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基于牛和马鼻咽部的RNA-seq揭示其感染口蹄疫病毒的机制

摘要第2-5页
abstract第5-7页
缩略语表第15-17页
1 引言第17-43页
    1.1 口蹄疫概述及研究现状第17-31页
        1.1.1 口蹄疫的宿主范围第18-20页
        1.1.2 口蹄疫的传播途径第20-21页
        1.1.3 口蹄疫的主要感染部位第21-22页
        1.1.4 口蹄疫病毒的清除及携带第22-23页
        1.1.5 口蹄疫的潜伏期第23页
        1.1.6 口蹄疫的临床症状第23-24页
        1.1.7 牛的口蹄疫发病阶段(发病机理)第24-31页
    1.2 口蹄疫病毒第31-39页
        1.2.1 口蹄疫病毒基因组结构第31-38页
        1.2.2 口蹄疫病毒的复制过程第38-39页
    1.3 转录组测序技术第39-42页
    1.4 本研究的目的意义、主要内容及创新点第42-43页
        1.4.1 研究目的与意义、主要内容第42-43页
        1.4.2 创新点第43页
2 整联素受体在牛和马鼻咽部的表达研究第43-47页
    2.1 试验材料与方法第43-44页
        2.1.1 试验材料第43页
        2.1.2 主要仪器与试剂第43页
        2.1.3 制作冰冻切片第43页
        2.1.4 免疫组化方法第43-44页
        2.1.5 显微镜观察第44页
    2.2 整联素受体在牛和马的鼻咽部的表达情况第44-45页
    2.3 讨论第45-46页
    2.4 小结第46-47页
3 牛鼻咽部感染口蹄疫病毒前后mRNA和LncRNA数据与易感机制分析第47-70页
    3.1 试验材料第47页
        3.1.1 试验动物样品第47页
        3.1.2 病毒第47页
    3.2 方法第47-52页
        3.2.1 试验样品的采集第47页
        3.2.2 口蹄疫病毒感染组织第47页
        3.2.3 总RNA的提取第47-48页
        3.2.4 RNA质检、文库制备和测序第48-49页
        3.2.5 生物信息分析流程第49-52页
    3.3 结果第52-66页
        3.3.1 RNA提取及质检第52-53页
        3.3.2 数据产出汇总第53-54页
        3.3.3 Reads与参考基因组的比对第54-55页
        3.3.4 Reads在染色体上的密度分布第55页
        3.3.5 LncRNA筛选结果第55-58页
        3.3.6 转录本定量分析第58-59页
        3.3.7 差异表达分析第59-60页
        3.3.8 差异表达基因GO功能富集分析第60-61页
        3.3.9 KEGG富集分析结果第61-64页
        3.3.10 牛鼻咽部组织感染口蹄疫病毒后与致病性相关的信号通路基因表达分析第64-66页
    3.4 讨论第66-69页
    3.5 小结第69-70页
4 马鼻咽部感染口蹄疫病毒前后mRNA和LncRNA数据与抗病毒机制分析第70-87页
    4.1 试验材料第70页
        4.1.1 试验动物样品第70页
        4.1.2 病毒第70页
    4.2 方法第70-71页
        4.2.1 试验样品的采集第70页
        4.2.2 口蹄疫病毒感染组织第70页
        4.2.3 总RNA提取第70页
        4.2.4 RNA质检、文库制备和测序第70页
        4.2.5 生物信息分析流程第70-71页
    4.3 结果第71-86页
        4.3.1 RNA提取及质检第71页
        4.3.2 数据产出汇总第71-72页
        4.3.3 Reads与参考基因组的比对第72-73页
        4.3.4 Reads在染色体上的密度分布第73页
        4.3.5 LncRNA筛选结果第73-75页
        4.3.6 转录本定量分析第75-77页
        4.3.7 差异表达分析第77-78页
        4.3.8 差异表达基因GO功能富集分析第78-79页
        4.3.9 KEGG富集分析结果第79-83页
        4.3.10 马鼻咽部组织抗口蹄疫病毒感染的相关信号通路基因表达分析及与牛易感机制的比较第83-86页
    4.4 讨论第86页
    4.5 小结第86-87页
5 牛鼻咽部感染口蹄疫病毒后microRNA表达谱及关联分析第87-104页
    5.1 材料第87页
        5.1.1 试验动物样品第87页
        5.1.2 病毒第87页
    5.2 方法第87-90页
        5.2.1 试验样品的采集第87页
        5.2.2 口蹄疫病毒感染组织第87页
        5.2.3 总RNA提取第87页
        5.2.4 RNA质检、文库制备和测序第87-89页
        5.2.5 生物信息分析流程第89-90页
    5.3 结果第90-97页
        5.3.1 totalRNA质检结果第90页
        5.3.2 测序数据质量评估第90-92页
        5.3.3 测序数据过滤第92页
        5.3.4 sRNA长度筛选结果第92-93页
        5.3.5 sRNA序列比对结果第93-94页
        5.3.6 sRNA分类注释统计结果第94-95页
        5.3.7 miRNA差异表达分析结果第95页
        5.3.8 牛鼻咽部感染口蹄疫病毒后miRNA表达谱分析结果第95-97页
    5.4 讨论第97-103页
    5.5 小结第103-104页
6 马鼻咽部感染口蹄疫病毒后microRNA表达谱及关联分析第104-124页
    6.1 材料第104页
        6.1.1 试验动物样品第104页
        6.1.2 病毒第104页
    6.2 方法第104-105页
        6.2.1 试验样品的采集第104页
        6.2.2 口蹄疫病毒感染组织第104页
        6.2.3 总RNA提取第104页
        6.2.4 RNA质检、文库制备和测序第104页
        6.2.5 生物信息分析流程第104-105页
    6.3 结果第105-113页
        6.3.1 totalRNA质检结果第105页
        6.3.2 测序数据质量评估第105-106页
        6.3.3 测序数据过滤第106-107页
        6.3.4 sRNA长度筛选结果第107-108页
        6.3.5 sRNA序列比对结果第108页
        6.3.6 sRNA分类注释统计结果第108-109页
        6.3.7 miRNA差异表达分析结果第109-110页
        6.3.8 马鼻咽部接触口蹄疫病毒后miRNA表达谱分析结果第110-113页
    6.4 讨论第113-123页
    6.5 小结第123-124页
7 转录组数据表达验证第124-130页
    7.1 材料与方法第124-125页
        7.1.1 实验材料第124页
        7.1.2 实验器材第124页
        7.1.3 RNA提取第124页
        7.1.4 RNA反转录cDNA及检测第124页
        7.1.5 引物设计第124页
        7.1.6 选择引物退火温度Tm第124-125页
        7.1.7 待测基因片段测序第125页
        7.1.8 定量分析第125页
    7.2 结果与分析第125-129页
        7.2.1 反转录结果检测第125-126页
        7.2.2 引物退火温度的选择第126页
        7.2.3 待测基因片段测序结果第126页
        7.2.4 定量PCR结果第126-129页
    7.3 讨论第129页
    7.4 小结第129-130页
8 全文小结第130-131页
9 创新与展望第131-132页
致谢第132-133页
参考文献第133-154页
附录第154-175页
作者简介第175-176页

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