摘要 | 第3-5页 |
Abstract | 第5-7页 |
缩略词表 | 第11-12页 |
第1章 文献综述 | 第12-26页 |
1.1 丹参研究概况 | 第12-14页 |
1.2 丹参酚酸类活性成分生物合成调控研究现状 | 第14-18页 |
1.3 药用植物代谢组学研究概况 | 第18-22页 |
1.4 基于新一代测序技术的数字基因表达谱分析简介 | 第22-23页 |
1.5 本研究的目的意义和主要内容 | 第23-26页 |
第2章 基于基因表达谱和代谢组学策略研究MeJA对丹参次生代谢产物合成的影响 | 第26-67页 |
2.1 前言 | 第26-27页 |
2.2 实验材料与试剂 | 第27-28页 |
2.2.1 植物材料 | 第27页 |
2.2.2 实验仪器 | 第27-28页 |
2.2.3 主要试剂 | 第28页 |
2.3 实验方法 | 第28-37页 |
2.3.1 丹参植株的培养 | 第28页 |
2.3.2 茉莉酸甲酯的处理 | 第28-29页 |
2.3.3 基于GC-MS技术的丹参代谢组学研究方法的建立 | 第29-31页 |
2.3.4 基于LC-MS技术的丹参代谢组学研究方法的建立 | 第31-34页 |
2.3.5 基于Solexa测序技术的丹参数字基因表达谱分析 | 第34-37页 |
2.4 结果与讨论 | 第37-66页 |
2.4.1 茉莉酸甲酯处理对丹参代谢产物含量的影响 | 第37-49页 |
2.4.2 茉莉酸甲酯处理后丹参数字基因表达谱分析 | 第49-64页 |
2.4.3 酚酸类成分含量与丹酚酸B合成相关基因表达的相关性分析 | 第64-66页 |
2.5 本章小结 | 第66-67页 |
第3章 过表达AtPAP1对丹参酚酸类活性成分生物合成的调控研究 | 第67-125页 |
3.1 前言 | 第67-68页 |
3.2 实验材料与试剂 | 第68-69页 |
3.2.1 植物材料 | 第68页 |
3.2.2 菌株及载体 | 第68页 |
3.2.3 实验仪器 | 第68页 |
3.2.4 主要试剂 | 第68-69页 |
3.3 实验方法 | 第69-81页 |
3.3.1 APAP/基因过表达重组质粒的构建 | 第69-71页 |
3.3.2 过表达载体的转化丹参 | 第71-72页 |
3.3.3 转基因植株的分子鉴定 | 第72-76页 |
3.3.4 丹参酚酸类活性成分的测定 | 第76-77页 |
3.3.5 木质素检测 | 第77-78页 |
3.3.6 总酚、总黄酮和花青素含量的测定 | 第78-79页 |
3.3.7 抗氧化活性测定 | 第79-80页 |
3.3.8 转PAP1丹参代谢组学分析 | 第80页 |
3.3.9 转PAP1丹参数字基因表达谱分析 | 第80页 |
3.3.10 数据分析 | 第80-81页 |
3.4 结果与讨论 | 第81-123页 |
3.4.1 转基因植株的分子检测 | 第81-83页 |
3.4.2 转基因植株的表型观测 | 第83-85页 |
3.4.3 转PAP1丹参酚酸类活性成分含量测定 | 第85-88页 |
3.4.4 转PAP1丹参总酚、总黄酮、花青素、木质素含量测定 | 第88-91页 |
3.4.5 抗氧化活性测定 | 第91-92页 |
3.4.6 过表达拟南芥PAP1转录因子对丹参代谢产物含量的影响 | 第92-105页 |
3.4.7 转PAP1丹参数字基因表达谱分析 | 第105-123页 |
3.5 本章小结 | 第123-125页 |
第4章 多基因协同过表达-干涉载体系统的构建及其在丹参酚酸类成分代谢调控中的应用 | 第125-170页 |
4.1 前言 | 第125-126页 |
4.2 实验材料与试剂 | 第126页 |
4.2.1 植物材料 | 第126页 |
4.2.2 菌株及载体 | 第126页 |
4.2.3 实验仪器 | 第126页 |
4.2.4 主要试剂 | 第126页 |
4.3 实验方法 | 第126-132页 |
4.3.1 双干扰载体的构建 | 第126-129页 |
4.3.2 多基因协同过表达-干涉载体(PCC)的构建 | 第129-130页 |
4.3.3 PCC载体的转化丹参 | 第130页 |
4.3.4 转基因植株的分子鉴定 | 第130-131页 |
4.3.5 丹参酚酸类活性成分的测定 | 第131页 |
4.3.6 木质素、总酚、总黄酮和花青素含量的测定 | 第131-132页 |
4.3.7 抗氧化活性测定 | 第132页 |
4.3.8 转PCC载体丹参代谢组学分析 | 第132页 |
4.3.9 转PCC载体丹参数字基因表达谱分析 | 第132页 |
4.3.10 数据分析 | 第132页 |
4.4 结果与讨论 | 第132-168页 |
4.4.1 转PCC载体丹参植株的分子检测 | 第132-134页 |
4.4.2 转PCC载体丹参营养器官的表型 | 第134-135页 |
4.4.3 转PCC载体丹参酚酸类活性成分含量测定 | 第135-138页 |
4.4.4 转PCC载体丹参中木质素、总酚、总黄酮、花青素含量和抗氧化活性的测定 | 第138-141页 |
4.4.5 PCC载体转化对丹参代谢产物含量的影响 | 第141-151页 |
4.4.6 转PCC载体丹参数字基因表达谱分析 | 第151-168页 |
4.5 本章小结 | 第168-170页 |
第5章 总结与展望 | 第170-175页 |
5.1 研究工作总结 | 第170-173页 |
5.2 论文创新点 | 第173-174页 |
5.3 展望 | 第174-175页 |
参考文献 | 第175-185页 |
致谢 | 第185-186页 |
攻读学位期间研究成果 | 第186-187页 |