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青霉菌灭活菌丝体诱导植物抗病性的机理研究

摘要第3-7页
Abstracts第7-17页
第一章 绪论第17-38页
    1 植物的免疫机制第17-28页
        1.1 植物的防御系统第17页
        1.2 基础免疫第17-20页
            1.2.1 PTI与ETI的形成第17-18页
            1.2.2 模式识别受体第18-20页
            1.2.3 R蛋白第20页
            1.2.4 PTI与ETI的应答效应第20页
        1.3 系统免疫第20-28页
            1.3.1 植物诱导抗性的物质基础第21-26页
                1.3.1.1 抗病相关次生代谢产物第22-25页
                    1.3.1.1.1 木质素第22页
                    1.3.1.1.2 胼胝质第22-23页
                    1.3.1.1.3 植保素第23-24页
                    1.3.1.1.4 与植物抗病相关的酶第24-25页
                1.3.1.2 病程相关蛋白第25-26页
            1.3.2 植物诱导抗性的信号传导第26-28页
                1.3.2.1 活性氧第26页
                1.3.2.2 植物激素第26-28页
                    1.3.2.2.1 水杨酸第27页
                    1.3.2.2.2 茉莉酸第27页
                    1.3.2.2.3 乙烯第27-28页
                1.3.2.3 植物系统诱导抗性的信号交互第28页
    2 诱导植物抗病性的激发子第28-29页
    3 植物与病毒病害第29-35页
        3.1 植物病毒病害的危害性第29页
        3.2 植物与病毒的互作第29-33页
            3.2.1 不亲和互作(以抗性烟草与TMV为例)第30-31页
            3.2.2 亲和互作(以易感烟草与TMV为例)第31-33页
                3.2.2.1 TMV的移动路径第31-32页
                3.2.2.2 TMV移动相关要素第32-33页
        3.3 植物病毒病害的防治措施第33-34页
        3.4 激发子防治植物病毒病害研究进展第34-35页
            3.4.1 微生物防治病毒病害第34页
            3.4.2 糖类激发子防治病毒病害第34-35页
            3.4.3 蛋白/肽类激发子防治病毒病害第35页
    4 青霉菌灭活菌丝体第35-37页
    5 本研究的目的和意义第37-38页
第二章 青霉菌灭活菌丝体诱导烟草BY-2细胞抗病防卫反应研究第38-57页
    第一节 DMP诱导烟草BY-2细胞次生代谢反应第39-51页
        1 材料与方法第39-44页
            1.1 材料第39-40页
            1.2 主要试剂第40页
            1.3 主要仪器设备第40-41页
            1.4 烟草BY-2悬浮细胞培养与诱导处理第41页
            1.5 抗病相关基因检测第41-43页
                1.5.1 烟草BY-2悬浮细胞总RNA提取第41页
                1.5.2 荧光定量PCR检测次生代谢相关基因转录水平第41-43页
            1.6 苯丙氨酸解氨酶(PAL)活性和过氧化物酶(POD)活性测定第43页
            1.7 细胞壁酚类物质荧光观察和总酚含量测定第43-44页
            1.8 胞外莨菪亭含量测定第44页
            1.9 木质素染色及含量测定第44页
        2 结果与分析第44-49页
            2.1 荧光定量PCR检测次生代谢相关基因转录水平第44-45页
            2.2 DMP诱导烟草BY-2悬浮细胞PAL和POD活性变化第45-46页
            2.3 细胞壁酚类物质荧光观察和总酚含量测定第46-48页
            2.4 胞外莨菪亭含量测定第48页
            2.5 木质素染色及含量测定第48-49页
        3 讨论第49-51页
    第二节 DMP诱导烟草BY-2细胞抗病防卫反应机理初探第51-57页
        1 材料与方法第51-52页
            1.1 主要试剂第51页
            1.2 烟草BY-2悬浮细胞培养与诱导处理第51页
            1.3 H_2O_2浓度的测定第51-52页
            1.4 烟草BY-2悬浮细胞胞外基质pH值测定第52页
            1.5 抗病相关基因检测第52页
                1.5.1 烟草BY-2细胞总RNA提取第52页
        2 结果与分析第52-54页
            2.1 DMP诱导烟草BY-2悬浮细胞活性氧迸发第52页
            2.2 DMP诱导烟草BY-2悬浮细胞胞外基质碱性化第52-53页
            2.3 DMP诱导烟草BY-2悬浮细胞信号传导途径相关基因表达第53-54页
        3 讨论第54-57页
