| 摘要 | 第6-7页 |
| Abstract | 第7页 |
| 缩略语表 | 第8-10页 |
| 1 前言综述 | 第10-18页 |
| 1.1 鱼腥蓝细菌PCC 7120的异形胞发育 | 第10-15页 |
| 1.1.1 Anabaena sp. strain PCC 7120背景介绍 | 第10-11页 |
| 1.1.2 2-OG(α-ketoglutarate)胞内信号分子:感受氮源水平变化,诱导异形胞的分化 | 第11-12页 |
| 1.1.3 NtcA--异形胞发育的全局性调控因子 | 第12-13页 |
| 1.1.4 HetR—起始异形胞发育的重要蛋白 | 第13-14页 |
| 1.1.5 Anabaena sp. PCC 7120异形胞模式形成 | 第14-15页 |
| 1.2 FtsZ在原核细胞中的功能 | 第15-17页 |
| 1.2.1 FtsZ的结构与功能 | 第15-16页 |
| 1.2.2 鱼腥蓝细菌PCC 7120中FtsZ的亚细胞定位 | 第16-17页 |
| 1.3 研究目的与意义 | 第17-18页 |
| 2 材料和方法 | 第18-32页 |
| 2.1 菌株 | 第18-19页 |
| 2.2 质粒 | 第19-20页 |
| 2.3 常用储备液与缓冲液配方 | 第20-21页 |
| 2.3.1 常用储备液配方 | 第20页 |
| 2.3.2 常用缓冲液配方 | 第20-21页 |
| 2.4 培养基的配制及培养条件 | 第21-23页 |
| 2.5 实验所用主要分子生物学试剂 | 第23-24页 |
| 2.6 实验方法 | 第24-32页 |
| 2.6.1 提取大肠杆菌质粒DNA | 第24页 |
| 2.6.2 Anabaena PCC 7120基因组DNA的小量抽提 | 第24页 |
| 2.6.3 质粒DNA的相关操作 | 第24页 |
| 2.6.4 大肠杆菌感受态细胞的制备(CCMB80法)及常规转化 | 第24-25页 |
| 2.6.5 Anabaena PCC 7120接合转移 | 第25页 |
| 2.6.6 异形胞缺氮诱导 | 第25-26页 |
| 2.6.7 strep-tag标签蛋白的诱导表达与纯化 | 第26页 |
| 2.6.8 BradFord法检测蛋白浓度 | 第26-27页 |
| 2.6.9 抗体的制备与检测 | 第27-29页 |
| 2.6.10 细菌双杂交实验 | 第29-32页 |
| 3 结果与分析 | 第32-46页 |
| 3.1 超表达FtsZ导致形成连续异形胞的表型 | 第32-33页 |
| 3.2 HetN在Anabaena sp. PCC 7120中的亚细胞定位 | 第33-38页 |
| 3.2.1 hetN翻译融合质粒的构建 | 第33-35页 |
| 3.2.2 HetN在蓝细菌PCC 7120细胞内的定位 | 第35-36页 |
| 3.2.3 不同截短长度的HetN在细胞内的定位分析 | 第36-38页 |
| 3.3 HetN与FtsZ蛋白的体外表达与纯化以及抗体的制备 | 第38-41页 |
| 3.3.1 HetN与FtsZ重组表达质粒的构建 | 第38-39页 |
| 3.3.2 蛋白的表达与纯化 | 第39-41页 |
| 3.4 鱼腥蓝细菌PCC 7120体外FtsZ蛋白与HetN蛋白互作检测 | 第41-44页 |
| 3.4.1 通过细菌双杂交检测蛋白互作 | 第41-43页 |
| 3.4.2 Far-western blotting检测蛋白互作 | 第43-44页 |
| 3.5 hetN与ftsZ共转化鱼腥蓝细菌PCC 7120 | 第44-46页 |
| 4 总结与讨论 | 第46-48页 |
| 参考文献 | 第48-54页 |
| 附录 本研究所使用的引物 | 第54-56页 |
| 致谢 | 第56页 |
