| 摘要 | 第5-7页 |
| abstract | 第7-8页 |
| 英文缩略词中英文注释表 | 第14-15页 |
| 第一章 绪论 | 第15-23页 |
| 1.1 环状RNA概述 | 第15-16页 |
| 1.1.1 环状RNA的发现及结构特点 | 第15页 |
| 1.1.2 环状RNA的形成机制 | 第15-16页 |
| 1.1.2.1 外显子环状RNA的合成 | 第15-16页 |
| 1.1.2.2 内含子环状RNA的合成 | 第16页 |
| 1.1.2.3 外显子-内含子环状RNA的合成 | 第16页 |
| 1.2 环状RNA与肿瘤 | 第16-21页 |
| 1.2.1 环状RNA在肿瘤中的表达 | 第16-18页 |
| 1.2.2 环状RNA在肿瘤中的作用及作用机制 | 第18-19页 |
| 1.2.2.1 环状RNA作为miRNA的分子海绵发挥作用 | 第18页 |
| 1.2.2.2 环状RNA调控转录 | 第18-19页 |
| 1.2.2.3 环状RNA与蛋白相互作用 | 第19页 |
| 1.2.3 CircularRNAITCH与肿瘤 | 第19-21页 |
| 1.3 间充质干细胞 | 第21-23页 |
| 1.3.1 间充质干细胞的生物学特性以及应用 | 第21页 |
| 1.3.2 间充质干细胞的恶性转变 | 第21-23页 |
| 第二章 研究目的、方法、实验设计方案和意义 | 第23-27页 |
| 2.1 研究目的 | 第23页 |
| 2.2 主要研究方法 | 第23-24页 |
| 2.3 实验设计方案及路线 | 第24-26页 |
| 2.3.1 cir-ITCH在胃癌患者组织以及细胞株中的表达检测 | 第24-25页 |
| 2.3.2 cir-ITCH对胃癌细胞增殖、迁移和侵袭的作用研究 | 第25-26页 |
| 2.3.3 cir-ITCH在间充质干细胞恶性转变中的作用研究 | 第26页 |
| 2.4 研究意义 | 第26-27页 |
| 第三章 cir-ITCH在胃癌中的表达及临床意义分析 | 第27-35页 |
| 3.1 实验材料与仪器 | 第27-28页 |
| 3.1.1 临床标本 | 第27页 |
| 3.1.2 细胞株 | 第27页 |
| 3.1.3 主要试剂 | 第27-28页 |
| 3.1.4 主要仪器、耗材 | 第28页 |
| 3.2 方法 | 第28-30页 |
| 3.2.1 细胞培养 | 第28页 |
| 3.2.2 总RNA提取 | 第28-29页 |
| 3.2.3 逆转录 | 第29页 |
| 3.2.4 实时荧光定量RT-PCR | 第29-30页 |
| 3.2.5 琼脂糖凝胶电泳与测序 | 第30页 |
| 3.2.6 统计分析 | 第30页 |
| 3.3 结果 | 第30-34页 |
| 3.3.1 cir-ITCH的qRT-PCR表达检测 | 第30-31页 |
| 3.3.2 cir-ITCH在胃癌组织和细胞株中的表达 | 第31-32页 |
| 3.3.3 cir-ITCH在胃癌中的临床意义分析 | 第32-34页 |
| 3.4 讨论 | 第34-35页 |
| 第四章 cir-ITCH对胃癌细胞和间充质干细胞增殖、迁移侵袭的影响 | 第35-49页 |
| 4.1 实验材料与仪器 | 第35-36页 |
| 4.1.1 细胞株 | 第35页 |
| 4.1.2 主要试剂 | 第35-36页 |
| 4.1.3 主要仪器、耗材 | 第36页 |
| 4.2 方法 | 第36-39页 |
| 4.2.1 细胞培养 | 第36-37页 |
| 4.2.1.1 胃癌细胞株的培养 | 第36页 |
| 4.2.1.2 hucMSC的培养 | 第36页 |
