绵羊间充质干细胞系的建立及用作体细胞克隆供体的研究
| 摘要 | 第3-5页 |
| Abstract | 第5-6页 |
| 插图清单 | 第10-12页 |
| 附表清单 | 第12-13页 |
| 缩略语表 | 第13-15页 |
| 1 引言 | 第15-37页 |
| 1.1 间充质干细胞的研究进展 | 第15-23页 |
| 1.1.1 间充质干细胞概述 | 第15-17页 |
| 1.1.2 间充质干细胞的生物学特性 | 第17-19页 |
| 1.1.3 间充质干细胞的多向诱导分化 | 第19-23页 |
| 1.2 间充质干细胞用作体细胞克隆供体的研究进展 | 第23-33页 |
| 1.2.1 哺乳动物体细胞克隆概述 | 第23-29页 |
| 1.2.2 体细胞核移植机理的研究 | 第29-32页 |
| 1.2.3 间充质干细胞用作供体细胞的研究进展 | 第32-33页 |
| 1.3 间充质干细胞的应用及存在问题 | 第33-35页 |
| 1.3.1 间充质干细胞的应用 | 第33-34页 |
| 1.3.2 间充质干细胞研究展望 | 第34-35页 |
| 1.4 本研究的目意义及主要内容 | 第35-37页 |
| 1.4.1 作为基础研究的理想种子细胞 | 第35页 |
| 1.4.2 作为动物体细胞克隆的供体细胞 | 第35页 |
| 1.4.3 主要研究内容 | 第35-37页 |
| 2 绵羊胎儿、幼龄及成年间充质干细胞的分离与培养 | 第37-55页 |
| 2.1 材料与方法 | 第37-44页 |
| 2.1.1 实验材料 | 第37页 |
| 2.1.2 实验试剂 | 第37页 |
| 2.1.3 实验仪器及耗材 | 第37-38页 |
| 2.1.4 实验方法 | 第38-44页 |
| 2.2 实验结果与分析 | 第44-52页 |
| 2.2.1 绵羊MSCs及SFCs体外培养特征 | 第44-48页 |
| 2.2.2 绵羊间充质干细胞的遗传稳定性 | 第48-50页 |
| 2.2.3 绵羊MSCs干细胞转录因子基因的检测 | 第50-52页 |
| 2.3 讨论 | 第52-54页 |
| 2.3.1 MSCs的分离与培养 | 第52-53页 |
| 2.3.2 绵羊MSCs的生物学特性 | 第53-54页 |
| 2.4 小结 | 第54-55页 |
| 3 绵羊间充质干细胞的多向诱导分化 | 第55-77页 |
| 3.1 材料与方法 | 第55-58页 |
| 3.1.1 实验材料 | 第55页 |
| 3.1.2 实验试剂 | 第55-56页 |
| 3.1.3 实验仪器及耗材 | 第56页 |
| 3.1.4 实验方法 | 第56-58页 |
| 3.2 实验结果与分析 | 第58-74页 |
| 3.2.1 组织学染色结果 | 第58-65页 |
| 3.2.2 诱导分化的特异性表达基因鉴定 | 第65-74页 |
| 3.3 讨论 | 第74-76页 |
| 3.3.1 MSC向神经样细胞的诱导分化一 | 第74-75页 |
| 3.3.2 MSCs向心肌细胞的诱导分化 | 第75页 |
| 3.3.3 MSCs向骨细胞的诱导分化 | 第75页 |
| 3.3.4 MSCs向脂肪细胞的诱导分化 | 第75-76页 |
| 3.3.5 MSCs向胰岛样细胞的诱导分化 | 第76页 |
| 3.4 小结 | 第76-77页 |
| 4 以MSC为核供体的重构胚体外发育研究 | 第77-88页 |
| 4.1 材料与方法 | 第77-80页 |
| 4.1.1 实验材料 | 第77页 |
| 4.1.2 实验试剂 | 第77-78页 |
| 4.1.3 实验仪器及耗材 | 第78页 |
| 4.1.4 实验方法 | 第78-80页 |
| 4.2 实验结果与分析 | 第80-84页 |
| 4.2.1 绵羊胎儿成年MSCs和SFCs的培养 | 第80页 |
| 4.2.2 卵母细胞的体外成熟 | 第80-81页 |
| 4.2.3 克隆胚的构建 | 第81-82页 |
| 4.2.4 重构胚的体外发育 | 第82-84页 |
| 4.3 讨论 | 第84-87页 |
| 4.3.1 卵母细胞的体外成熟 | 第84-85页 |
| 4.3.2 供体细胞的准备 | 第85页 |
| 4.3.3 克隆胚胎的体外发育 | 第85-87页 |
| 4.4 小结 | 第87-88页 |
| 5 以BMSCs为核供体的克隆绵羊研究 | 第88-100页 |
| 5.1 材料与方法 | 第88-91页 |
| 5.1.1 实验材料 | 第88页 |
| 5.1.2 实验试剂 | 第88-89页 |
| 5.1.3 实验仪器及耗材 | 第89页 |
| 5.1.4 实验方法 | 第89-91页 |
| 5.2 实验结果 | 第91-97页 |
| 5.2.1 供体细胞的培养 | 第91-92页 |
| 5.2.2 卵母细胞的体外成熟 | 第92页 |
| 5.2.3 克隆胚的构建 | 第92-93页 |
| 5.2.4 克隆胚胎的发育与胚胎移植 | 第93页 |
| 5.2.5 成体干细胞克隆绵羊诞生 | 第93-94页 |
| 5.2.6 成体干细胞克隆羊的亲子鉴定 | 第94-97页 |
| 5.3 讨论 | 第97-99页 |
| 5.3.1 动物的胚胎移植 | 第97-98页 |
| 5.3.2 克隆羊的亲子鉴定 | 第98-99页 |
| 5.4 小结 | 第99-100页 |
| 6 结论 | 第100-101页 |
| 致谢 | 第101-102页 |
| 参考文献 | 第102-128页 |
| 附录 | 第128-146页 |
| 作者简介 | 第146页 |
