摘要 | 第4-5页 |
Abstract | 第5-6页 |
第一章 前言 | 第11-24页 |
1.1 角膜内皮细胞 | 第11-13页 |
1.1.1 角膜内皮细胞的形态特征 | 第11页 |
1.1.2 角膜内皮细胞的功能 | 第11-13页 |
1.2 角膜保存 | 第13-16页 |
1.2.1 角膜保存的发展 | 第14页 |
1.2.2 角膜保存的方法 | 第14-15页 |
1.2.3 角膜保存的展望 | 第15-16页 |
1.3 自噬 | 第16-19页 |
1.3.1 自噬概述 | 第16-17页 |
1.3.2 自噬的研究方法 | 第17-18页 |
1.3.3 自噬的双重作用 | 第18-19页 |
1.4 角膜疾病中的自噬 | 第19-24页 |
1.4.1 角膜内皮营养不良 | 第20-21页 |
1.4.2 角膜相关微生物感染 | 第21-22页 |
1.4.3 圆锥角膜 | 第22页 |
1.4.4 Schnyder角膜营养不良(SCD) | 第22-24页 |
第二章 实验材料 | 第24-31页 |
2.1 实验动物 | 第24页 |
2.2 主要抗体 | 第24页 |
2.3 主要实验试剂及耗材 | 第24-26页 |
2.4 主要试验仪器 | 第26-28页 |
2.5 主要试验溶液的配制 | 第28-30页 |
2.5.1 Whole mount免疫荧光染色相关试剂的配制 | 第28页 |
2.5.2 茜素红染色相关试剂的配制 | 第28页 |
2.5.3 Western blot相关溶液配制 | 第28-29页 |
2.5.4 TUNEL染色相关试剂的配制 | 第29页 |
2.5.5 扫描电子显微镜相关试剂的配制 | 第29-30页 |
2.5.6 自噬抑制剂、激活剂等相关溶液的配制 | 第30页 |
2.6. 主要应用软件 | 第30-31页 |
第三章 实验方法 | 第31-41页 |
3.1 相关模型的建立与观察 | 第31-32页 |
3.1.1 大鼠角膜保存模型的建立 | 第31页 |
3.1.2 保存后的观察 | 第31-32页 |
3.1.3 大鼠角膜移植模型的建立 | 第32页 |
3.2 茜素红染色 | 第32页 |
3.3 全角膜片Whole mount免疫荧光染色 | 第32-33页 |
3.4 扫描电镜 | 第33-35页 |
3.4.1 取材和固定 | 第33-34页 |
3.4.2 脱水 | 第34页 |
3.4.3 冷冻干燥与喷金 | 第34页 |
3.4.4 扫描电镜观察 | 第34-35页 |
3.5 TUNEL染色 | 第35-36页 |
3.5.1 全角膜片的TUNEL染色 | 第35-36页 |
3.6 Western blot免疫印迹分析 | 第36-40页 |
3.6.1 组织蛋白的提取 | 第36页 |
3.6.2 蛋白样品的定置与制备 | 第36-38页 |
3.6.3 SDS-PAGE凝胶的制备 | 第38-39页 |
3.6.4 SDS-PAGE电泳 | 第39页 |
3.6.5 转膜 | 第39页 |
3.6.6 免疫反应与显影 | 第39-40页 |
3.7 统计学分析 | 第40-41页 |
第四章 结果 | 第41-54页 |
4.1 角膜保存过程中内皮细胞的改变 | 第41-44页 |
4.1.1 角膜保存过程中内皮细胞数量、形态及功能的改变 | 第41-43页 |
4.1.2 角膜保存过程中内皮细胞超微结构的改变 | 第43-44页 |
4.2 角膜保存过程中内皮细胞的自噬 | 第44-46页 |
4.3 角膜保存过程中内皮细胞的凋亡 | 第46-47页 |
4.4 自噬调控剂对角膜保存中内皮细胞的影响 | 第47-54页 |
4.4.1 自噬调控剂调节角膜保存中内皮细胞的自噬 | 第47-49页 |
4.4.2 自噬对角膜保存中内皮细胞的凋亡的影响 | 第49-50页 |
4.4.3 自噬对角膜保存中内皮细胞的活性的影响 | 第50-52页 |
4.4.4 大鼠角膜移植后的角膜状态 | 第52-54页 |
第五章 讨论 | 第54-58页 |
5.1 角膜保存过程可诱导角膜内皮细胞发生自噬 | 第54-55页 |
5.2 自噬对角膜内皮细胞的保护作用 | 第55-56页 |
5.3 自噬在角膜内皮疾病中的潜在应用价值 | 第56-58页 |
第六章 结论 | 第58-59页 |
附录 中英文对照表 | 第59-60页 |
参考文献 | 第60-69页 |
致谢 | 第69-70页 |