前言 | 第4-6页 |
中文摘要 | 第6-8页 |
Abstract | 第8-10页 |
英文缩略词 | 第13-14页 |
第1章 文献综述 | 第14-20页 |
1.1 Lhx8基因的结构 | 第14-15页 |
1.2 Lhx8在神经系统发育分化过程中发挥的作用 | 第15-16页 |
1.3 Arx基因的结构 | 第16页 |
1.4 Arx在神经系统发育分化过程中发挥的作用 | 第16-17页 |
1.5 慢病毒载体系统 | 第17-18页 |
1.6 四环素调控表达系统 | 第18-19页 |
1.7 慢病毒载体系统在中枢神经系统研究及神经性疾病中的应用 | 第19-20页 |
第2章 材料与方法 | 第20-39页 |
2.1 实验试剂 | 第20-21页 |
2.2 实验仪器 | 第21-22页 |
2.3 实验细胞及动物 | 第22页 |
2.3.1 实验细胞 | 第22页 |
2.3.2 实验动物 | 第22页 |
2.4 实验试剂配制 | 第22-23页 |
2.5 实验方法 | 第23-38页 |
2.5.1 293T细胞的培养 | 第23-24页 |
2.5.2 质粒提取与鉴定 | 第24-27页 |
2.5.3 慢病毒载体的包装 | 第27-28页 |
2.5.4 EMSA技术检测Lhx8蛋白与Arx基因的相互关系 | 第28-32页 |
2.5.5 新生大鼠侧脑室定位注射 | 第32-33页 |
2.5.6 RT-PCR技术检测慢病毒注射后海马Arx、Lhx8、CHAT及GAD65m RNA表达水平 | 第33-35页 |
2.5.7 Western Blot检测慢病毒注射后海马Lhx8、CHAT及GAD65蛋白表达水平 | 第35-36页 |
2.5.8 免疫荧光染色检测慢病毒注射后海马Lhx8、CHAT及GAD65蛋白表达水平 | 第36-38页 |
2.6 图像处理与统计学分析 | 第38-39页 |
第3章 实验结果 | 第39-58页 |
3.1 质粒的扩增及鉴定 | 第39-41页 |
3.1.1 包装质粒p LP1、p LP2及p LP/VSVG的酶切鉴定 | 第39-40页 |
3.1.2 载体质粒p LVX-Tight-IRES-Zs Green-Neo、pLVX-Tight-r Lhx8-IRES-Zs Green-Neo及调控质粒pLVX-Tet-On-Puro的酶切鉴定 | 第40-41页 |
3.2 载体质粒p LVX - Tight - Arxsh RNA- IRES - Zs Green-Neo、p LVX-Tight- r Lhx8-Arxsh RNA-IRES-Zs Green-Neo的构建及鉴定 | 第41-42页 |
3.3 慢病毒包装及效率检测 | 第42-44页 |
3.4 EMSA实验探针标记及结合反应 | 第44-45页 |
3.5 新生大鼠侧脑室定位注射 | 第45页 |
3.6 RT-PCR检测各组海马Arx、Lhx8、CHAT及GAD65的表达水平 | 第45-49页 |
3.7 Western Blot检测各组海马Lhx8、CHAT及GAD65的表达水平 | 第49-53页 |
3.8 免疫荧光染色检测各组海马Lhx8、CHAT及GAD65的表达水平 | 第53-58页 |
第4章 讨论 | 第58-62页 |
第5章 结论 | 第62-63页 |
参考文献 | 第63-70页 |
作者简介 | 第70-71页 |
致谢 | 第71页 |