| 中文摘要 | 第1-11页 |
| 英文摘要 | 第11-13页 |
| 1 引言 | 第13-33页 |
| ·EHEC O157 研究进展 | 第13-16页 |
| ·EHEC O157 概述 | 第13-14页 |
| ·EHEC O157 病原学 | 第14页 |
| ·EHEC O157 传播途径 | 第14-15页 |
| ·EHEC O157 流行特征 | 第15页 |
| ·EHEC O157 临床症状 | 第15-16页 |
| ·EHEC O157 致病机理 | 第16-17页 |
| ·EHEC O157 主要毒力因子及其致病作用 | 第17-28页 |
| ·志贺毒素（Stx） | 第17-21页 |
| ·eae 基因及其编码的紧密素 | 第21-25页 |
| ·chuA 基因 | 第25-26页 |
| ·pO157 质粒及其编码的肠溶血素 | 第26页 |
| ·外膜蛋白（OMP） | 第26页 |
| ·脂多糖（LPS） | 第26页 |
| ·其他毒力相关因子 | 第26-28页 |
| ·EHEC O157 疫苗研究进展 | 第28-31页 |
| ·Stx 类毒素疫苗 | 第28页 |
| ·亚单位疫苗 | 第28-29页 |
| ·结合疫苗 | 第29页 |
| ·减毒活菌疫苗 | 第29-30页 |
| ·核酸疫苗 | 第30页 |
| ·单克隆抗体 | 第30-31页 |
| ·细菌ghost 疫苗 | 第31页 |
| ·转基因植物疫苗 | 第31页 |
| ·研究的目的和意义 | 第31-33页 |
| 2 材料与方法 | 第33-51页 |
| ·材料 | 第33-36页 |
| ·实验动物 | 第33页 |
| ·菌种与载体 | 第33页 |
| ·工具酶和试剂盒 | 第33页 |
| ·其他相关试剂 | 第33页 |
| ·标准参照物 | 第33页 |
| ·主要试剂的配制 | 第33-36页 |
| ·仪器设备 | 第36页 |
| ·实验方法 | 第36-51页 |
| ·目的基因原核表达载体构建 | 第36-40页 |
| ·重组质粒的鉴定 | 第40-41页 |
| ·重组质粒在大肠杆菌中的诱导表达 | 第41-44页 |
| ·单克隆抗体的制备 | 第44-47页 |
| ·单克隆抗体的大量制备 | 第47-48页 |
| ·单克隆抗体的部分特性鉴定 | 第48-51页 |
| 3 结果 | 第51-64页 |
| ·PCR 扩增 Stx1B、Stx2B 及 eae 结果 | 第51页 |
| ·重组质粒的鉴定 | 第51-55页 |
| ·重组质粒的PCR 和酶切鉴定 | 第51-52页 |
| ·重组质粒的序列测定 | 第52-55页 |
| ·重组蛋白的表达与鉴定 | 第55-56页 |
| ·重组融合蛋白的诱导表达 | 第55-56页 |
| ·纯化后融合蛋白浓度 | 第56页 |
| ·单克隆抗体的制备 | 第56-57页 |
| ·间接ELISA 方法的建立 | 第56-57页 |
| ·细胞融合 | 第57页 |
| ·阳性杂交瘤细胞株的建立 | 第57页 |
| ·单克隆抗体特性的鉴定 | 第57-64页 |
| ·杂交瘤细胞株的一般特性 | 第57-58页 |
| ·单克隆抗体腹水的纯化 | 第58页 |
| ·单克隆抗体免疫印迹检测结果 | 第58-59页 |
| ·单克隆抗体染色体计数结果 | 第59-60页 |
| ·单克隆抗体亲和常数测定结果 | 第60-62页 |
| ·单克隆抗体识别抗原表位的初步分析结果 | 第62页 |
| ·单克隆抗体稳定性检测结果 | 第62页 |
| ·单克隆抗体特异性分析结果 | 第62-64页 |
| 4 讨论 | 第64-72页 |
| ·重组质粒的构建及诱导表达 | 第64-67页 |
| ·Stx 及eae 抗原的选择 | 第64-65页 |
| ·原核表达载体的选择 | 第65页 |
| ·宿主表达菌的选择 | 第65-66页 |
| ·表达条件的常规优化 | 第66-67页 |
| ·单克隆抗体的制备 | 第67-70页 |
| ·抗原制备 | 第67页 |
| ·实验动物的选择 | 第67-68页 |
| ·细胞融合与筛选 | 第68-69页 |
| ·杂交瘤细胞的克隆 | 第69页 |
| ·污染的预防和排除 | 第69-70页 |
| ·单克隆抗体的生物学特性 | 第70-72页 |
| ·单克隆抗体效价 | 第70页 |
| ·细胞的冻存与复苏 | 第70页 |
| ·腹水的纯化 | 第70-71页 |
| ·单克隆抗体特异性分析 | 第71页 |
| ·亲和常数的测定 | 第71页 |
| ·抗原表位初步分析 | 第71-72页 |
| 5 结论 | 第72-73页 |
| 致谢 | 第73-74页 |
| 参考文献 | 第74-79页 |
| 攻读硕士学位期间发表的学术论文 | 第79页 |