| 摘要 | 第4-6页 |
| ABSTRACT | 第6-7页 |
| 缩写词 | 第11-12页 |
| 1 前言 | 第12-22页 |
| 1.1 棉花和棉花纤维简述 | 第12-15页 |
| 1.1.1 棉花的生长发育过程 | 第12-13页 |
| 1.1.2 棉花纤维的发育 | 第13-15页 |
| 1.2 李氏超短纤维突变体li1的概述 | 第15-17页 |
| 1.2.1 基因LI1的遗传定位 | 第16页 |
| 1.2.2 基因LI1的研究进展 | 第16-17页 |
| 1.3 植物肌动蛋白的研究进展 | 第17-19页 |
| 1.3.1 肌动蛋白细胞骨架调控植物细胞的生长 | 第18页 |
| 1.3.2 棉花肌动蛋白基因的研究现状 | 第18-19页 |
| 1.4 立题依据 | 第19-22页 |
| 2 材料与方法 | 第22-34页 |
| 2.1 实验材料 | 第22页 |
| 2.1.1 植物材料 | 第22页 |
| 2.1.2 载体与菌种 | 第22页 |
| 2.2 常用生物学网站及实验软件 | 第22-23页 |
| 2.3 实验仪器及试剂 | 第23页 |
| 2.4 实验所用的引物 | 第23页 |
| 2.5 溶液和培养基的配制 | 第23-24页 |
| 2.6 实验方法 | 第24-34页 |
| 2.6.1 图位克隆技术 | 第24-27页 |
| 2.6.2 棉花RNA的提取及cDNA的合成 | 第27-28页 |
| 2.6.3 荧光定量PCR | 第28-29页 |
| 2.6.4 载体构建 | 第29-32页 |
| 2.6.5 VIGS技术 | 第32-33页 |
| 2.6.6 转基因烟草GUS组织化学染色 | 第33页 |
| 2.6.7 拟南芥的花序侵染法 | 第33-34页 |
| 3 实验结果 | 第34-48页 |
| 3.1 LI1基因精细定位 | 第34-35页 |
| 3.1.1 性状调查及遗传分析 | 第34页 |
| 3.1.2 多态性引物在F2群体的基因型分析 | 第34-35页 |
| 3.1.3 连锁图谱的构建 | 第35页 |
| 3.2 LI1基因的克隆与分析 | 第35-40页 |
| 3.2.1 RNA的提取结果 | 第35-36页 |
| 3.2.2 基因序列分析 | 第36-37页 |
| 3.2.3 基因同源序列及其蛋白分析 | 第37-40页 |
| 3.2.4 基因的表达量分析 | 第40页 |
| 3.3 利用VIGS技术验证LI1基因功能 | 第40-41页 |
| 3.3.1 VIGS载体构建 | 第40-41页 |
| 3.3.2 获得棉花沉默LI1基因植株 | 第41页 |
| 3.4 LI1基因启动子序列及功能分析 | 第41-45页 |
| 3.4.1 LI1-PRI101和3-79-PRI101启动子载体构建 | 第41-42页 |
| 3.4.2 LI1基因启动子序列分析 | 第42-44页 |
| 3.4.3 LI1启动子缺失片段载体的构建 | 第44页 |
| 3.4.4 烟草GUS组织化学染色 | 第44-45页 |
| 3.5 超表达载体pBI121-LI1的构建 | 第45页 |
| 3.6 CRISPR/Cas9系统植物表达载体的构建 | 第45-46页 |
| 3.7 LI1基因酵母双杂交诱饵载体的构建 | 第46页 |
| 3.8 瞬时表达载体的构建 | 第46-48页 |
| 4 讨论 | 第48-54页 |
| 4.1 图位克隆 | 第48-49页 |
| 4.2 LI1基因的克隆与分析 | 第49-50页 |
| 4.3 利用VIGS技术研究LI1基因的功能 | 第50-51页 |
| 4.4 LI1基因启动子序列及功能分析 | 第51-52页 |
| 4.5 LI1载体的构建 | 第52-54页 |
| 5 结论 | 第54-56页 |
| 参考文献 | 第56-60页 |
| 附录 | 第60-64页 |
| 致谢 | 第64-65页 |