| 摘要 | 第4-5页 |
| ABSTRACT | 第5页 |
| 1 前言 | 第8-18页 |
| 1.1 蛋白酶的定义和应用 | 第8-10页 |
| 1.2 蛋白酶抑制剂的概述 | 第10-12页 |
| 1.2.1 蛋白酶抑制剂的定义、分布和分类 | 第10-11页 |
| 1.2.2 蛋白酶抑制剂的应用 | 第11-12页 |
| 1.3 大豆及胰酶抑制剂的简介 | 第12-16页 |
| 1.3.1 大豆的简介及胰酶抑制剂分类 | 第12-14页 |
| 1.3.2 胰酶抑制剂体内、体外的抑制机理 | 第14-15页 |
| 1.3.3 胰酶抑制剂的制备方法 | 第15-16页 |
| 1.3.4 胰酶抑制剂的应用 | 第16页 |
| 1.4 本课题的立题依据及研究内容 | 第16-18页 |
| 2 材料与方法 | 第18-31页 |
| 2.1 实验材料 | 第18-22页 |
| 2.1.1 菌种与质粒 | 第18页 |
| 2.1.2 所用酶制剂的来源 | 第18页 |
| 2.1.3 实验试剂 | 第18-19页 |
| 2.1.4 仪器设备 | 第19-20页 |
| 2.1.5 实验相关溶液 | 第20-21页 |
| 2.1.6 实验相关培养基 | 第21-22页 |
| 2.2 实验方法 | 第22-31页 |
| 2.2.1 重组质粒pPIC-S2TI的构建 | 第22-23页 |
| 2.2.2 大肠杆菌JM109感受态细胞的制备 | 第23-24页 |
| 2.2.3 重组质粒pPIC-S2TI的验证 | 第24页 |
| 2.2.4 重组表达载体pPIC-S2TI的线性化 | 第24页 |
| 2.2.5 毕赤酵母GS115感受态细胞的制备 | 第24-25页 |
| 2.2.6 重组毕赤酵母GS115-S2TI的构建 | 第25页 |
| 2.2.7 胰酶抑制剂S2TI的制备及SDS-PAGE检验 | 第25-27页 |
| 2.2.8 胰酶抑制剂S2TI功能的验证 | 第27页 |
| 2.2.9 胰酶抑制剂S2TI生化特性的测定 | 第27-29页 |
| 2.2.10 胰酶抑制剂S2TI抑制专一性 | 第29页 |
| 2.2.11 胰酶抑制剂S2TI抑菌活性 | 第29-30页 |
| 2.2.12 生物信息学分析 | 第30-31页 |
| 3 结果与讨论 | 第31-56页 |
| 3.1 大豆基因组中胰酶抑制剂编码基因的筛查与生物信息学分析 | 第31-34页 |
| 3.2 s2ti克隆与重组表达质粒的构建 | 第34-36页 |
| 3.3 重组酵母GS115-S2TI的构建 | 第36-38页 |
| 3.4 胰酶抑制剂S2TI的发酵制备,分离纯化及SDS-PAGE鉴定 | 第38-41页 |
| 3.5 S2TI抑制活性的测定 | 第41-42页 |
| 3.6 S2TI部分性质的测定 | 第42-56页 |
| 3.6.1 S2TI的抑制动力学特征 | 第42-45页 |
| 3.6.2 S2TI的热稳定性 | 第45-46页 |
| 3.6.3 S2TI的pH稳定性 | 第46-48页 |
| 3.6.4 金属离子对S2TI活性的影响 | 第48-49页 |
| 3.6.5 巯基还原剂对S2TI活性的影响 | 第49页 |
| 3.6.6 超声波对S2TI活性的影响 | 第49-50页 |
| 3.6.7 S2TI的紫外吸收光谱 | 第50-51页 |
| 3.6.8 S2TI的抑制专一性 | 第51-53页 |
| 3.6.9 S2TI抑菌活性 | 第53-56页 |
| 4 结论 | 第56-57页 |
| 4.1 全文总结 | 第56页 |
| 4.2 论文创新点 | 第56页 |
| 4.3 论文不足之处 | 第56-57页 |
| 5 展望 | 第57-58页 |
| 6 参考文献 | 第58-65页 |
| 7 攻读硕士学位期间发表论文情况 | 第65-66页 |
| 8 致谢 | 第66页 |
