| 摘要 | 第1-5页 |
| Abstract | 第5-8页 |
| 符号说明 | 第8-10页 |
| 目录 | 第10-14页 |
| 第一章 文献综述 | 第14-31页 |
| ·塑料行业的发展趋势 | 第14-16页 |
| ·PHB性质和应用 | 第16-18页 |
| ·PHB性质 | 第16-17页 |
| ·PHB的应用 | 第17-18页 |
| ·PHB的生产 | 第18-24页 |
| ·PHB的一般发酵生产 | 第18-20页 |
| ·PHB的基因工程菌发酵生产 | 第20-22页 |
| ·PHB的植物生产 | 第22-24页 |
| ·PHB的自养微生物生产 | 第24页 |
| ·PHB提取方法 | 第24-26页 |
| ·有机溶剂提取 | 第24页 |
| ·次氯酸钠提取 | 第24页 |
| ·氯仿-次氯酸钠提取 | 第24-25页 |
| ·酶法提取 | 第25页 |
| ·表面活性剂-络合剂水溶液提取法 | 第25页 |
| ·几种提取方法的比较 | 第25-26页 |
| ·PHB的检测方法 | 第26-27页 |
| ·染色法 | 第26页 |
| ·重量测定法 | 第26页 |
| ·气相色谱检测法 | 第26-27页 |
| ·分光光度法 | 第27页 |
| ·本论文的研究目的和研究内容 | 第27-31页 |
| ·本论文的研究目的 | 第27-29页 |
| ·论文资助情况 | 第29-30页 |
| ·主要研究内容 | 第30-31页 |
| 第二章 隐藏嗜酸菌DX1-1菌株及其胞内聚合物的分离和表征 | 第31-42页 |
| ·引言 | 第31-32页 |
| ·材料与方法 | 第32-34页 |
| ·AMD水样来源 | 第32页 |
| ·培养基 | 第32页 |
| ·菌株的分离纯化 | 第32页 |
| ·菌株形态特征及生理生化检测 | 第32-33页 |
| ·16S rDNA序列分析 | 第33页 |
| ·脂肪酸组份的测定和DNA G+C mol%测定 | 第33-34页 |
| ·胞内聚合物的提取及鉴定 | 第34页 |
| ·结果与讨论 | 第34-41页 |
| ·菌株形态特征 | 第34-35页 |
| ·最适生长温度和最适pH | 第35-36页 |
| ·底物利用情况 | 第36-38页 |
| ·菌种16S rRNA序列分析 | 第38-39页 |
| ·菌种脂肪酸组份分析和DNA G+C%分析 | 第39页 |
| ·胞内聚合物的鉴定 | 第39-41页 |
| ·本章小结 | 第41-42页 |
| 第三章 PHB提取和性质鉴定 | 第42-49页 |
| ·引言 | 第42页 |
| ·实验材料和方法 | 第42-44页 |
| ·试剂和仪器 | 第42页 |
| ·菌种 | 第42-43页 |
| ·培养基 | 第43页 |
| ·胞内PHB提取分离方法 | 第43页 |
| ·PHB的性质检测 | 第43-44页 |
| ·结果和讨论 | 第44-48页 |
| ·提取分离方法结果与讨论 | 第44-45页 |
| ·PHB性质检测 | 第45-48页 |
| ·本章小结 | 第48-49页 |
| 第四章 隐藏嗜酸菌DX1-1菌株产PHB培养条件的优化 | 第49-57页 |
| ·引言 | 第49页 |
| ·材料方法 | 第49-51页 |
| ·菌种 | 第49页 |
| ·主要仪器 | 第49页 |
| ·培养基 | 第49-50页 |
| ·PHB标准曲线 | 第50页 |
| ·PHB含量的测定 | 第50页 |
| ·确定最佳碳氮源组合 | 第50-51页 |
| ·正交试验 | 第51页 |
| ·最佳培养条件下细胞的生长情况与PHB的积累之间的关系 | 第51页 |
| ·结果和讨论 | 第51-56页 |
| ·PHB标准曲线 | 第51-52页 |
| ·最佳碳氮源组合试验 | 第52-53页 |
| ·正交试验结果 | 第53-55页 |
| ·最佳培养条件下细胞的生长情况与PHB的积累之间的关系 | 第55-56页 |
| ·本章小结 | 第56-57页 |
| 第五章 Acidiphilium cryptum DX1-1积累PHB的诱变改良 | 第57-65页 |
| ·引言 | 第57-58页 |
| ·材料和方法 | 第58-60页 |
| ·菌种 | 第58页 |
| ·仪器 | 第58页 |
| ·培养基 | 第58页 |
| ·出发菌株生长曲线和PHB积累曲线测定 | 第58页 |
| ·菌悬液制备 | 第58页 |
| ·紫外线照射 | 第58-59页 |
| ·放射性元素~(60)Co辐射 | 第59页 |
| ·致死率测定 | 第59页 |
