中文摘要 | 第3-5页 |
Abstract | 第5-6页 |
第一章 前言 | 第9-15页 |
1.椎间盘结构 | 第9页 |
2.椎间盘退变及病因 | 第9-11页 |
3.椎间盘退变的治疗策略 | 第11-13页 |
4.基于UCMSCs治疗的旁分泌机制 | 第13页 |
5.本课题的研究思路 | 第13-15页 |
第二章 退变椎间盘组织髓核干/祖细胞与脐带来源间充质干细胞生物学特性的比较 | 第15-29页 |
1.引言 | 第15页 |
2.实验材料 | 第15-19页 |
2.1 实验样本 | 第15-16页 |
2.2 实验试剂 | 第16-17页 |
2.3 实验仪器及耗材 | 第17-18页 |
2.4 试剂配制 | 第18-19页 |
3.实验方法 | 第19-24页 |
3.1 间充质干细胞的分离与培养 | 第19-21页 |
3.2 细胞形态学观察 | 第21页 |
3.3 流式细胞术检测细胞表面抗原分子的表达 | 第21页 |
3.4 间充质干细胞向成骨、成脂、成软骨分化 | 第21-23页 |
3.5 间充质干细胞的冻存与复苏 | 第23-24页 |
4.数据分析 | 第24页 |
5.实验结果 | 第24-27页 |
5.1 D-NPMSCs和UCMSCs的形态学观察比较 | 第24页 |
5.2 流式细胞术检测D-NPMSCs与UCMSCs细胞表面标志物及差异比较 | 第24-25页 |
5.3 D-NPMSCs与UCMSCs向成骨、成脂、成软骨多向分化潜能比较 | 第25-27页 |
6.讨论 | 第27-28页 |
7.小结 | 第28-29页 |
第三章 UCMSCs-CM对退变椎间盘髓核来源干/祖细胞再生能力的影响 | 第29-58页 |
1.引言 | 第29-30页 |
2.实验材料 | 第30-33页 |
2.1 实验试剂 | 第30-31页 |
2.2 主要实验仪器及耗材 | 第31-33页 |
2.3 引物序列 | 第33页 |
3.实验方法 | 第33-44页 |
3.1 脐带间充质干细胞条件培养基的收集 | 第33-34页 |
3.2 脐带间充质干细胞条件培养基作用浓度的筛选 | 第34页 |
3.3 CM作用后D-NPMSCs的形态学观察 | 第34页 |
3.4 流式细胞术评估CM作用后D-NPMSCs的表面抗原的表达 | 第34-35页 |
3.5 CCK8法检测CM作用后D-NPMSCs的细胞活性 | 第35页 |
3.6 生长曲线评估CM作用后D-NPMSCs的生长趋势 | 第35-36页 |
3.7 EdU实验评估CM作用后D-NPMSCs的增殖能力 | 第36-37页 |
3.8 流式细胞术检测CM作用后D-NPMSCs的细胞周期变化 | 第37页 |
3.9 流式细胞术检测CM作用后D-NPMSCs的细胞凋亡变化 | 第37-38页 |
3.10 细胞特异性化学染色评估CM作用后D-NPMSCs的多向分化潜能 | 第38-39页 |
3.11 qRT-PCR检测CM作用后D-NPMSCs相关基因的表达 | 第39-41页 |
3.12 western blot检测ERK蛋白的变化 | 第41-44页 |
4.数据分析 | 第44页 |
5.实验结果 | 第44-55页 |
5.1 UCMSCs-CM作用浓度结果分析 | 第44-45页 |
5.2 UCMSCs-CM作用后D-NPMSCs的形态学变化 | 第45-46页 |
5.3 UCMSCs-CM上调了D-NPMSCs的MSC表面抗原的表达 | 第46-48页 |
5.4 UCMSCs-CM促进了D-NPMSCs的增殖能力 | 第48-51页 |
5.5 UCMSCs-CM改善了D-NPMSCs的多向分化潜能 | 第51-52页 |
5.6 UCMSCs-CM提高了D-NPMSCs的多能干细胞基因的表达 | 第52-53页 |
5.7 UCMSCs-CM改变了NP相关的特别标志物的表达 | 第53-54页 |
5.8 UCMSCs-CM抑制了ERK的磷酸化 | 第54-55页 |
6.讨论 | 第55-56页 |
7.小结 | 第56-58页 |
全文总结 | 第58-60页 |
1.文中主要小结 | 第58页 |
1.1 人退变椎间盘组织髓核干/祖细胞与脐带来源间充质干细胞生物学特性的比较 | 第58页 |
1.2 UCMSCs-CM对退变椎间盘髓核来源干/祖细胞的再生能力的影响 | 第58页 |
2.本课题的特色和创新 | 第58-59页 |
3.实验欠缺与不足 | 第59-60页 |
参考文献 | 第60-66页 |
中英文缩写词 | 第66-68页 |
在校期间发表论文 | 第68-69页 |
致谢 | 第69页 |