摘要 | 第5-8页 |
abstract | 第8-11页 |
英文缩略词中英文注释表 | 第15-16页 |
第一章 绪论 | 第16-27页 |
1.1 间充质干细胞 | 第16-17页 |
1.1.1 间充质干细胞概述 | 第16页 |
1.1.2 MSC对组织器官损伤的修复作用 | 第16-17页 |
1.2 外泌体(exosome) | 第17-19页 |
1.2.1 概述 | 第17页 |
1.2.2 Exosome的生物学特性 | 第17-18页 |
1.2.3 Exosome的分离与鉴定 | 第18-19页 |
1.3 MSC来源的exosome对皮肤组织损伤的修复作用 | 第19-24页 |
1.3.1 MSC-exosome对受损皮肤组织的免疫调节机制 | 第19-20页 |
1.3.2 MSC-exosome促进受损组织中的血管生成 | 第20-22页 |
1.3.3 MSC-exosome促进皮肤细胞增殖和再上皮化 | 第22-23页 |
1.3.4 MSC-exosome对皮肤瘢痕形成的影响 | 第23-24页 |
1.4 紫外线与皮肤损伤 | 第24-25页 |
1.5 SIRT1与皮肤老化 | 第25-26页 |
1.6 提出科学问题 | 第26-27页 |
第二章 研究目的、方法、实验设计方案和意义 | 第27-31页 |
2.1 研究目的 | 第27页 |
2.2 研究方法 | 第27-28页 |
2.3 实验设计方案 | 第28-29页 |
2.4 研究意义 | 第29-31页 |
第三章 hucMSC-ex预处理缓解紫外线诱导的急性皮肤损伤 | 第31-44页 |
3.1 材料与仪器 | 第31-33页 |
3.1.1 实验所用细胞 | 第31页 |
3.1.2 实验所用动物 | 第31页 |
3.1.3 主要材料和试剂 | 第31-32页 |
3.1.4 实验所用仪器 | 第32-33页 |
3.2 实验方法 | 第33-38页 |
3.2.1 SD大鼠急性皮肤光损伤模型的建立 | 第33页 |
3.2.2 人脐带间质干细胞(hucMSC)分离培养 | 第33-34页 |
3.2.3 hucMSC来源exosome的分离 | 第34-35页 |
3.2.4 hucMSC-ex的鉴定 | 第35页 |
3.2.5 组织总蛋白的提取 | 第35页 |
3.2.6 Westernblot | 第35-36页 |
3.2.7 石蜡制片制备和HE病理切片染色 | 第36页 |
3.2.8 免疫组织化学染色 | 第36-37页 |
3.2.9 免疫组织荧光染色 | 第37-38页 |
3.3 研究结果 | 第38-42页 |
3.3.1 hucMSC的形态特征及鉴定 | 第38页 |
3.3.2 hucMSC-ex的分离与鉴定 | 第38-39页 |
3.3.3 hucMSC-ex缓解紫外线所致的皮肤损伤 | 第39-41页 |
3.3.4 hucMSC-ex减轻紫外线导致的皮肤DNA损伤 | 第41页 |
3.3.5 hucMSC-ex减轻紫外线导致的皮肤炎症反应并促进皮肤细胞增殖 | 第41-42页 |
3.4 讨论 | 第42-44页 |
第四章 hucMSC-ex上调SIRT1减轻氧化应激对HaCaT细胞的损伤作用 | 第44-59页 |
4.1 材料与仪器 | 第44-45页 |
4.1.1 主要材料 | 第44-45页 |
4.1.1.1 抗体 | 第44-45页 |
4.1.1.2 其他材料和试剂 | 第45页 |
4.1.2 主要仪器 | 第45页 |
4.2 实验方法 | 第45-49页 |
4.2.1 细胞的冻存与复苏 | 第45页 |
4.2.2 细胞免疫荧光染色 | 第45-46页 |
4.2.3 细胞总蛋白的提取 | 第46页 |
4.2.4 Westernblot | 第46页 |
4.2.5 共聚焦显微镜检测HaCaT细胞摄取PKH-67标记的hucMSC-ex | 第46-47页 |
4.2.6 实时荧光定量PCR | 第47-49页 |
4.2.7 数据处理与统计 | 第49页 |
4.3 研究结果 | 第49-57页 |
4.3.1 hucMSC-ex显著抑制紫外线辐射产生ROS产量 | 第49-50页 |
4.3.2 建立H2O2对HaCaT的氧化应激损伤模型 | 第50-51页 |
4.3.3 hucMSC-ex缓解氧化应激诱导的炎症反应水平和细胞凋亡 | 第51-52页 |
4.3.4 hucMSC-ex促进氧化应激的条件下HaCaT细胞中SIRT1表达 | 第52-54页 |
4.3.5 hucMSC-ex通过促进SIRT1表达诱导自噬的活化 | 第54页 |
4.3.6 过表达14-3-3ζ蛋白的hucMSC-ex促进靶细胞SIRT1表达 | 第54-55页 |
4.3.7 Ad-14-3-3ζ-ex促进SIRT1上调,减轻氧化应激对HaCaT细胞的损伤 | 第55-56页 |
4.3.8 过表达14-3-3ζ载体的腺病毒转染HaCaT中后SIRT1的表达增高 | 第56-57页 |
4.4 讨论 | 第57-59页 |
第五章 结论与展望 | 第59-60页 |
5.1 主要研究结论 | 第59页 |
5.2 展望 | 第59-60页 |
参考文献 | 第60-69页 |
致谢 | 第69-71页 |
攻读硕士学位期间发表论文、学术活动的参与及获奖情况 | 第71-72页 |
一、发表论文 | 第71页 |
二、参加会议 | 第71-72页 |
三、专利 | 第72页 |
四、获奖情况 | 第72页 |