摘要 | 第3-5页 |
Abstract | 第5-6页 |
缩略词汇表 | 第11-12页 |
第1章 综述 | 第12-20页 |
1.1 植物GRAS转录因子研究概述 | 第12-14页 |
1.2 DELLA亚家族研究进展 | 第14-17页 |
1.2.1 DELLA蛋白的结构特点 | 第14页 |
1.2.2 DELLA蛋白在GA信号传导途径中的功能 | 第14-15页 |
1.2.3 DELLA蛋白参与植物次生代谢信号途径 | 第15-17页 |
1.3 丹参研究进展 | 第17-19页 |
1.3.1 丹参概况 | 第17页 |
1.3.2 丹参次生代谢产物研究进展 | 第17-19页 |
1.4 本研究的目的及意义 | 第19-20页 |
第2章 丹参GRAS基因家族成员鉴定及表达模式分析 | 第20-40页 |
2.1 实验材料、试剂 | 第20-21页 |
2.1.1 实验材料及处理方法 | 第20页 |
2.1.2 试剂与药品 | 第20-21页 |
2.1.3 实验仪器 | 第21页 |
2.2 丹参GRAS基因家族成员的鉴定 | 第21页 |
2.3 丹参GRAS基因家族成员序列分析 | 第21-22页 |
2.4 丹参GRAS基因家族成员的表达模式分析 | 第22-25页 |
2.4.1 RNA提取及质量检测 | 第22页 |
2.4.2 实时荧光定量PCR(qRT-PCR) | 第22-25页 |
2.5 结果与分析 | 第25-37页 |
2.5.1 丹参GRAS基因的查找和鉴定 | 第25-27页 |
2.5.2 丹参GRAS基因家族的系统进化分析 | 第27页 |
2.5.3 丹参GRAS基因结构分析 | 第27-29页 |
2.5.4 丹参GRAS基因家族保守基序分析 | 第29-30页 |
2.5.5 丹参GRAS基因家族成员启动子序列分析 | 第30-32页 |
2.5.6 丹参GRAS基因家族成员在不同组织和不同非生物胁迫下的表达模式分析 | 第32-37页 |
2.6 讨论 | 第37-40页 |
第3章 丹参SmDELLA蛋白的核定位研究 | 第40-52页 |
3.1 材料与试剂 | 第40-42页 |
3.1.1 实验材料 | 第40页 |
3.1.2 菌株与载体 | 第40页 |
3.1.3 试剂与药品 | 第40-42页 |
3.1.4 实验仪器 | 第42页 |
3.2 实验方法 | 第42-46页 |
3.2.1 丹参总RNA提取及cDNA的合成 | 第42-43页 |
3.2.2 丹参SmDELLA基因片段的分离及克隆 | 第43-44页 |
3.2.3 入门载体pDONR207的构建 | 第44-45页 |
3.2.4 亚细胞定位表达载体的构建 | 第45-46页 |
3.2.5 SmDELLA蛋白的核定位分析 | 第46页 |
3.3 结果及分析 | 第46-49页 |
3.3.1 SmDELLA基因序列全长的获得 | 第46-47页 |
3.3.2 入门载体pDONR207的构建 | 第47-48页 |
3.3.3 核定位表达载体的构建 | 第48-49页 |
3.3.4 丹参SmDELLA蛋白的核定位研究 | 第49页 |
3.4 讨论 | 第49-52页 |
第4章 丹参SmDELLA1蛋白的互作蛋白研究 | 第52-60页 |
4.1 材料与试剂 | 第52页 |
4.1.1 实验材料 | 第52页 |
4.1.2 试剂与药品 | 第52页 |
4.1.3 实验仪器 | 第52页 |
4.2 实验方法 | 第52-54页 |
4.2.1 酵母双杂交载体构建 | 第52-53页 |
4.2.2 诱饵质粒毒性检测 | 第53页 |
4.2.3 诱饵质粒自激活检测 | 第53-54页 |
4.2.4 丹参SmDELLA1蛋白的互作蛋白研究 | 第54页 |
4.3 实验结果及分析 | 第54-59页 |
4.3.1 酵母双杂交载体构建 | 第54-55页 |
4.3.2 诱饵质粒毒性检测 | 第55-56页 |
4.3.3 诱饵质粒自激活检测 | 第56-57页 |
4.3.4 探究SmDELLA1蛋白的互作蛋白 | 第57-59页 |
4.4 讨论 | 第59-60页 |
第5章 SmDELLA基因对丹参次生代谢产物的调控研究 | 第60-72页 |
5.1 实验材料、试剂 | 第60-61页 |
5.1.1 实验材料 | 第60页 |
5.1.2 菌株与质粒 | 第60页 |
5.1.3 试剂与药品 | 第60-61页 |
5.1.4 实验仪器 | 第61页 |
5.2 实验方法 | 第61-66页 |
5.2.1 丹参SmDELLA基因干涉载体的构建 | 第61-63页 |
5.2.2 农杆菌介导的叶盘转化法转化丹参 | 第63页 |
5.2.3 转基因株系分子水平检测 | 第63-64页 |
5.2.4 丹参转基因株系总酚酸、总黄酮含量的测定 | 第64-66页 |
5.3 实验结果 | 第66-70页 |
5.3.1 SmDELLA基因干涉载体的构建及转基因丹参的获得 | 第66-67页 |
5.3.2 转基因株系分子水平的检测 | 第67-69页 |
5.3.3 丹参SmDELLA基因干涉株系总酚酸、总黄酮含量测定 | 第69-70页 |
5.4 讨论 | 第70-72页 |
第6章 结论与展望 | 第72-74页 |
6.1 结论 | 第72-73页 |
6.2 展望 | 第73-74页 |
参考文献 | 第74-84页 |
附录 | 第84-92页 |
致谢 | 第92-94页 |
攻读硕士学位期间研究成果 | 第94页 |