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丹参GRAS转录因子家族鉴定及DELLA亚家族基因功能研究

摘要第3-5页
Abstract第5-6页
缩略词汇表第11-12页
第1章 综述第12-20页
    1.1 植物GRAS转录因子研究概述第12-14页
    1.2 DELLA亚家族研究进展第14-17页
        1.2.1 DELLA蛋白的结构特点第14页
        1.2.2 DELLA蛋白在GA信号传导途径中的功能第14-15页
        1.2.3 DELLA蛋白参与植物次生代谢信号途径第15-17页
    1.3 丹参研究进展第17-19页
        1.3.1 丹参概况第17页
        1.3.2 丹参次生代谢产物研究进展第17-19页
    1.4 本研究的目的及意义第19-20页
第2章 丹参GRAS基因家族成员鉴定及表达模式分析第20-40页
    2.1 实验材料、试剂第20-21页
        2.1.1 实验材料及处理方法第20页
        2.1.2 试剂与药品第20-21页
        2.1.3 实验仪器第21页
    2.2 丹参GRAS基因家族成员的鉴定第21页
    2.3 丹参GRAS基因家族成员序列分析第21-22页
    2.4 丹参GRAS基因家族成员的表达模式分析第22-25页
        2.4.1 RNA提取及质量检测第22页
        2.4.2 实时荧光定量PCR(qRT-PCR)第22-25页
    2.5 结果与分析第25-37页
        2.5.1 丹参GRAS基因的查找和鉴定第25-27页
        2.5.2 丹参GRAS基因家族的系统进化分析第27页
        2.5.3 丹参GRAS基因结构分析第27-29页
        2.5.4 丹参GRAS基因家族保守基序分析第29-30页
        2.5.5 丹参GRAS基因家族成员启动子序列分析第30-32页
        2.5.6 丹参GRAS基因家族成员在不同组织和不同非生物胁迫下的表达模式分析第32-37页
    2.6 讨论第37-40页
第3章 丹参SmDELLA蛋白的核定位研究第40-52页
    3.1 材料与试剂第40-42页
        3.1.1 实验材料第40页
        3.1.2 菌株与载体第40页
        3.1.3 试剂与药品第40-42页
        3.1.4 实验仪器第42页
    3.2 实验方法第42-46页
        3.2.1 丹参总RNA提取及cDNA的合成第42-43页
        3.2.2 丹参SmDELLA基因片段的分离及克隆第43-44页
        3.2.3 入门载体pDONR207的构建第44-45页
        3.2.4 亚细胞定位表达载体的构建第45-46页
        3.2.5 SmDELLA蛋白的核定位分析第46页
    3.3 结果及分析第46-49页
        3.3.1 SmDELLA基因序列全长的获得第46-47页
        3.3.2 入门载体pDONR207的构建第47-48页
        3.3.3 核定位表达载体的构建第48-49页
        3.3.4 丹参SmDELLA蛋白的核定位研究第49页
    3.4 讨论第49-52页
第4章 丹参SmDELLA1蛋白的互作蛋白研究第52-60页
    4.1 材料与试剂第52页
        4.1.1 实验材料第52页
        4.1.2 试剂与药品第52页
        4.1.3 实验仪器第52页
    4.2 实验方法第52-54页
        4.2.1 酵母双杂交载体构建第52-53页
        4.2.2 诱饵质粒毒性检测第53页
        4.2.3 诱饵质粒自激活检测第53-54页
        4.2.4 丹参SmDELLA1蛋白的互作蛋白研究第54页
    4.3 实验结果及分析第54-59页
        4.3.1 酵母双杂交载体构建第54-55页
        4.3.2 诱饵质粒毒性检测第55-56页
        4.3.3 诱饵质粒自激活检测第56-57页
        4.3.4 探究SmDELLA1蛋白的互作蛋白第57-59页
    4.4 讨论第59-60页
第5章 SmDELLA基因对丹参次生代谢产物的调控研究第60-72页
    5.1 实验材料、试剂第60-61页
        5.1.1 实验材料第60页
        5.1.2 菌株与质粒第60页
        5.1.3 试剂与药品第60-61页
        5.1.4 实验仪器第61页
    5.2 实验方法第61-66页
        5.2.1 丹参SmDELLA基因干涉载体的构建第61-63页
        5.2.2 农杆菌介导的叶盘转化法转化丹参第63页
        5.2.3 转基因株系分子水平检测第63-64页
        5.2.4 丹参转基因株系总酚酸、总黄酮含量的测定第64-66页
    5.3 实验结果第66-70页
        5.3.1 SmDELLA基因干涉载体的构建及转基因丹参的获得第66-67页
        5.3.2 转基因株系分子水平的检测第67-69页
        5.3.3 丹参SmDELLA基因干涉株系总酚酸、总黄酮含量测定第69-70页
    5.4 讨论第70-72页
第6章 结论与展望第72-74页
    6.1 结论第72-73页
    6.2 展望第73-74页
参考文献第74-84页
附录第84-92页
致谢第92-94页
攻读硕士学位期间研究成果第94页

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