| 摘要 | 第8-10页 |
| ABSTRACT | 第10-11页 |
| 缩略词表 | 第12-13页 |
| 引言 | 第13-14页 |
| 第一部分 文献综述 | 第14-20页 |
| 1 兰科植物概况 | 第14-15页 |
| 2 TCP基因家族研究进展 | 第15-17页 |
| 3 CYC/TB1基因研究进展 | 第17-18页 |
| 4 生物信息学研究进展 | 第18-20页 |
| 第二部分 试验研究 | 第20-82页 |
| 第一章 兰科花卉TCP基因生物信息学分析 | 第20-36页 |
| 1 材料与方法 | 第21-22页 |
| 1.1 数据获取 | 第21页 |
| 1.2 数据分析 | 第21-22页 |
| 1.2.1 兰科植物TCP蛋白质序列比对 | 第21页 |
| 1.2.2 兰科植物TCP基因进化树构建 | 第21页 |
| 1.2.3 蝴蝶兰TCP基因的蛋白质结构预测 | 第21-22页 |
| 1.2.4 兰科植物CYC-like基因检索 | 第22页 |
| 1.2.5 蝴蝶兰CYC结合位点预测 | 第22页 |
| 2 结果与分析 | 第22-33页 |
| 2.1 单双子叶植物CYC/TB1基因功能比较 | 第22-24页 |
| 2.2 兰科植物TCP基因家族分析 | 第24-31页 |
| 2.3 蝴蝶兰TCP基因序列比对及蛋白质结构预测 | 第31-32页 |
| 2.4 蝴蝶兰CYC结合位点分析 | 第32-33页 |
| 3 讨论 | 第33-34页 |
| 4 本章结论 | 第34-36页 |
| 第二章 蝴蝶兰CYC-like基因的克隆及序列分析 | 第36-50页 |
| 1 材料与方法 | 第36-41页 |
| 1.1 试验材料 | 第36页 |
| 1.2 主要试剂 | 第36-37页 |
| 1.3 试验方法 | 第37-41页 |
| 1.3.1 改良CTAB法提取总RNA | 第37页 |
| 1.3.2 总RNA样品电泳质量检测 | 第37-38页 |
| 1.3.3 第一链cDNA的合成 | 第38页 |
| 1.3.4 特异性全长引物设计 | 第38页 |
| 1.3.5 PhCYC1、PhCYC2和PhCYC3基因全长扩增 | 第38-39页 |
| 1.3.6 目的片段的回收 | 第39页 |
| 1.3.7 目的片段的检测 | 第39页 |
| 1.3.8 目的片段的连接转化 | 第39-40页 |
| 1.3.9 重组产物的筛选与测序 | 第40-41页 |
| 1.3.10 PhCYCs基因序列分析及系统进化树的构建 | 第41页 |
| 2 结果与分析 | 第41-47页 |
| 2.1 RNA提取质量检测 | 第41-42页 |
| 2.2 蝴蝶兰CYC-like基因的克隆 | 第42-47页 |
| 2.2.1 PhCYC1、PhCYC2和PhCYC3基因cDNA全长序列的获得 | 第42-43页 |
| 2.2.2 PhCYC1、PhCYC2和PhCYC3基因序列分析 | 第43-46页 |
| 2.2.3 PhCYC1、PhCYC2和PhCYC3基因氨基酸序列同源性比较 | 第46页 |
| 2.2.4 PhCYC1、PhCYC2和PhCYC3基因系统进化分析 | 第46-47页 |
| 3 讨论 | 第47-48页 |
| 4 本章结论 | 第48-50页 |
| 第三章 蝴蝶兰CYC-like基因表达模式分析 | 第50-70页 |
| 1 材料与方法 | 第50-58页 |
| 1.1 试验材料 | 第50-51页 |
| 1.2 主要试剂 | 第51页 |
| 1.3 试验方法 | 第51-58页 |
| 1.3.1 酶切引物设计 | 第51页 |
| 1.3.2 质粒提取 | 第51-52页 |
| 1.3.3 CYC-like基因酶切位点添加 | 第52-53页 |
| 1.3.4 PhCYC1、PhCYC2和PhCYC3基因正义表达载体的构建 | 第53-54页 |
| 1.3.5 亚细胞定位 | 第54-55页 |
| 1.3.6 半定量RT-PCR分析 | 第55-57页 |
| 1.3.7 实时荧光定量分析 | 第57-58页 |
| 2 结果与分析 | 第58-67页 |
| 2.1 中间载体及表达载体酶切结果 | 第58-59页 |
| 2.2 pC1302-PhCYCs重组质粒双酶切验证结果 | 第59页 |
| 2.3 亚细胞定位 | 第59-61页 |
| 2.4 PhCYCs基因在不同花芽发育时期的表达特性 | 第61页 |
| 2.5 CYC-like基因在蝴蝶兰花器官中的表达特性 | 第61-65页 |
| 2.5.1 CYC-like基因在蝴蝶兰杂交种花器官中荧光定量表达结果 | 第61-62页 |
| 2.5.2 CYC-like基因在小兰屿蝴蝶兰花器官中荧光定量表达结果 | 第62-65页 |
| 2.5.3 其他基因在蝴蝶兰杂交种花器官中的表达特征 | 第65页 |
| 2.6 CYC-like基因在蝴蝶兰杂交种花序分枝中的荧光定量表达特征 | 第65-67页 |
| 3 讨论 | 第67-68页 |
| 4 本章结论 | 第68-70页 |
| 第四章 蝴蝶兰PhCYCs基因对夏堇花对称性与分枝的调控分析 | 第70-82页 |
| 1 材料与方法 | 第70-73页 |
| 1.1 试验材料 | 第70页 |
| 1.2 主要试剂 | 第70-71页 |
| 1.3 试验方法 | 第71-73页 |
| 1.3.1 夏堇遗传转化体系的建立 | 第71-72页 |
| 1.3.2 转PhCYCs基因夏堇植株的PCR鉴定 | 第72页 |
| 1.3.3 转基因夏堇植株半定量RT-PCR分析 | 第72-73页 |
| 2 结果与分析 | 第73-78页 |
| 2.1 夏堇转基因植株的获得 | 第73页 |
| 2.2 转基因植株的PCR及RT-PCR检测 | 第73-74页 |
| 2.3 转基因夏堇植株开花特征观察与分析 | 第74-77页 |
| 2.4 转基因夏堇内源基因半定量RT-PCR结果 | 第77-78页 |
| 3 讨论 | 第78-80页 |
| 4 本章结论 | 第80-82页 |
| 全文结论 | 第82-84页 |
| 附录 | 第84-90页 |
| 1 TCP基因登录号 | 第84-85页 |
| 2 引物序列 | 第85-90页 |
| 参考文献 | 第90-100页 |
| 论文发表情况 | 第100-102页 |
| 致谢 | 第102页 |
