基因的翻译后调控 | 第29-30页 |
| ·问题与展望 | 第30-31页 |
| 3 GPRP基因研究概况 | 第31页 |
| 4 研究目的与意义 | 第31-34页 |
| 第二章 CARNAC1～6基因的克隆与鉴定 | 第34-61页 |
| 1 前言 | 第34页 |
| 2 材料与方法 | 第34-47页 |
| ·材料的选择与种植 | 第34-35页 |
| ·核酸序列克隆与测序 | 第35-39页 |
| ·DNA的提取 | 第35-36页 |
| ·RNA的提取和纯化 | 第36-37页 |
| ·RACE | 第37-38页 |
| ·cDNA第一链的合成 | 第38页 |
| ·CARNAC1～6基因的cDNA和DNA全长扩增 | 第38-39页 |
| ·核酸片段的克隆和测序 | 第39页 |
| ·蛋白序列的比对、三维结构的预测以及进化树的构建 | 第39-40页 |
| ·DNA gel blot实验 | 第40-41页 |
| ·亚细胞定位实验 | 第41-44页 |
| ·植物表达载体的构建 | 第41-43页 |
| ·重组载体转化农杆菌 | 第43-44页 |
| ·农杆菌侵染与结果检测 | 第44页 |
| ·转录激活实验 | 第44-47页 |
| ·酵母表达载体的构建 | 第44-46页 |
| ·酵母转化子的获得与验证 | 第46-47页 |
| ·β-半乳糖苷酶(β-galactosidase)活性检测 | 第47页 |
| 3 结果与分析 | 第47-60页 |
| ·CARNAC1～6基因的克隆与核苷酸序列分析 | 第47-52页 |
| ·CARNAC1～6蛋白序列、结构及同源性分析 | 第52-56页 |
| ·CARNAC1～6基因的拷贝数 | 第56-57页 |
| ·CARNAC1～6蛋白的亚细胞定位 | 第57-58页 |
| ·CARNAC1～6蛋白转录激活功能域的鉴定 | 第58-60页 |
| 4 小结 | 第60-61页 |
| 第三章 CARNAC1～6基因的表达分析 | 第61-72页 |
| 1 前言 | 第61页 |
| 2 材料与方法 | 第61-63页 |
| ·材料种植与处理 | 第61页 |
| ·RNA的提取和纯化 | 第61-62页 |
| ·cDNA第一链的合成 | 第62页 |
| ·引物设计和PCR | 第62-63页 |
| 3 结果与分析 | 第63-68页 |
| ·CARNAC1～6基因的组织特异性和发育相关表达分析 | 第63-66页 |
| ·CARNAC1～6基因的组织特异性表达分析 | 第63-64页 |
| ·CARNAC1～6基因在叶片衰老过程中的表达分析 | 第64页 |
| ·CARNAC1～6基因在种子发育过程中的表达分析 | 第64-65页 |
| ·CARNAC1-6基因在种子发芽过程中的表达分析 | 第65-66页 |
| ·CARNAC1～6基因的逆境诱导表达分析 | 第66-68页 |
| ·CARNAC1～6基因的激素诱导表达分析 | 第68页 |
| 4 讨论 | 第68-72页 |
| 第四章 CarNAC2基因功能分析 | 第72-81页 |
| 1 前言 | 第72页 |
| 2 材料与方法 | 第72-75页 |
| ·实验材料 | 第72页 |
| ·植物表达载体的构建 | 第72-73页 |
| ·农杆菌介导拟南芥的遗传转化 | 第73-74页 |
| ·重组载体转化农杆菌 | 第73页 |
| ·农杆菌介导拟南芥的转化 | 第73-74页 |
| ·转基因拟南芥植株的阳性鉴定 | 第74页 |
| ·转基因植株的表形观察 | 第74-75页 |
| 3 结果与分析 | 第75-80页 |
| ·PBI121重组载体的检测 | 第75-77页 |
| ·农杆菌转化子的检测 | 第77页 |
| ·转CarNAC2基因拟南芥植株的阳性鉴定 | 第77-78页 |
| ·转CarNAC2基因拟南芥植株的表型 | 第78-80页 |
| 4 讨论 | 第80-81页 |
| 第五章 CarNAC3基因功能分析 | 第81-92页 |
| 1 前言 | 第81页 |
| 2 材料与方法 | 第81-83页 |
| ·实验材料 | 第81页 |
| ·植物表达载体的构建 | 第81-82页 |
| ·农杆菌介导拟南芥的遗传转化 | 第82页 |
| ·重组载体转化农杆菌 | 第82页 |
| ·农杆菌介导拟南芥的转化 | 第82页 |
| ·转基因拟南芥植株的阳性鉴定 | 第82-83页 |
| ·转基因植株的抗旱性鉴定 | 第83页 |
| ·转基因植株的ABA敏感性鉴定 | 第83页 |
| 3 结果与分析 | 第83-91页 |
| ·PBI121重组载体的检测 | 第83-86页 |
| ·农杆菌转化子的检测 | 第86页 |
| ·转CarNAC3基因拟南芥植株的阳性鉴定 | 第86-88页 |
