摘要 | 第6-7页 |
Abstract | 第7-8页 |
前言 | 第10-19页 |
1. 新孢子虫和弓形虫概述 | 第10-12页 |
2. 新孢子虫和弓形虫免疫学研究 | 第12-14页 |
3. 新孢子虫病和弓形虫病的防治 | 第14-16页 |
4. 腺病毒载体 | 第16-17页 |
5. 研究目的与意义 | 第17-19页 |
材料与方法 | 第19页 |
1 材料 | 第19-22页 |
1.1 细胞株及虫株 | 第19页 |
1.2 试验试剂 | 第19-20页 |
1.3 试验仪器设备 | 第20页 |
1.4 试验溶液 | 第20-22页 |
2 方法 | 第22-27页 |
2.1 引物的设计与合成 | 第22页 |
2.2 细胞与虫体培养 | 第22-23页 |
2.3 新孢子虫和弓形虫DNA提取与AMA1基因扩增 | 第23页 |
2.4 新孢子虫和弓形虫AMA1基因的克隆 | 第23-24页 |
2.5 重组pVAX1-Nc/Tg AMA1质粒的构建及真核表达 | 第24页 |
2.6 重组质粒pVAX1-Nc/TgMA1的大量提取 | 第24页 |
2.7 重组腺病毒穿梭质粒ADV4-Nc/Tg AMA1构建 | 第24-25页 |
2.8 AMA1基因重组腺病毒表包装 | 第25页 |
2.9 重组腺病毒Ad5-Nc/TgAMA1的鉴定 | 第25页 |
2.10 重组腺病毒Ad5-Nc/AgAMA1滴度的测定 | 第25页 |
2.11 动物接种试验 | 第25-26页 |
2.12 接种小鼠血清中抗体水平的检测 | 第26页 |
2.13 接种小鼠血清中IFN-γ、IL-4水平检测 | 第26页 |
2.14 接种小鼠攻虫试验 | 第26页 |
2.15 数据分析 | 第26-27页 |
结果 | 第27-34页 |
1 AMA1基因的扩增 | 第27页 |
2 重组质粒pMD18T-Nc/TgAMA1的鉴定 | 第27-28页 |
3 重组真核质粒pVAX1-Nc/TgAMA1的鉴定 | 第28-29页 |
4 pVAX1-Nc/TgAMA1质粒的真核表达 | 第29页 |
5 重组腺病毒穿梭质粒ADV4-Nc/Tg AMA1鉴定 | 第29-30页 |
6 重组腺病毒Ad5-Nc/TgAMA1包装及鉴定 | 第30页 |
7 重组腺病毒Ad5-Nc/TgAMA1滴度的测定 | 第30-31页 |
8 BALB/c小鼠血清中的IgG抗体检测结果 | 第31页 |
9 BALB/c小鼠外周血中细胞因子水平检测结果 | 第31-32页 |
10 BALB/c小鼠攻虫试验结果 | 第32-34页 |
讨论 | 第34-37页 |
结论 | 第37-38页 |
参考文献 | 第38-48页 |
致谢 | 第48-49页 |
附录A (作者简介) | 第49-50页 |
附录B (在研期间发表的论文和申报专利) | 第50页 |