| 摘要 | 第4-6页 |
| ABSTRACT | 第6-8页 |
| 第一章 文献综述 | 第12-25页 |
| 1 富含甘氨酸RNA结合蛋白(GRPs)的结构 | 第12-14页 |
| 1.1 组成和命名 | 第12页 |
| 1.2 二级结构预测 | 第12-14页 |
| 1.2.1 甘氨酸环 | 第13页 |
| 1.2.2 β-折叠 | 第13-14页 |
| 2 GRPs的功能 | 第14-16页 |
| 2.1 作为细胞外基质成分 | 第14-15页 |
| 2.2 作为连接细胞壁-细胞骨架之间的桥梁 | 第15页 |
| 2.3 蛋白质-核酸相互作用 | 第15-16页 |
| 2.4 膜脂结构的稳定性 | 第16页 |
| 3 植物中富含甘氨酸RNA结合蛋白(GRPs) | 第16-23页 |
| 3.1 GRPs在细胞壁结构中的作用 | 第20页 |
| 3.2 GRPs在植物防御中的作用 | 第20页 |
| 3.3 GRPs在渗透胁迫中的作用 | 第20-21页 |
| 3.4 GRPs在冷应激中的作用不局限于具有冷休克区 | 第21-22页 |
| 3.5 GRPs在开花时间控制和发育中的作用 | 第22-23页 |
| 3.6 GRPs在细胞伸长中的作用 | 第23页 |
| 4 研究目的与意义 | 第23-25页 |
| 第二章 中国樱桃富含甘氨酸RNA结合蛋白基因的生物信息学分析 | 第25-35页 |
| 1 前言 | 第25页 |
| 2 材料与方法 | 第25-26页 |
| 2.1 基因序列来源 | 第25-26页 |
| 2.2 基因序列的生物信息学分析 | 第26页 |
| 3 结果分析 | 第26-33页 |
| 3.1 中国樱桃富含甘氨酸RNA结合蛋白(GRPs)基因的生物信息学分析 | 第26-31页 |
| 3.2 中国樱桃GRPs基因系统进化树以及同源性分析 | 第31-33页 |
| 4 讨论 | 第33-35页 |
| 第三章 中国樱桃富含甘氨酸RNA结合蛋白基因的克隆与表达分析 | 第35-47页 |
| 1 前言 | 第35页 |
| 2 材料与方法 | 第35-42页 |
| 2.1 材料 | 第35-37页 |
| 2.1.1 供试菌体与载体 | 第36页 |
| 2.1.2 相关试剂 | 第36-37页 |
| 2.1.3 主要试剂配制 | 第37页 |
| 2.2 实验方法 | 第37-42页 |
| 2.2.1 引物设计 | 第37-38页 |
| 2.2.2 质粒的提取 | 第38页 |
| 2.2.3 中国樱桃富含甘氨酸RNA结合蛋白(GRPs)扩增 | 第38页 |
| 2.2.4 BP反应 | 第38-39页 |
| 2.2.5 BP反应菌落验证 | 第39页 |
| 2.2.6 LR反应 | 第39页 |
| 2.2.7 LR反应菌落验证 | 第39-40页 |
| 2.2.8 RNA的提取 | 第40-41页 |
| 2.2.9 cDNA一链合成 | 第41页 |
| 2.2.10 实时定量PCR(qRT PCR)扩增 | 第41-42页 |
| 3 结果分析 | 第42-45页 |
| 3.1 中国樱桃总RNA提取 | 第42页 |
| 3.2 中国樱桃PpcGRPs基因的菌液验证 | 第42-43页 |
| 3.3 低温处理下樱桃花芽中PpcGRPs基因的表达分析 | 第43-44页 |
| 3.4 低温处理下樱桃叶片中PpcGRPs基因的表达分析 | 第44-45页 |
| 4 讨论 | 第45-47页 |
| 第四章 中国樱桃富含甘氨酸RNA结合蛋白基因在拟南芥中的功能初鉴 | 第47-60页 |
| 1 前言 | 第47页 |
| 2 材料与方法 | 第47-52页 |
| 2.1 植物材料 | 第47页 |
| 2.2 载体和菌株 | 第47页 |
| 2.3 试剂 | 第47-48页 |
| 2.4 相关试剂及培养基的配制 | 第48页 |
| 2.5 拟南芥遗传转化的研究 | 第48-50页 |
| 2.5.1 根瘤农杆菌感受态细胞的制备 | 第48-49页 |
| 2.5.2 植物表达载体转化农杆菌 | 第49页 |
| 2.5.3 重组农杆菌的验证 | 第49页 |
| 2.5.4 农杆菌的活化及介导拟南芥的遗传转化 | 第49-50页 |
| 2.6 拟南芥抗性种子筛选与鉴定 | 第50-52页 |
| 2.6.1 拟南芥抗性种子的筛选 | 第50-51页 |
| 2.6.2 拟南芥转基因植株的PCR检测 | 第51-52页 |
| 2.6.3 拟南芥转基因植株T1代种子的获得 | 第52页 |
| 2.7 低温胁迫下转基因拟南芥的抗寒性分析 | 第52页 |
| 2.7.1 电解质外渗率(REC)的测定 | 第52页 |
| 2.7.2 丙二醛(MDA)含量的测定 | 第52页 |
| 3 结果分析 | 第52-57页 |
| 3.1 拟南芥转基因抗性苗分子检测 | 第52-54页 |
| 3.2 PpcGRPs转基因拟南芥对种子萌发的影响 | 第54-55页 |
| 3.3 低温处理不同时间下转基因拟南芥的电解质渗透率 | 第55-56页 |
| 3.4 低温处理不同时间对转基因拟南芥中MDA的影响 | 第56-57页 |
| 4 讨论 | 第57-60页 |
| 结果与展望 | 第60-61页 |
| 参考文献 | 第61-69页 |
| 攻读硕士期间取得的研究成果 | 第69-70页 |
| 致谢 | 第70-72页 |
