摘要 | 第5-6页 |
ABSTRACT | 第6页 |
第一章 绪论 | 第9-28页 |
1.1 有丝分裂与纺锤体 | 第9-19页 |
1.1.1 有丝分裂 | 第9页 |
1.1.2 纺锤体 | 第9-10页 |
1.1.3 纺锤体的调节 | 第10-16页 |
1.1.3.1 纺锤体定向的调节 | 第10-15页 |
1.1.3.2 纺锤体大小的调节 | 第15-16页 |
1.1.4 有丝分裂激酶 | 第16-19页 |
1.1.4.1 Plk1蛋白激酶 | 第17-18页 |
1.1.4.2 Mps1蛋白激酶 | 第18-19页 |
1.2 微丝 | 第19-27页 |
1.2.1 微丝的结构与功能 | 第19页 |
1.2.2 胞质微丝在有丝分裂中的功能 | 第19-27页 |
1.3 MISP蛋白 | 第27-28页 |
第二章 实验材料与方法 | 第28-39页 |
2.1 生化技术 | 第28-35页 |
2.1.1 聚合酶链式反应PCR | 第28页 |
2.1.2 氯化钙方法制备感受态细胞 | 第28-29页 |
2.1.3 质粒转化 | 第29页 |
2.1.4 质粒DNA的小量抽提 | 第29-30页 |
2.1.5 质粒DNA的Promega试剂盒抽提 | 第30-31页 |
2.1.6 GST融合蛋白质制备 | 第31-32页 |
2.1.7 His融合蛋白质制备 | 第32-33页 |
2.1.8 Pull-down实验 | 第33-34页 |
2.1.9 免疫共沉淀实验 | 第34页 |
2.1.10 免疫印迹实验 | 第34-35页 |
2.2 细胞实验技术 | 第35-39页 |
2.2.1 细胞培养与冻存方法 | 第35页 |
2.2.2 磷酸钙法转染293T细胞 | 第35-36页 |
2.2.3 脂质体法转染HeLa细胞 | 第36-37页 |
2.2.4 免疫荧光实验 | 第37页 |
2.2.5 活细胞实验 | 第37页 |
2.2.6 细胞的药物处理方法 | 第37-39页 |
第三章 实验结果与讨论 | 第39-70页 |
3.1 在有丝分裂期细胞的胞质中存在一个特殊的微丝结构 | 第40-48页 |
3.2 胞质中的微丝结构受到多种因素的调节 | 第48-56页 |
3.3 通过化学小分子抑制剂探索微丝环状结构在纺锤体定位以及对称分裂中的功能 | 第56-61页 |
3.4 微丝结合蛋白MISP有可能参与到微丝环状结构的调节 | 第61-65页 |
3.5 HeLa细胞的3D成像结果 | 第65-66页 |
3.6 讨论 | 第66-70页 |
参考文献 | 第70-76页 |
附录 试剂配方 | 第76-78页 |
致谢 | 第78页 |