项目资助 | 第4-5页 |
摘要 | 第5-6页 |
ABSTRACT | 第6-7页 |
第一章 综述 | 第11-20页 |
1.1 转基因技术改良小麦抗旱性研究进展 | 第11-16页 |
1.1.1 内源蛋白基因在小麦抗旱改良中的应用 | 第11-14页 |
1.1.2 外源功能蛋白基因在小麦抗旱性改良中的应用 | 第14-15页 |
1.1.3 外源调节蛋白基因在小麦抗旱性改良中的应用 | 第15-16页 |
1.2 GAPDH 的功能多样性 | 第16-18页 |
1.2.1 膜融合与膜转运活性 | 第16页 |
1.2.2 微管蛋白成束活性 | 第16-17页 |
1.2.3 GAPDH 的磷酸化活性 | 第17页 |
1.2.4 GAPDH 与细胞凋亡 | 第17-18页 |
1.3 拟南芥 | 第18-19页 |
1.3.1 拟南芥的研究历史 | 第18-19页 |
1.3.2 小麦抗逆性基因在拟南芥中的研究 | 第19页 |
1.4 立题依据 | 第19页 |
1.5 研究目的和意义 | 第19页 |
1.6 研究内容和方法 | 第19-20页 |
第二章 GAPDH 过表达载体的构建 | 第20-34页 |
2.1 材料 | 第20-22页 |
2.1.1 菌株、仪器与试剂 | 第20-21页 |
2.1.2 材料培养 | 第21页 |
2.1.3 材料处理 | 第21-22页 |
2.2 方法 | 第22-29页 |
2.2.1 材料总 RNA 的提取 | 第22页 |
2.2.2 RNA 质量检测 | 第22页 |
2.2.3 反转录合成 cDNA | 第22-23页 |
2.2.4 质粒提取 | 第23-24页 |
2.2.5 载体及酶切位点的选择 | 第24-25页 |
2.2.6 PCR 扩增 | 第25-26页 |
2.2.7 过表达载体的构建 | 第26-29页 |
2.3 结果与分析 | 第29-33页 |
2.3.1 RNA 质量检测 | 第29-30页 |
2.3.2 目的片段和质粒的获得 | 第30页 |
2.3.3 菌落 PCR 鉴定阳性菌落 | 第30-31页 |
2.3.4 双酶切鉴定阳性菌落 | 第31页 |
2.3.5 测序结果 | 第31-33页 |
2.4 讨论 | 第33页 |
2.5 小结 | 第33-34页 |
第三章 拟南芥的遗传转化 | 第34-45页 |
3.1 拟南芥的种植 | 第34-35页 |
3.1.1 材料、试剂 | 第34-35页 |
3.1.2 仪器 | 第35页 |
3.1.3 拟南芥种植方法 | 第35页 |
3.2 拟南芥的遗传转化 | 第35-37页 |
3.2.1 菌株,材料及仪器 | 第35页 |
3.2.2 酶及剂盒 | 第35-36页 |
3.2.3 培养基配制 | 第36-37页 |
3.3 方法 | 第37-39页 |
3.3.1 从保存的 BL21 菌种中提取 GAPDH 表达载体 | 第37页 |
3.3.2 将重组质粒转化进入农杆菌 EHA105 | 第37-38页 |
3.3.3 拟南芥的遗传转化 | 第38-39页 |
3.3.4 抗生素筛选 | 第39页 |
3.4 结果与分析 | 第39-42页 |
3.4.1 拟南芥材料种植情况 | 第39-40页 |
3.4.2 农杆菌菌落 PCR 鉴定阳性菌落 | 第40页 |
3.4.3 筛选浓度的确定 | 第40-42页 |
3.4.4 拟南芥的筛选结果 | 第42页 |
3.5 讨论 | 第42-43页 |
3.5.1 影响拟南芥生长的因素 | 第42-43页 |
3.5.2 筛选 | 第43页 |
3.6 小结 | 第43-45页 |
第四章 结论与展望 | 第45-46页 |
4.1 结论 | 第45页 |
4.2 展望 | 第45页 |
4.3 创新点 | 第45-46页 |
参考文献 | 第46-51页 |
缩略词 | 第51-52页 |
致谢 | 第52-53页 |
作者简介 | 第53页 |