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长武134小麦GAPDH基因过表达载体的构建及拟南芥的遗传转化

项目资助第4-5页
摘要第5-6页
ABSTRACT第6-7页
第一章 综述第11-20页
    1.1 转基因技术改良小麦抗旱性研究进展第11-16页
        1.1.1 内源蛋白基因在小麦抗旱改良中的应用第11-14页
        1.1.2 外源功能蛋白基因在小麦抗旱性改良中的应用第14-15页
        1.1.3 外源调节蛋白基因在小麦抗旱性改良中的应用第15-16页
    1.2 GAPDH 的功能多样性第16-18页
        1.2.1 膜融合与膜转运活性第16页
        1.2.2 微管蛋白成束活性第16-17页
        1.2.3 GAPDH 的磷酸化活性第17页
        1.2.4 GAPDH 与细胞凋亡第17-18页
    1.3 拟南芥第18-19页
        1.3.1 拟南芥的研究历史第18-19页
        1.3.2 小麦抗逆性基因在拟南芥中的研究第19页
    1.4 立题依据第19页
    1.5 研究目的和意义第19页
    1.6 研究内容和方法第19-20页
第二章 GAPDH 过表达载体的构建第20-34页
    2.1 材料第20-22页
        2.1.1 菌株、仪器与试剂第20-21页
        2.1.2 材料培养第21页
        2.1.3 材料处理第21-22页
    2.2 方法第22-29页
        2.2.1 材料总 RNA 的提取第22页
        2.2.2 RNA 质量检测第22页
        2.2.3 反转录合成 cDNA第22-23页
        2.2.4 质粒提取第23-24页
        2.2.5 载体及酶切位点的选择第24-25页
        2.2.6 PCR 扩增第25-26页
        2.2.7 过表达载体的构建第26-29页
    2.3 结果与分析第29-33页
        2.3.1 RNA 质量检测第29-30页
        2.3.2 目的片段和质粒的获得第30页
        2.3.3 菌落 PCR 鉴定阳性菌落第30-31页
        2.3.4 双酶切鉴定阳性菌落第31页
        2.3.5 测序结果第31-33页
    2.4 讨论第33页
    2.5 小结第33-34页
第三章 拟南芥的遗传转化第34-45页
    3.1 拟南芥的种植第34-35页
        3.1.1 材料、试剂第34-35页
        3.1.2 仪器第35页
        3.1.3 拟南芥种植方法第35页
    3.2 拟南芥的遗传转化第35-37页
        3.2.1 菌株,材料及仪器第35页
        3.2.2 酶及剂盒第35-36页
        3.2.3 培养基配制第36-37页
    3.3 方法第37-39页
        3.3.1 从保存的 BL21 菌种中提取 GAPDH 表达载体第37页
        3.3.2 将重组质粒转化进入农杆菌 EHA105第37-38页
        3.3.3 拟南芥的遗传转化第38-39页
        3.3.4 抗生素筛选第39页
    3.4 结果与分析第39-42页
        3.4.1 拟南芥材料种植情况第39-40页
        3.4.2 农杆菌菌落 PCR 鉴定阳性菌落第40页
        3.4.3 筛选浓度的确定第40-42页
        3.4.4 拟南芥的筛选结果第42页
    3.5 讨论第42-43页
        3.5.1 影响拟南芥生长的因素第42-43页
        3.5.2 筛选第43页
    3.6 小结第43-45页
第四章 结论与展望第45-46页
    4.1 结论第45页
    4.2 展望第45页
    4.3 创新点第45-46页
参考文献第46-51页
缩略词第51-52页
致谢第52-53页
作者简介第53页

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