| 摘要 | 第4-5页 |
| Abstract | 第5-6页 |
| 1 文献综述 | 第10-18页 |
| 1.1 珊瑚与珊瑚礁 | 第10页 |
| 1.2 珊瑚钙化的研究进展 | 第10-11页 |
| 1.3 钙化相关基因的研究进展 | 第11-14页 |
| 1.3.1 钙调素类似蛋白 | 第11-12页 |
| 1.3.2 钙网蛋白 | 第12-13页 |
| 1.3.3 碳酸酐酶 | 第13-14页 |
| 1.3.4 其它钙化相关基因 | 第14页 |
| 1.4 环境因子对珊瑚钙化的影响 | 第14-16页 |
| 1.4.1 光照 | 第14-15页 |
| 1.4.2 温度 | 第15页 |
| 1.4.3 海洋酸化 | 第15-16页 |
| 1.4.4 水体中的钙浓度 | 第16页 |
| 1.4.5 异养摄食 | 第16页 |
| 1.4.6 珊瑚疾病 | 第16页 |
| 1.5 本研究的目的和意义 | 第16-18页 |
| 2 钙调素类似蛋白基因的克隆和表达分析 | 第18-32页 |
| 2.1 材料与试剂 | 第18-19页 |
| 2.1.1 实验材料采集及培养条件 | 第18页 |
| 2.1.2 主要仪器设备 | 第18-19页 |
| 2.1.3 主要试剂及溶液配方 | 第19页 |
| 2.2 实验方法 | 第19-25页 |
| 2.2.1 RNA提取 | 第19-20页 |
| 2.2.2 反转录PCR用于CaLP基因片段扩增 | 第20页 |
| 2.2.3 用于RACE反应的反转录PCR | 第20-21页 |
| 2.2.4 PCR扩增 | 第21-23页 |
| 2.2.5 生物信息学分析 | 第23页 |
| 2.2.6 重组表达质粒的构建与表达 | 第23-24页 |
| 2.2.7 重组蛋白表达条件的优化 | 第24页 |
| 2.2.8 重组蛋白的纯化 | 第24页 |
| 2.2.9 实时荧光定量PCR | 第24-25页 |
| 2.2.10 数据分析 | 第25页 |
| 2.3 结果与分析 | 第25-30页 |
| 2.3.1 稀杯盔形珊瑚CaLP基因序列分析 | 第25-27页 |
| 2.3.2 gaCaLP多序列比对 | 第27-28页 |
| 2.3.3 原核表达及优化 | 第28-29页 |
| 2.3.4 gaCaLP在异搏定处理下的转录水平 | 第29页 |
| 2.3.5 不同温度胁迫下gaCaLP的表达水平 | 第29-30页 |
| 2.4 讨论 | 第30-32页 |
| 3 稀杯盔形珊瑚钙网蛋白基因的克隆及原核表达 | 第32-40页 |
| 3.1 材料与方法 | 第32-33页 |
| 3.1.1 材料、试剂及设备 | 第32页 |
| 3.1.2 RNA提取及反转录 | 第32页 |
| 3.1.3 基因的克隆 | 第32-33页 |
| 3.1.4 生物信息学分析 | 第33页 |
| 3.1.5 重组表达质粒的构建与表达 | 第33页 |
| 3.2 重组蛋白对细菌凝集作用的影响 | 第33页 |
| 3.3 结果与分析 | 第33-38页 |
| 3.3.1 gaCRT基因的克隆和氨基酸序列特征分析 | 第33-35页 |
| 3.3.2 gaCRT氨基酸序列同源性分析和进化树构建 | 第35-37页 |
| 3.3.4 gaCRT原核表达 | 第37-38页 |
| 3.3.5 gaCRT对细菌凝集的促进作用 | 第38页 |
| 3.4 讨论 | 第38-40页 |
| 4 稀杯盔形珊瑚碳酸酐酶基因的克隆及原核表达 | 第40-48页 |
| 4.1 材料与方法 | 第40-41页 |
| 4.1.1 材料、试剂及设备 | 第40页 |
| 4.1.2 RNA提取及反转录 | 第40页 |
| 4.1.3 基因的克隆 | 第40-41页 |
| 4.1.4 生物信息学分析 | 第41页 |
| 4.1.5 重组表达质粒的构建与表达 | 第41页 |
| 4.1.6 重组蛋白表达条件的优化 | 第41页 |
| 4.2 结果与分析 | 第41-46页 |
| 4.2.1 稀杯盔形珊瑚gaCA基因结构分析 | 第41-42页 |
| 4.2.2 gaCA氨基酸理化性质分析 | 第42-43页 |
| 4.2.3 gaCA多序列比对 | 第43-45页 |
| 4.2.4 大肠杆菌的诱导表达 | 第45-46页 |
| 4.3 讨论 | 第46-48页 |
| 5 结论 | 第48-49页 |
| 5.1 稀杯盔形珊瑚钙调素类似蛋白基因gaCaLP的克隆及表达分析 | 第48页 |
| 5.2 稀杯盔形珊瑚钙网蛋白基因gaCRT的克隆及原核表达 | 第48页 |
| 5.3 稀杯盔形珊瑚碳酸酐酶基因gaCA的克隆及原核表达 | 第48-49页 |
| 参考文献 | 第49-59页 |
| 致谢 | 第59-60页 |
| 作者简介 | 第60-61页 |
| 导师简介 | 第61页 |