| 4.2.1.3 GC-MSC的培养 | 第36-37页 |
| 4.2.2 细胞转染si-cir-ITCH模型的构建 | 第37页 |
| 4.2.3 细胞转染慢病毒过表达cir-ITCH模型的构建 | 第37-38页 |
| 4.2.4 总RNA提取 | 第38页 |
| 4.2.5 逆转录 | 第38页 |
| 4.2.6 实时荧光定量RT-PCR | 第38页 |
| 4.2.7 细胞生长曲线检测 | 第38页 |
| 4.2.8 细胞克隆形成实验 | 第38-39页 |
| 4.2.9 细胞迁移和侵袭实验 | 第39页 |
| 4.2.10 统计分析 | 第39页 |
| 4.3 结果 | 第39-47页 |
| 4.3.1 cir-ITCH干扰胃癌细胞的效率检测 | 第39-40页 |
| 4.3.2 cir-ITCH敲减促进胃癌细胞的增殖 | 第40-41页 |
| 4.3.3 cir-ITCH敲减促进胃癌细胞的迁移和侵袭 | 第41-42页 |
| 4.3.4 cir-ITCH过表达效率检测 | 第42页 |
| 4.3.5 cir-ITCH过表达抑制胃癌细胞的增殖、迁移和侵袭 | 第42-43页 |
| 4.3.6 cir-ITCH在hucMSC和GC-MSC中的表达 | 第43-44页 |
| 4.3.7 cir-ITCH敲减促进hucMSC的增殖、迁移和侵袭 | 第44-46页 |
| 4.3.8 cir-ITCH敲减促进GC-MSC的迁移和侵袭 | 第46-47页 |
| 4.4 讨论 | 第47-49页 |
| 第五章 cir-ITCH通过靶向作用miR-7/miR-214调控TGF-β/Smad信号通路 | 第49-61页 |
| 5.1 实验材料与仪器 | 第49-50页 |
| 5.1.1 细胞株 | 第49页 |
| 5.1.2 主要试剂 | 第49-50页 |
| 5.1.3 主要仪器、耗材 | 第50页 |
| 5.2 方法 | 第50-53页 |
| 5.2.1 细胞培养 | 第50页 |
| 5.2.2 细胞共转模型的构建 | 第50页 |
| 5.2.3 总RNA提取 | 第50-51页 |
| 5.2.4 逆转录 | 第51页 |
| 5.2.5 实时荧光定量RT-PCR | 第51-52页 |
| 5.2.6 细胞增殖能力检测 | 第52页 |
| 5.2.7 细胞迁移和侵袭实验 | 第52页 |
| 5.2.8 细胞总蛋白的提取 | 第52页 |
| 5.2.9 Western Blot | 第52页 |
| 5.2.10 统计分析 | 第52-53页 |
| 5.3 结果 | 第53-59页 |
| 5.3.1 cir-ITCH干扰胃癌细胞后miRNA含量的变化 | 第53-54页 |
| 5.3.2 cir-ITCH干扰胃癌细胞后下游相关通路蛋白及mRNA含量变化 | 第54-55页 |
| 5.3.3 miR-7/miR-214抑制物逆转敲减cir-ITCH对胃癌细胞的促增殖作用 | 第55-56页 |
| 5.3.4 miR-7/miR-214抑制物逆转敲减cir-ITCH对胃癌细胞的促迁移和侵袭作用 | 第56-57页 |
| 5.3.5 胃癌细胞中cir-ITCH过表达后miRNA及下游通路蛋白、mRNA含量的变化 | 第57-58页 |
| 5.3.6 hucMSC中cir-ITCH敲减后miRNA及下游通路蛋白、mRNA含量的变化 | 第58-59页 |
| 5.4 讨论 | 第59-61页 |
| 结论及展望 | 第61-63页 |
| 一 结论 | 第61页 |
| 二 展望 | 第61-63页 |
| 参考文献 | 第63-72页 |
| 致谢 | 第72-73页 |
| 攻读硕士学位期间发表的学术论文与参加的会议 | 第73-74页 |
