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角膜保存过程中角膜内皮细胞发生自噬的作用及机制研究

摘要第4-5页
Abstract第5-6页
第一章 前言第11-24页
    1.1 角膜内皮细胞第11-13页
        1.1.1 角膜内皮细胞的形态特征第11页
        1.1.2 角膜内皮细胞的功能第11-13页
    1.2 角膜保存第13-16页
        1.2.1 角膜保存的发展第14页
        1.2.2 角膜保存的方法第14-15页
        1.2.3 角膜保存的展望第15-16页
    1.3 自噬第16-19页
        1.3.1 自噬概述第16-17页
        1.3.2 自噬的研究方法第17-18页
        1.3.3 自噬的双重作用第18-19页
    1.4 角膜疾病中的自噬第19-24页
        1.4.1 角膜内皮营养不良第20-21页
        1.4.2 角膜相关微生物感染第21-22页
        1.4.3 圆锥角膜第22页
        1.4.4 Schnyder角膜营养不良(SCD)第22-24页
第二章 实验材料第24-31页
    2.1 实验动物第24页
    2.2 主要抗体第24页
    2.3 主要实验试剂及耗材第24-26页
    2.4 主要试验仪器第26-28页
    2.5 主要试验溶液的配制第28-30页
        2.5.1 Whole mount免疫荧光染色相关试剂的配制第28页
        2.5.2 茜素红染色相关试剂的配制第28页
        2.5.3 Western blot相关溶液配制第28-29页
        2.5.4 TUNEL染色相关试剂的配制第29页
        2.5.5 扫描电子显微镜相关试剂的配制第29-30页
        2.5.6 自噬抑制剂、激活剂等相关溶液的配制第30页
    2.6. 主要应用软件第30-31页
第三章 实验方法第31-41页
    3.1 相关模型的建立与观察第31-32页
        3.1.1 大鼠角膜保存模型的建立第31页
        3.1.2 保存后的观察第31-32页
        3.1.3 大鼠角膜移植模型的建立第32页
    3.2 茜素红染色第32页
    3.3 全角膜片Whole mount免疫荧光染色第32-33页
    3.4 扫描电镜第33-35页
        3.4.1 取材和固定第33-34页
        3.4.2 脱水第34页
        3.4.3 冷冻干燥与喷金第34页
        3.4.4 扫描电镜观察第34-35页
    3.5 TUNEL染色第35-36页
        3.5.1 全角膜片的TUNEL染色第35-36页
    3.6 Western blot免疫印迹分析第36-40页
        3.6.1 组织蛋白的提取第36页
        3.6.2 蛋白样品的定置与制备第36-38页
        3.6.3 SDS-PAGE凝胶的制备第38-39页
        3.6.4 SDS-PAGE电泳第39页
        3.6.5 转膜第39页
        3.6.6 免疫反应与显影第39-40页
    3.7 统计学分析第40-41页
第四章 结果第41-54页
    4.1 角膜保存过程中内皮细胞的改变第41-44页
        4.1.1 角膜保存过程中内皮细胞数量、形态及功能的改变第41-43页
        4.1.2 角膜保存过程中内皮细胞超微结构的改变第43-44页
    4.2 角膜保存过程中内皮细胞的自噬第44-46页
    4.3 角膜保存过程中内皮细胞的凋亡第46-47页
    4.4 自噬调控剂对角膜保存中内皮细胞的影响第47-54页
        4.4.1 自噬调控剂调节角膜保存中内皮细胞的自噬第47-49页
        4.4.2 自噬对角膜保存中内皮细胞的凋亡的影响第49-50页
        4.4.3 自噬对角膜保存中内皮细胞的活性的影响第50-52页
        4.4.4 大鼠角膜移植后的角膜状态第52-54页
第五章 讨论第54-58页
    5.1 角膜保存过程可诱导角膜内皮细胞发生自噬第54-55页
    5.2 自噬对角膜内皮细胞的保护作用第55-56页
    5.3 自噬在角膜内皮疾病中的潜在应用价值第56-58页
第六章 结论第58-59页
附录 中英文对照表第59-60页
参考文献第60-69页
致谢第69-70页

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