| ·CarNAC3基因增强拟南芥的抗旱能力 | 第88-90页 |
| ·CarNAC3基因加强拟南芥对ABA的敏感性 | 第90-91页 |
| 4 讨论 | 第91-92页 |
| 第六章 CarNAC6基因功能分析 | 第92-103页 |
| 1 前言 | 第92页 |
| 2 材料与方法 | 第92-94页 |
| ·实验材料 | 第92页 |
| ·植物表达载体的构建 | 第92-93页 |
| ·农杆菌介导拟南芥的遗传转化 | 第93页 |
| ·重组载体转化农杆菌 | 第93页 |
| ·农杆菌介导拟南芥的转化 | 第93页 |
| ·转基因拟南芥植株的阳性鉴定 | 第93-94页 |
| ·转基因植株抗渗透胁迫能力的鉴定 | 第94页 |
| ·转基因植株的ABA敏感性鉴定 | 第94页 |
| ·转基因植株中胁迫相关基因的转录水平鉴定 | 第94页 |
| 3 结果与分析 | 第94-101页 |
| ·PBI121重组载体的检测 | 第94-97页 |
| ·农杆菌转化子的检测 | 第97页 |
| ·转CarNAC6基因拟南芥植株的阳性鉴定 | 第97-98页 |
| ·CarNAC6基因增强拟南芥的抗渗透胁迫能力 | 第98-99页 |
| ·CarNAC6基因增强拟南芥对ABA的敏感性 | 第99-100页 |
| ·CarNAC6基因促进胁迫相关基因的转录 | 第100-101页 |
| 4 讨论 | 第101-103页 |
| 第七章 CarPRP1基因克隆与功能分析 | 第103-119页 |
| 1 前言 | 第103页 |
| 2 材料与方法 | 第103-107页 |
| ·材料种植与处理(同第二、三、六章的2.1节) | 第103页 |
| ·核酸序列克隆与测序 | 第103-104页 |
| ·DNA的提取(见第二章2.2.1节) | 第103页 |
| ·RNA的提取和纯化(见第二章2.2.2节) | 第103页 |
| ·cDNA第一链的合成(见第二章2.2.4节) | 第103页 |
| ·CarPRP1基因的cDNA和DNA全长扩增 | 第103-104页 |
| ·核酸片段的克隆和测序(见第二章2.2.6节) | 第104页 |
| ·蛋白序列的比对及进化树的构建 | 第104页 |
| ·DNA gel blot实验(见第二章2.4节) | 第104页 |
| ·CarPRP1基因的表达分析实验 | 第104页 |
| ·植物表达载体的构建 | 第104-106页 |
| ·农杆菌介导拟南芥的遗传转化(见第四章2.3节) | 第106页 |
| ·转基因拟南芥植株的阳性鉴定 | 第106页 |
| ·转基因植株抗逆性鉴定 | 第106-107页 |
| ·转基因植株中胁迫相关基因的转录水平鉴定 | 第107页 |
| 3 结果与分析 | 第107-116页 |
| ·CarPRP1基因的克隆与核苷酸序列分析 | 第107-108页 |
| ·CarPRP1蛋白序列与进化树分析 | 第108-110页 |
| ·CarPRP1基因的拷贝数 | 第110-111页 |
| ·CarPRP1基因的转录水平分析 | 第111-113页 |
| ·转CarPRP1基因拟南芥的阳性鉴定 | 第113-115页 |
| ·转CarPRP1基因拟南芥的抗逆性评价 | 第115-116页 |
| ·CarPRP1基因过表达拟南芥植株中胁迫相关基因的表达 | 第116页 |
| 4 讨论 | 第116-119页 |
| 第八章 CarACT1基因的克隆与表达分析 | 第119-132页 |
| 1 前言 | 第119页 |
| 2 材料与方法 | 第119-123页 |
| ·材料的选择与种植 | 第119-120页 |
| ·核酸序列克隆与测序 | 第120-121页 |
| ·DNA的提取 | 第120页 |
| ·RNA的提取和纯化 | 第120页 |
| ·RACE | 第120页 |
| ·cDNA第一链的合成 | 第120页 |
| ·CarACT1基因的cDNA和DNA全长扩增 | 第120-121页 |
| ·核酸片段的克隆和测序 | 第121页 |
| ·蛋白序列的比对、三维结构的预测以及进化树的构建 | 第121-123页 |
| ·CarACT1基因的表达分析 | 第123页 |
| 3 结果与分析 | 第123-129页 |
| ·CarACT1基因的克隆与核苷酸序列分析 | 第123-124页 |
| ·CarACT1蛋白序列、结构及同源性分析 | 第124-128页 |
| ·CarACT1基因的表达分析 | 第128-129页 |
| 4 讨论 | 第129-132页 |
| 全文总结 | 第132-134页 |
| 本研究创新之处 | 第134-136页 |
| 参考文献 | 第136-148页 |
| 攻读博士期间发表的论文 | 第148-150页 |
| 致谢 | 第150页 |
