| 摘要 | 第4-6页 |
| Abstract | 第6-7页 |
| 插图和附表清单 | 第13-15页 |
| 缩略词表 | 第15-17页 |
| 第一章 引言 | 第17-42页 |
| 1 胆汁酸的研究概况 | 第17-18页 |
| 1.1 胆汁酸的来源与分类 | 第17页 |
| 1.2 BAs的代谢 | 第17页 |
| 1.3 BAs的生理功能 | 第17-18页 |
| 1.4 与BAs作用相关的受体 | 第18页 |
| 2 TCDCA的研究概况 | 第18-21页 |
| 2.1 TCDCA的理化性质 | 第18页 |
| 2.2 TCDCA的药理学研究概况 | 第18-21页 |
| 2.2.1 TCDCA的药效学研究概况 | 第18-20页 |
| 2.2.2 TCDCA的药动学研究概况 | 第20页 |
| 2.2.3 TCDCA的作用机制 | 第20-21页 |
| 3 GR的研究概况 | 第21-27页 |
| 3.1 糖皮质激素的概况 | 第21-23页 |
| 3.1.1 GCs的来源和分泌调节 | 第22页 |
| 3.1.2 GCs的药理作用 | 第22-23页 |
| 3.2 GCs的作用机制 | 第23-27页 |
| 3.2.1 GCs的抗炎作用机制 | 第23-27页 |
| 3.2.2 GCs的免疫抑制作用机制 | 第27页 |
| 4 分子对接的研究概况 | 第27-29页 |
| 4.1 分子对接的基本原理 | 第27页 |
| 4.2 分子对接方法的分类 | 第27-28页 |
| 4.3 分子对接软件 | 第28-29页 |
| 5 RA的研究概况 | 第29-34页 |
| 5.1 RA发病原因 | 第29-30页 |
| 5.2 成纤维样滑膜细胞在RA中的作用 | 第30页 |
| 5.3 免疫细胞在RA中的作用 | 第30-32页 |
| 5.4 ICAM-1在RA中的作用 | 第32页 |
| 5.5 RA的治疗 | 第32-34页 |
| 5.5.1 西医对RA的治疗 | 第32-33页 |
| 5.5.2 中医对RA的治疗 | 第33-34页 |
| 5.5.3 其他治疗方法 | 第34页 |
| 5.6 RA动物模型 | 第34页 |
| 6 细胞凋亡的研究概况 | 第34-40页 |
| 6.1 细胞凋亡发生的过程 | 第35页 |
| 6.2 细胞凋亡的分子机制 | 第35-38页 |
| 6.2.1 细胞凋亡相关基因 | 第35-36页 |
| 6.2.2 Fas与FasL在凋亡中的作用 | 第36页 |
| 6.2.3 Caspases依赖性的细胞凋亡 | 第36-38页 |
| 6.2.4 非Caspases依赖性的细胞凋亡 | 第38页 |
| 6.2.5 内质网介导的细胞凋亡信号转导途径 | 第38页 |
| 6.3 常用细胞凋亡的检测方法 | 第38-39页 |
| 6.3.1 细胞和亚细胞水平的形态学检测 | 第38页 |
| 6.3.2 DNA Ladder | 第38页 |
| 6.3.3 TUNEL | 第38-39页 |
| 6.3.4 Annexin V/PI | 第39页 |
| 6.3.5 检测Caspases活性 | 第39页 |
| 6.4 细胞凋亡与RA | 第39-40页 |
| 7 本研究的目的及意义 | 第40-42页 |
| 第二章 TCDCA与GR相互作用的研究 | 第42-53页 |
| 1 试验材料 | 第42-44页 |
| 1.1 药品与试剂 | 第42页 |
| 1.2 质粒与细胞 | 第42-43页 |
| 1.3 主要仪器设备 | 第43-44页 |
| 2 数据处理和统计分析 | 第44页 |
| 3 试验内容和方法 | 第44-46页 |
| 3.1 TCDCA与GR分子对接研究 | 第44-45页 |
| 3.1.1 准备受体文件 | 第44页 |
| 3.1.2 准备配体文件 | 第44页 |
| 3.1.3 准备Grid文件 | 第44页 |
| 3.1.4 分子对接 | 第44-45页 |
| 3.2 TCDCA对GR移位的观察 | 第45-46页 |
| 3.2.1 重组真核表达质粒pEGFP-C1-GR的构建 | 第45页 |
| 3.2.2 细胞转染 | 第45-46页 |
| 3.3 TCDCA对GR活化的影响 | 第46页 |
| 4 结果 | 第46-50页 |
| 4.1 TCDCA与GR的分子对接 | 第46-47页 |
| 4.2 TCDCA对GR核移位的影响 | 第47-49页 |
| 4.2.1 重组真核表达质粒pEGFP-C1-GR的构建 | 第47-48页 |
| 4.2.2 TCDCA对GR核移位的观察 | 第48-49页 |
| 4.3 TCDCA对GR活化的影响 | 第49-50页 |
| 5 讨论 | 第50-51页 |
| 6 小结 | 第51-53页 |
| 第三章 TCDCA对AP-1及ICAM-1表达与活性的影响 | 第53-75页 |
| 1 试验材料 | 第53-54页 |
| 1.1 药品与试剂 | 第53页 |
