| 摘要 | 第7-9页 |
| Abstracts | 第9-10页 |
| 缩略词表 | 第11-12页 |
| 1.前言 | 第12-22页 |
| 1.1 细胞质雄性不育 | 第12-17页 |
| 1.1.1 细胞质雄性不育在杂种优势中的应用 | 第12-13页 |
| 1.1.2 细胞质雄性不育生理机制的研究进展 | 第13-15页 |
| 1.1.3 细胞质雄性不育育性恢复基因和恢复机制的研究进展 | 第15-17页 |
| 1.2 玉米细胞质雄性不育研究进展 | 第17-19页 |
| 1.2.1 细胞质雄性不育的分类 | 第17页 |
| 1.2.2 玉米CMS-C和CMS-T及其育性恢复研究进展 | 第17-18页 |
| 1.2.3 玉米CMS-S及其育性恢复基因研究进展 | 第18-19页 |
| 1.3 基因克隆方法 | 第19-21页 |
| 1.3.1 图位克隆 | 第19-20页 |
| 1.3.2 EMS诱变在基因克隆及遗传改良上的应用 | 第20-21页 |
| 1.4 本研究的目的及意义 | 第21-22页 |
| 2.材料与方法 | 第22-26页 |
| 2.1 试验材料 | 第22-23页 |
| 2.1.1 新恢复基因位点的验证 | 第22页 |
| 2.1.2 EMS诱变材料的构建、筛选及诱变位点定位 | 第22-23页 |
| 2.2 田间试验及性状考察 | 第23页 |
| 2.2.1 玉米雄穗田间表型调查 | 第23页 |
| 2.2.2 花粉育性调查 | 第23页 |
| 2.3 DNA的提取 | 第23页 |
| 2.3.1 利用CTAB法提取玉米苗期叶片DNA | 第23页 |
| 2.3.2 利用碱煮法提取玉米籽粒胚乳DNA | 第23页 |
| 2.4 表型数据初步整理与分析 | 第23-24页 |
| 2.5 引物的开发及多态性筛选 | 第24页 |
| 2.5.1 SSR标记的开发及多态性筛选 | 第24页 |
| 2.5.2 SNP标记的开发及多态性筛选 | 第24页 |
| 2.6 分子标记数据的收集 | 第24页 |
| 2.7 交换单株的筛选 | 第24页 |
| 2.8 育性恢复基因定位方法 | 第24-25页 |
| 2.8.1 遗传连锁图谱的构建 | 第24-25页 |
| 2.8.2 QTL定位分析 | 第25页 |
| 2.8.3 单标记分析 | 第25页 |
| 2.9 EMS诱变育性突变体鉴定及分析 | 第25-26页 |
| 3.结果与分析 | 第26-42页 |
| 3.1 CMS-S育性恢复位点初步定位 | 第26-33页 |
| 3.1.1 BC1群体育性分布 | 第26-30页 |
| 3.1.2 多态性引物筛选 | 第30页 |
| 3.1.3 局部遗传连锁图谱的构建 | 第30-31页 |
| 3.1.4 QTL定位分析 | 第31-33页 |
| 3.2 三个主效恢复基因位点的精细定位 | 第33-39页 |
| 3.2.1 L4群体育性恢复位点的精细定位 | 第33-34页 |
| 3.2.2 L6群体育性恢复位点的精细定位 | 第34-35页 |
| 3.2.3 L5群体育性恢复位点的精细定位 | 第35-39页 |
| 3.3 EMS诱变鉴定CMS-S育性恢复位点 | 第39-42页 |
| 3.3.1 EMS诱变材料鉴定 | 第39-40页 |
| 3.3.2 EMS诱变材料初步遗传分析 | 第40-42页 |
| 4.讨论 | 第42-45页 |
| 4.1 CMS-S育性恢复由多个主效基因和微效基因控制 | 第42-43页 |
| 4.2 EMS诱变发掘CMS-S育性恢复相关位点 | 第43页 |
| 4.3 CMS-S育性恢复位点发掘与杂种优势利用 | 第43-44页 |
| 4.4 下一步工作 | 第44-45页 |
| 参考文献 | 第45-56页 |
| 附录 | 第56-62页 |
| 附录 A 叶片NDA提取方法及试剂配方 | 第56-57页 |
| 1 )CTAB法提取玉米叶片DNA | 第56页 |
| 2 )1.67%CTAB配方 | 第56-57页 |
| 附录 B 碱煮法提取玉米籽粒胚乳DNA | 第57页 |
| 附录 C PCR反应体系和反应程序 | 第57页 |
| 附录 D EMS诱变 | 第57-58页 |
| 附录 E 琼脂糖凝胶电泳 | 第58-59页 |
| 附录 F 聚丙烯酰胺凝胶电泳 | 第59-62页 |
| 1 )试剂与配方 | 第59-60页 |
| 2 )胶板处理 | 第60页 |
| 3 )灌胶步骤 | 第60页 |
| 4 )电泳步骤 | 第60-61页 |
| 5 )银染步骤(碱性法) | 第61-62页 |
| 致谢 | 第62页 |