| ·诱变菌株初筛 | 第59页 |
| ·诱变菌株复筛 | 第59页 |
| ·诱变后菌株积累PHB营养条件检测 | 第59-60页 |
| ·稳定性检测 | 第60页 |
| ·结果与讨论 | 第60-64页 |
| ·出发菌DX1-1生长和PHB积累 | 第60页 |
| ·紫外线诱变 | 第60-61页 |
| ·诱变后菌株积累PHB营养条件 | 第61-62页 |
| ·诱变后菌株的稳定性检测 | 第62-63页 |
| ·~(60)Co诱变作用 | 第63-64页 |
| ·本章小结 | 第64-65页 |
| 第六章 不同起始碳氮比条件下Acidiphilium cryptum DX1-1蛋白质表达差异 | 第65-96页 |
| ·引言 | 第65-66页 |
| ·材料和方法 | 第66-80页 |
| ·主要试剂 | 第66-67页 |
| ·主要仪器设备和软件 | 第67页 |
| ·主要溶液成及配制 | 第67-68页 |
| ·细胞培养和收集 | 第68页 |
| ·细胞总蛋白质抽提 | 第68-69页 |
| ·胞内蛋白质提取 | 第69页 |
| ·蛋白质浓度测定 | 第69-70页 |
| ·固相pH梯度—SDS双向凝胶电泳第一向 | 第70-71页 |
| ·SDS聚丙稀酰胺凝胶垂直电泳 | 第71-72页 |
| ·胶体考马斯亮兰染色 | 第72页 |
| ·凝胶图像分析 | 第72页 |
| ·制备质谱样品 | 第72-73页 |
| ·质谱分析 | 第73页 |
| ·肽质量指纹(PMF)法鉴定蛋白质的数据库查询 | 第73-74页 |
| ·菌株与培养基 | 第74页 |
| ·总RNA的提取及纯化 | 第74-75页 |
| ·反转录cDNA合成 | 第75-76页 |
| ·PCR引物设计及标准曲线的制作 | 第76-80页 |
| ·结果和讨论 | 第80-94页 |
| ·不同起始C/N对A.cryptum DX1-1积累PHB的影响 | 第80-81页 |
| ·全蛋白质表达差异结果 | 第81-83页 |
| ·胞内蛋白质差异表达图谱 | 第83-88页 |
| ·总RNA质量分析 | 第88-90页 |
| ·cDNA质量分析 | 第90-91页 |
| ·阳性质粒的PCR鉴定和序列分析 | 第91-92页 |
| ·Real-time PCR结果分析 | 第92-94页 |
| ·本章小结 | 第94-96页 |
| 第七章 基于Real time-PCR探索Acidiphilium cryptum DX1-1的PHB代谢途径 | 第96-107页 |
| ·引言 | 第96-97页 |
| ·材料与方法 | 第97-100页 |
| ·材料和试验方法 | 第97-99页 |
| ·启动子分析 | 第99页 |
| ·PHB积累相关基因启动子区预测 | 第99页 |
| ·Weblogo启动子模体预测 | 第99-100页 |
| ·结果与讨论 | 第100-106页 |
| ·不同起始C/N对A.cryptum DX1-1积累PHB的影响 | 第100页 |
| ·总RNA质量分析 | 第100页 |
| ·cDNA质量分析 | 第100页 |
| ·阳性质粒的PCR鉴定和序列分析 | 第100-101页 |
| ·Real-time PCR结果分析 | 第101-104页 |
| ·PHB积累相关基因启动子区特征分析 | 第104-105页 |
| ·启动子模体特征分析 | 第105-106页 |
| ·本章小结 | 第106-107页 |
| 第八章 Acidiphilium cryptum DX1-1以硫为能源积累PHB研究 | 第107-119页 |
| ·引言 | 第107页 |
| ·材料方法 | 第107-110页 |
| ·菌种和检测方法 | 第107页 |
| ·发酵实验 | 第107-108页 |
| ·以硫为能源积累PHB的相关基因研究 | 第108-110页 |
| ·结果与分析 | 第110-118页 |
| ·DX1-1以硫为能源积累PHB | 第110-112页 |
| ·DX1-1以硫为能源积累PHB最佳葡萄糖加入量 | 第112页 |
| ·DX1-1以硫为能源积累PHB最佳微量元素 | 第112-113页 |
| ·总RNA质量分析 | 第113-114页 |
| ·阳性质粒的PCR鉴定和序列分析 | 第114-116页 |
| ·Real-time PCR结果分析 | 第116-118页 |
| ·本章小结 | 第118-119页 |
| 第九章 全文结论 | 第119-121页 |
| 参考文献 | 第121-130页 |
| 致谢 | 第130-131页 |
| 攻读学位期间主要的研究成果 | 第131-132页 |
