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三氧化二砷对Bcr-Abl耐药突变细胞株抑制作用及其作用机制

中文摘要第1-12页
英文摘要第12-14页
1 引言第14-32页
   ·CML传统治疗第16-17页
   ·CML的治疗现状第17-30页
     ·酪氨酸激酶抑制剂的靶向治疗第17-24页
     ·异基因造血干细胞移植第24-25页
     ·其他能克服Imatinib耐药的靶向治疗第25-26页
     ·三氧化二砷第26-30页
   ·前景展望第30页
   ·研究的目的与意义第30-32页
2 材料第32-34页
   ·细胞株第32页
   ·培养基及生化试剂第32页
   ·主要仪器和设备第32-33页
   ·抗体第33页
   ·实时荧光定量PCR引物及试剂盒第33-34页
3 方法第34-43页
   ·细胞培养第34-35页
     ·细胞复苏第34页
     ·细胞传代第34页
     ·细胞冻存第34-35页
   ·台盼蓝拒染法测定细胞存活率第35-37页
     ·台盼蓝拒染法检测细胞对IM的敏感性第35-36页
     ·台盼蓝拒染法检测细胞对ATO的敏感性第36-37页
   ·Real time PCR法检测ATO作用于细胞后细胞内Bcr-Abl mRNA水平的变化第37-39页
     ·K562、K562R、KBM5、KBM5R总RNA的提取第37页
     ·K562、K562R、KBM5、KBM5R mRNA的制备第37-38页
     ·K562、K562R、KBM5、KBM5R cDNA的合成第38页
     ·实时荧光定量PCR分析ATO作用细胞后Bcr-Abl mRNA水平的变化第38-39页
   ·Western blot法检测ATO作用于细胞后Bcr-Abl蛋白水平的变化第39-41页
     ·K562、K562R、KBM5、KBM5R细胞加药处理及蛋白制备第39-40页
     ·用Brandford法测定K562、K562R、KBM5、KBM5R细胞蛋白含量第40页
     ·Western blot法检测ATO作用于K562、K562R、KBM5、KBM5R细胞后Bcr-Abl蛋白的水平第40-41页
   ·DTNB比色法测定细胞内谷胱甘肽含量第41-42页
   ·台盼蓝拒染法检测BSO在ATO抑制细胞生长中的作用第42页
   ·Annexin Ⅴ标记检测细胞凋亡第42页
   ·统计学处理第42-43页
4 结果第43-63页
   ·台盼蓝拒染法检测各细胞株对IM的敏感性第43-52页
     ·台盼蓝拒染法检测K562、K562R株对IM的敏感性第43-44页
     ·台盼蓝拒染法检测KBM5、KBM5R株对IM的敏感性第44-45页
     ·台盼蓝拒染法检测32Dp210等细胞株对IM的敏感性第45-48页
     ·台盼蓝拒染法检测ATO对K562、K562R细胞株的生长抑制作用第48-49页
     ·台盼蓝拒染法检测ATO对KBM5、KBM5R细胞株的生长抑制作用第49-50页
     ·台盼蓝拒染法检测ATO对32Dp210等细胞株的生长抑制作用第50-52页
   ·ATO作用于K562、K562R、KBM5、KBM5R细胞株后细胞内Bcr-Abl mRNA水平的变化第52-54页
     ·cDNA的合成第52页
     ·检测ATO对K562、K562R细胞Bcr-Abl mRNA水平的影响第52-53页
     ·检测ATO对KBM5、KBM5R细胞Bcr-Abl mRNA水平的影响第53-54页
   ·Western blot法检测ATO作用于K562、K562R、KBM5、KBM5R细胞后Bcr-Abl蛋白水平的变化第54-57页
     ·Brandford法测蛋白浓度第54-55页
     ·Western blot法检测ATO作用于K562、K562R细胞后Bcr-Abl蛋白水平的变化第55-56页
     ·Western blot法检测ATO作用于KBM5、KBM5R细胞后Bcr-Abl蛋白水平的变化第56-57页
   ·Bcr-Abl野生型和耐药型细胞内GSH含量第57-58页
   ·检测BSO对ATO作用效果的影响第58-63页
     ·台盼蓝拒染法检测BSO对ATO作用效果的影响第58-61页
     ·Annexin Ⅴ标记检测细胞凋亡第61-63页
5 讨论第63-69页
   ·CML遗传学特点第63页
   ·伊马替尼耐药第63-65页
   ·三氧化二砷诱导细胞凋亡第65-66页
   ·三氧化二砷诱导细胞凋亡机理第66-69页
6 结论第69-70页
致谢第70-71页
参考文献第71-79页
附录A第79-80页
附录B第80-83页
攻读硕士学位期间发表的学术论文第83页

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