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人脐带间质干细胞来源外泌体在急性皮肤光损伤中的作用及机制

摘要第5-8页
abstract第8-11页
英文缩略词中英文注释表第15-16页
第一章 绪论第16-27页
    1.1 间充质干细胞第16-17页
        1.1.1 间充质干细胞概述第16页
        1.1.2 MSC对组织器官损伤的修复作用第16-17页
    1.2 外泌体(exosome)第17-19页
        1.2.1 概述第17页
        1.2.2 Exosome的生物学特性第17-18页
        1.2.3 Exosome的分离与鉴定第18-19页
    1.3 MSC来源的exosome对皮肤组织损伤的修复作用第19-24页
        1.3.1 MSC-exosome对受损皮肤组织的免疫调节机制第19-20页
        1.3.2 MSC-exosome促进受损组织中的血管生成第20-22页
        1.3.3 MSC-exosome促进皮肤细胞增殖和再上皮化第22-23页
        1.3.4 MSC-exosome对皮肤瘢痕形成的影响第23-24页
    1.4 紫外线与皮肤损伤第24-25页
    1.5 SIRT1与皮肤老化第25-26页
    1.6 提出科学问题第26-27页
第二章 研究目的、方法、实验设计方案和意义第27-31页
    2.1 研究目的第27页
    2.2 研究方法第27-28页
    2.3 实验设计方案第28-29页
    2.4 研究意义第29-31页
第三章 hucMSC-ex预处理缓解紫外线诱导的急性皮肤损伤第31-44页
    3.1 材料与仪器第31-33页
        3.1.1 实验所用细胞第31页
        3.1.2 实验所用动物第31页
        3.1.3 主要材料和试剂第31-32页
        3.1.4 实验所用仪器第32-33页
    3.2 实验方法第33-38页
        3.2.1 SD大鼠急性皮肤光损伤模型的建立第33页
        3.2.2 人脐带间质干细胞(hucMSC)分离培养第33-34页
        3.2.3 hucMSC来源exosome的分离第34-35页
        3.2.4 hucMSC-ex的鉴定第35页
        3.2.5 组织总蛋白的提取第35页
        3.2.6 Westernblot第35-36页
        3.2.7 石蜡制片制备和HE病理切片染色第36页
        3.2.8 免疫组织化学染色第36-37页
        3.2.9 免疫组织荧光染色第37-38页
    3.3 研究结果第38-42页
        3.3.1 hucMSC的形态特征及鉴定第38页
        3.3.2 hucMSC-ex的分离与鉴定第38-39页
        3.3.3 hucMSC-ex缓解紫外线所致的皮肤损伤第39-41页
        3.3.4 hucMSC-ex减轻紫外线导致的皮肤DNA损伤第41页
        3.3.5 hucMSC-ex减轻紫外线导致的皮肤炎症反应并促进皮肤细胞增殖第41-42页
    3.4 讨论第42-44页
第四章 hucMSC-ex上调SIRT1减轻氧化应激对HaCaT细胞的损伤作用第44-59页
    4.1 材料与仪器第44-45页
        4.1.1 主要材料第44-45页
            4.1.1.1 抗体第44-45页
            4.1.1.2 其他材料和试剂第45页
        4.1.2 主要仪器第45页
    4.2 实验方法第45-49页
        4.2.1 细胞的冻存与复苏第45页
        4.2.2 细胞免疫荧光染色第45-46页
        4.2.3 细胞总蛋白的提取第46页
        4.2.4 Westernblot第46页
        4.2.5 共聚焦显微镜检测HaCaT细胞摄取PKH-67标记的hucMSC-ex第46-47页
        4.2.6 实时荧光定量PCR第47-49页
        4.2.7 数据处理与统计第49页
    4.3 研究结果第49-57页
        4.3.1 hucMSC-ex显著抑制紫外线辐射产生ROS产量第49-50页
        4.3.2 建立H2O2对HaCaT的氧化应激损伤模型第50-51页
        4.3.3 hucMSC-ex缓解氧化应激诱导的炎症反应水平和细胞凋亡第51-52页
        4.3.4 hucMSC-ex促进氧化应激的条件下HaCaT细胞中SIRT1表达第52-54页
        4.3.5 hucMSC-ex通过促进SIRT1表达诱导自噬的活化第54页
        4.3.6 过表达14-3-3ζ蛋白的hucMSC-ex促进靶细胞SIRT1表达第54-55页
        4.3.7 Ad-14-3-3ζ-ex促进SIRT1上调,减轻氧化应激对HaCaT细胞的损伤第55-56页
        4.3.8 过表达14-3-3ζ载体的腺病毒转染HaCaT中后SIRT1的表达增高第56-57页
    4.4 讨论第57-59页
第五章 结论与展望第59-60页
    5.1 主要研究结论第59页
    5.2 展望第59-60页
参考文献第60-69页
致谢第69-71页
攻读硕士学位期间发表论文、学术活动的参与及获奖情况第71-72页
    一、发表论文第71页
    二、参加会议第71-72页
    三、专利第72页
    四、获奖情况第72页

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