| 1.2 试验动物 | 第53页 |
| 1.3 主要仪器设备 | 第53-54页 |
| 2 数据处理和统计分析 | 第54页 |
| 3 试验内容和方法 | 第54-63页 |
| 3.1 细胞培养 | 第54-55页 |
| 3.1.1 AA大鼠模型的建立 | 第54页 |
| 3.1.2 滑膜组织的分离与采集 | 第54页 |
| 3.1.3 成纤维样滑膜细胞的分离培养 | 第54-55页 |
| 3.2 TCDCA对IL-1β刺激下AA大鼠FLS中AP-1蛋白表达的影响 | 第55-59页 |
| 3.2.1 分组与给药 | 第55页 |
| 3.2.2 细胞蛋白提取 | 第55-56页 |
| 3.2.3 蛋白定量 | 第56-57页 |
| 3.2.4 Western blot | 第57-59页 |
| 3.3 TCDCA对IL-1β刺激下AA大鼠FLS中AP-1 DNA结合活性的影响 | 第59-60页 |
| 3.3.1 分组与给药 | 第59页 |
| 3.3.2 细胞核蛋白提取 | 第59-60页 |
| 3.3.3 蛋白定量 | 第60页 |
| 3.3.4 AP-1活性检测 | 第60页 |
| 3.4 TCDCA对IL-1β刺激下AA大鼠FLS中ICAM-1表达的影响 | 第60-63页 |
| 3.4.1 分组与给药 | 第60页 |
| 3.4.2 TCDCA对IL-1β刺激下AA大鼠FLS中ICAM-1 mRNA表达的影响 | 第60-62页 |
| 3.4.3 TCDCA对IL-1β刺激下AA大鼠FLS ICAM-1蛋白表达的影响 | 第62-63页 |
| 4 结果 | 第63-72页 |
| 4.1 AA大鼠模型的建立 | 第63页 |
| 4.2 AA大鼠FLS细胞的培养 | 第63-64页 |
| 4.3 蛋白浓度的测定 | 第64页 |
| 4.4 TCDCA对AP-1表达的影响 | 第64-66页 |
| 4.5 TCDCA对AP-1 DNA结合活性的影响 | 第66-67页 |
| 4.6 TCDCA对ICAM-1表达的影响 | 第67-72页 |
| 4.6.1 TCDCA对ICAM-1基因表达的影响 | 第67-71页 |
| 4.6.2 TCDCA对ICAM-1蛋白表达的影响 | 第71-72页 |
| 5 讨论 | 第72-74页 |
| 5.1 AA大鼠模型的建立及FLS细胞的分离培养 | 第72页 |
| 5.2 TCDCA对FLS细胞中AP-1的影响 | 第72-73页 |
| 5.3 TCDCA对FLS细胞中ICAM-1的影响 | 第73-74页 |
| 6 小结 | 第74-75页 |
| 第四章 TCDCA对AA大鼠FLS细胞凋亡的影响 | 第75-86页 |
| 1 试验材料 | 第75-76页 |
| 1.1 药品与试剂 | 第75页 |
| 1.2 试验动物 | 第75页 |
| 1.3 主要仪器设备 | 第75-76页 |
| 2 数据处理和统计分析 | 第76页 |
| 3 试验内容和方法 | 第76-78页 |
| 3.1 细胞培养 | 第76页 |
| 3.1.1 AA大鼠模型的建立 | 第76页 |
| 3.1.2 滑膜组织的分离、采集 | 第76页 |
| 3.1.3 成纤维样滑膜细胞的分离培养 | 第76页 |
| 3.2 TCDCA对FLS细胞凋亡的影响 | 第76-78页 |
| 3.2.1 分组与给药 | 第76-77页 |
| 3.2.2 TCDCA对FLS细胞凋亡率的影响 | 第77页 |
| 3.2.3 TCDCA对caspase-3、caspase-8 mRNA表达量的影响 | 第77-78页 |
| 3.2.4 TCDCA对Caspase-3、Caspase-8活性的影响 | 第78页 |
| 4 结果 | 第78-84页 |
| 4.1 TCDCA对FLS细胞凋亡率的影响 | 第78-79页 |
| 4.2 TCDCA对FLS细胞中caspase-3、caspase-8基因表达量的影响 | 第79-83页 |
| 4.2.1 总RNA的电泳检测 | 第79页 |
| 4.2.2 β-actin、caspase-3、caspase-8扩增效率曲线情况 | 第79-81页 |
| 4.2.3 β-actin、caspase-3、caspase-8基因qPCR扩增曲线和溶解曲线 | 第81-82页 |
| 4.2.4 PCR产物电泳检测及测序结果 | 第82页 |
| 4.2.5 序列测定 | 第82-83页 |
| 4.2.6 FLS 细胞中 caspase-3、caspase-<9基因的表达量 | 第83页 |
| 4.3 TCDCA对FLS细胞中Caspase-3、Caspase-8活性的影响 | 第83-84页 |
| 5 讨论 | 第84-85页 |
| 6 小结 | 第85-86页 |
| 全文讨论 | 第86-89页 |
| 全文结论 | 第89-90页 |
| 本课题主要创新之处 | 第90-91页 |
| 致谢 | 第91-92页 |
| 参考文献 | 第92-109页 |
| 作者简介 | 第109页 |
