| 摘要 | 第9-11页 |
| Abstract | 第11-12页 |
| 第一章 文献综述 | 第13-20页 |
| 第二章 OsPIMTs的克隆与序列分析 | 第20-29页 |
| 2.1 材料与方法 | 第20-22页 |
| 2.1.1 主要材料与试剂 | 第20页 |
| 2.1.2 Smarter RACE技术克隆OsPIMTs全长cDNA | 第20-21页 |
| 2.1.3 OsPIMTs的序列分析 | 第21-22页 |
| 2.2 结果 | 第22-27页 |
| 2.2.1 OsPIMTs的全长克隆 | 第22-23页 |
| 2.2.2 OsPIMTs的序列分析 | 第23-27页 |
| 2.3 讨论 | 第27-29页 |
| 2.3.1 利用Smarter RACE扩增OsPIMT1和OsPIMT2全长cDNA | 第27-28页 |
| 2.3.2 OsPIMTs可能存在不同的功能和底物特异性 | 第28-29页 |
| 第三章 OsPIMTs表达模式的分析 | 第29-45页 |
| 3.1 材料与方法 | 第29-34页 |
| 3.1.1 主要材料与试剂 | 第29页 |
| 3.1.2 植物培养与处理条件 | 第29页 |
| 3.1.3 RNA提取与qPCR分析 | 第29-30页 |
| 3.1.4 亚细胞定位与GUS组织化学染色 | 第30-34页 |
| 3.1.4.1 OsPIMTs CDS的克隆 | 第30页 |
| 3.1.4.2 亚细胞载体的构建 | 第30-31页 |
| 3.1.4.3 组织特异性表达载体的构建 | 第31-32页 |
| 3.1.4.4 原生质体转化 | 第32页 |
| 3.1.4.5 水稻转化与组织细胞染色 | 第32-34页 |
| 3.1.4.6 OsPIMT2信号肽序列的定位分析 | 第34页 |
| 3.2 结果 | 第34-42页 |
| 3.2.1 组织特异性表达 | 第34-38页 |
| 3.2.2 亚细胞定位分析 | 第38-40页 |
| 3.2.3 苗期OsPIMTs的的表达模式分析 | 第40页 |
| 3.2.4 非生物胁迫下OsPIMTs的表达模式 | 第40-41页 |
| 3.2.5 激素诱导下OsPIMTs的表达模式 | 第41-42页 |
| 3.3 讨论 | 第42-45页 |
| 3.3.1 OsPIMT1与OsPIMT2存在不同的亚细胞定位与组织表达模式 | 第42-43页 |
| 3.3.2 OsPIMT1与OsPIMT2受到非生物胁迫和ABA诱导表达 | 第43-45页 |
| 第四章 OsPIMTs表达载体的构建与遗传转化 | 第45-54页 |
| 4.1 材料与方法 | 第45-47页 |
| 4.1.1 主要材料与试剂 | 第45页 |
| 4.1.2 过表达载体与水稻转化 | 第45页 |
| 4.1.3 RNAi干扰载体的构建 | 第45-46页 |
| 4.1.4 转基因植株的分子生物学鉴定 | 第46-47页 |
| 4.1.4.1 转基因植株Southern杂交分析 | 第46页 |
| 4.1.4.2 转基因植株半定量分析 | 第46页 |
| 3.1.4.3 T-DNA插入突变体4ZH的分子鉴定 | 第46-47页 |
| 4.2 结果 | 第47-52页 |
| 4.2.1 水稻转化与转基因植株分子检测 | 第47-48页 |
| 4.2.2 转基因植株的分子检测 | 第48-50页 |
| 4.2.3 突变体材料和转基因植株的表型分析 | 第50-52页 |
| 4.3 讨论 | 第52-54页 |
| 第五章 转基因及突变体的表型分析 | 第54-70页 |
| 5.1 材料与方法 | 第54-55页 |
| 5.1.1 材料与试剂 | 第54页 |
| 5.1.2 水稻材料处理 | 第54-55页 |
| 5.1.3 缺素表达模式的分析 | 第55页 |
| 5.1.4 低氮处理下转基因材料的生理学数据分析 | 第55页 |
| 5.2 结果 | 第55-65页 |
| 5.2.1 高温老化对突变体材料的发芽率的影响 | 第55-59页 |
| 5.2.2 低氮处理下表达模式的研究 | 第59-61页 |
| 5.2.3 低氮胁迫下生理学数据的采集与分析 | 第61-63页 |
| 5.2.4 抗氧化系统的测定 | 第63-65页 |
| 5.3 讨论 | 第65-70页 |
| 5.3.1 OsPIMTs对于种子活力的影响 | 第65-66页 |
| 5.3.2 缺素胁迫下水稻内参基因的筛选 | 第66-67页 |
| 5.3.3 OsPIMTs对于氮素胁迫的影响 | 第67-70页 |
| 结论 | 第70-72页 |
| 参考文献 | 第72-80页 |
| 附录 | 第80-87页 |
| 附录1 引物序列 | 第80-84页 |
| 附录2 载体图片与DNA marker | 第84-86页 |
| 附录3 基本培养基表 | 第86-87页 |
| 致谢 | 第87页 |
