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胞质微丝构架对有丝分裂纺锤体可塑性调控机制研究

摘要第5-6页
ABSTRACT第6页
第一章 绪论第9-28页
    1.1 有丝分裂与纺锤体第9-19页
        1.1.1 有丝分裂第9页
        1.1.2 纺锤体第9-10页
        1.1.3 纺锤体的调节第10-16页
            1.1.3.1 纺锤体定向的调节第10-15页
            1.1.3.2 纺锤体大小的调节第15-16页
        1.1.4 有丝分裂激酶第16-19页
            1.1.4.1 Plk1蛋白激酶第17-18页
            1.1.4.2 Mps1蛋白激酶第18-19页
    1.2 微丝第19-27页
        1.2.1 微丝的结构与功能第19页
        1.2.2 胞质微丝在有丝分裂中的功能第19-27页
    1.3 MISP蛋白第27-28页
第二章 实验材料与方法第28-39页
    2.1 生化技术第28-35页
        2.1.1 聚合酶链式反应PCR第28页
        2.1.2 氯化钙方法制备感受态细胞第28-29页
        2.1.3 质粒转化第29页
        2.1.4 质粒DNA的小量抽提第29-30页
        2.1.5 质粒DNA的Promega试剂盒抽提第30-31页
        2.1.6 GST融合蛋白质制备第31-32页
        2.1.7 His融合蛋白质制备第32-33页
        2.1.8 Pull-down实验第33-34页
        2.1.9 免疫共沉淀实验第34页
        2.1.10 免疫印迹实验第34-35页
    2.2 细胞实验技术第35-39页
        2.2.1 细胞培养与冻存方法第35页
        2.2.2 磷酸钙法转染293T细胞第35-36页
        2.2.3 脂质体法转染HeLa细胞第36-37页
        2.2.4 免疫荧光实验第37页
        2.2.5 活细胞实验第37页
        2.2.6 细胞的药物处理方法第37-39页
第三章 实验结果与讨论第39-70页
    3.1 在有丝分裂期细胞的胞质中存在一个特殊的微丝结构第40-48页
    3.2 胞质中的微丝结构受到多种因素的调节第48-56页
    3.3 通过化学小分子抑制剂探索微丝环状结构在纺锤体定位以及对称分裂中的功能第56-61页
    3.4 微丝结合蛋白MISP有可能参与到微丝环状结构的调节第61-65页
    3.5 HeLa细胞的3D成像结果第65-66页
    3.6 讨论第66-70页
参考文献第70-76页
附录 试剂配方第76-78页
致谢第78页

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