第三章 DMP中诱导植物抗性的有效成分探究第57-70页
    1 材料与方法第57-62页
        1.1 材料第57-58页
        1.2 主要试剂第58页
        1.3 DMP水溶性多糖分离提取第58-59页
            1.3.1 多糖粗提物提取第58页
            1.3.2 多糖粗提物除蛋白第58页
            1.3.3 多糖浓度测定第58-59页
            1.3.4 PsD最适使用浓度检测第59页
        1.4 DMP水溶性多肽分离提取第59-61页
            1.4.1 多肽分离提取第59-60页
            1.4.2 多肽浓度测定第60页
            1.4.3 PDMP最适使用浓度检测第60-61页
        1.5 诱导剂配制第61页
        1.6 细胞死亡率检测第61页
        1.7 ROS检测第61-62页
        1.8 抗病相关基因检测第62页
            1.8.1 烟草BY-2悬浮细胞总RNA提取第62页
            1.8.2 荧光定量PCR检测抗病相关基因转录水平第62页
        1.9 细胞壁酚类物质荧光观察第62页
    2 结果与分析第62-68页
        2.1 多糖含量及最适使用浓度第62-64页
            2.1.1 多糖含量第62-63页
            2.1.2 PsD最适使用浓度第63-64页
        2.2 多肽含量及PDMP最适使用浓度第64-65页
            2.2.1 多肽含量第64页
            2.2.2 PDMP最适使用浓度第64-65页
        2.3 ROS检测第65-66页
        2.4 荧光定量PCR检测抗病相关基因转录水平第66-67页
        2.5 酚荧光观察第67-68页
    3 讨论第68-70页
第四章 PDMP诱导心叶烟系统抗性及其分子机制研究第70-86页
    1 材料与方法第70-72页
        1.1 材料第70页
        1.2 主要试剂第70页
        1.3 烟草花叶病毒提取与检测第70-71页
        1.4 烟草植株诱导处理与TMV接种第71页
            1.4.1 烟草植株诱导处理第71页
            1.4.2 TMV接种第71页
        1.5 抗病相关基因检测第71-72页
            1.5.1 烟草植株叶片总RNA提取第71-72页
            1.5.2 荧光定量PCR检测抗病相关基因转录水平第72页
        1.6 胼胝质染色第72页
    2 结果与分析第72-82页
        2.1 PDMP诱导心叶烟抗TMV第72-75页
        2.2 PDMP诱导心叶烟系统抗性信号通路相关基因的表达第75-77页
        2.3 TMV接种前后叶片抗病相关基因表达第77-80页
        2.4 TMV接种叶片胼胝质积累第80-82页
    3 讨论第82-86页
第五章 PDMP诱导易感烟草对TMV抗性的机理研究第86-99页
    1 材料与方法第87-90页
        1.1 材料第87页
        1.2 主要试剂第87页
        1.3 试验设计第87-88页
            1.3.1 PDMP诱导处理对TMV侵染性克隆扩散的影响第87页
            1.3.2 胼胝质抑制剂(DDG)对PDMP诱导的TMV抗性的影响第87-88页
        1.4 TMV侵染性克隆侵染液配制第88-89页
        1.5 TMV侵染性克隆接种本氏烟叶片第89-90页
        1.6 GFP荧光检测第90页
        1.7 抗性基因检测第90页
    2 结果与分析第90-97页
        2.1 PDMP诱导处理对TMV扩散的影响第90-93页
        2.2 PDMP对本氏烟抗性基因表达的影响第93-95页
        2.3 胼胝质抑制剂对PDMP诱导的TMV抗性的影响第95-97页
    3 讨论第97-99页
第六章 青霉菌菌丝体水溶性多肽有效组分的分离纯化第99-113页
    1 材料与方法第99-102页
        1.1 材料第100页
        1.2 主要试剂和仪器第100页
            1.2.1 主要试剂第100页
            1.2.2 主要仪器设备第100页
        1.3 DMP中多肽一级分离第100-101页
        1.4 一级分离产物诱导抗病效果分析第101页
        1.5 DMP中多肽的二级分离第101页
        1.6 二级分离组分诱导抗病效果分析第101-102页
        1.7 DMP中多肽的三级分离与抗病效果分析第102页
    2 结果与分析第102-110页
        2.1 DMP中多肽的一级分离及各组分的诱导抗病效果检测第102-104页
        2.2 DMP中多肽的二级分离及各组分的诱导抗病效果检测第104-106页
        2.3 DMP中多肽的三级分离及各组分的诱导抗病效果检测第106-110页
    3 讨论第110-113页
第七章 小结与展望第113-115页
附录第115-124页
参考文献第124-141页
攻读博士学位期间完成的科研成果第141-142页
致谢第142页

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