摘要 | 第7-9页 |
ABSTRACT | 第9-10页 |
缩略词表 | 第11-13页 |
1 前言 | 第13-21页 |
1.1 研究问题的由来 | 第13-14页 |
1.2 文献综述 | 第14-20页 |
1.2.1 鸡睾丸的发育及作用 | 第14-15页 |
1.2.2 参与睾丸发育的miRNA | 第15-16页 |
1.2.3 miRNA-2954在鸡(鸟类)中的相关研究 | 第16-17页 |
1.2.4 FOXD1基因的介绍 | 第17页 |
1.2.5 FOXD1基因的功能研究 | 第17-19页 |
1.2.6 YY1基因的介绍 | 第19页 |
1.2.7 YY1基因的功能 | 第19-20页 |
1.3 目的与意义 | 第20-21页 |
2 试验材料与方法 | 第21-36页 |
2.1 试验材料 | 第21页 |
2.2 主要仪器、试剂和溶液配制 | 第21-27页 |
2.2.1 主要仪器与设备 | 第21-22页 |
2.2.2 主要试剂和试剂盒 | 第22-24页 |
2.2.3 溶液配制 | 第24-26页 |
2.2.4 生物信息学分析相关的软件和数据库 | 第26-27页 |
2.3 试验方法 | 第27-36页 |
2.3.1 鸡胚样品采集及处理 | 第27页 |
2.3.2 性腺性别鉴定 | 第27-28页 |
2.3.3 组织/细胞总RNA提取 | 第28-29页 |
2.3.4 时间、组织表达谱分析 | 第29-31页 |
2.3.5 FOXD1的组织定位 | 第31-32页 |
2.3.6 细胞培养 | 第32-36页 |
3 结果与分析 | 第36-47页 |
3.1 FOXD1在鸡中的表达谱分析 | 第36-38页 |
3.1.1 成年鸡组织和胚胎组织RNA提取结果 | 第36-37页 |
3.1.2 FOXD1引物的扩增结果 | 第37页 |
3.1.3 FOXD1的组织表达谱和胚胎期时间表达谱 | 第37-38页 |
3.2 FOXD1在鸡睾丸中的组织细胞表达定位 | 第38-40页 |
3.3 鸡支持细胞的培养及鉴定 | 第40-43页 |
3.3.1 鸡支持细胞的培养 | 第40-41页 |
3.3.2 鸡支持细胞的鉴定 | 第41-42页 |
3.3.3 FOXD1在鸡支持细胞中的表达 | 第42-43页 |
3.4 miRNA-2954与靶基因及下游相关基因的调控分析 | 第43-47页 |
3.4.1 miRNA-2954的超表达及抑制 | 第43-44页 |
3.4.2 支持细胞中FOXD1的抑制 | 第44-45页 |
3.4.3 支持细胞中YY1的抑制 | 第45-47页 |
4 讨论 | 第47-53页 |
4.1 鸡支持细胞的分离及培养 | 第47-48页 |
4.2 FOXD1在鸡胚中的表达及功能 | 第48-50页 |
4.2.1 雄性高表达模式 | 第48-49页 |
4.2.2 FOXD1的细胞定位 | 第49-50页 |
4.3 miRNA-2954与靶基因、性腺发育相关基因的调控关系 | 第50-53页 |
4.3.1 miRNA-2954与FOXD1、YY1的调控关系 | 第50页 |
4.3.2 miRNA-2954与FOXD1、YY1及其它基因的调控关系 | 第50-53页 |
5 小结 | 第53-54页 |
5.1 本研究得到的结果 | 第53页 |
5.2 本研究中的创新点 | 第53页 |
5.3 下一步需要探讨的问题 | 第53-54页 |
参考文献 | 第54-60页 |
致谢 | 第60页 |