摘要 | 第6-8页 |
ABSTRACT | 第8-9页 |
文献综述 | 第12-28页 |
第一章 体细胞克隆动物的研究进展 | 第12-17页 |
1.1 目前 SCNT 的效率及存在的问题 | 第12-15页 |
1.1.1 供体细胞 | 第12-13页 |
1.1.2 受体卵母细胞 | 第13页 |
1.1.3 表观遗传修饰修剂处理供体细胞和 SCNT 胚胎 | 第13-15页 |
1.1.4 胚胎嵌合 | 第15页 |
1.2 克隆胚胎的异常情况与体细胞特性的关系 | 第15-17页 |
1.2.1 DNA 去甲基化和组蛋白修饰 | 第15-16页 |
1.2.2 胚胎基因的活化 | 第16页 |
1.2.3 克隆胚胎中体细胞染色质的表观遗传记忆 | 第16-17页 |
第二章 miRNAs 的结构与生物学功能 | 第17-23页 |
2.1 miRNA 的生物合成及其介导基因调控的机制 | 第17-18页 |
2.2 与生殖细胞增殖和分化相关的 miRNA | 第18-19页 |
2.3 与卵母细胞生长、成熟和发育能力有关的 miRNA | 第19-20页 |
2.4 与精子相关的 miRNAs | 第20页 |
2.5 miRNAs 介导的体细胞重编程 | 第20-23页 |
第三章 精子和体细胞核在卵母细胞内的重编程 | 第23-28页 |
3.1 精子染色体的特性 | 第23页 |
3.2 精子使‘编程’转变为‘重编程’的成分 | 第23-25页 |
3.3 体细胞核在受精卵和卵母细胞内的重编程 | 第25-26页 |
3.4 类精子状态的体细胞 | 第26-28页 |
实验部分 | 第28-59页 |
第四章 精子特异性的 miR-34c/miR-449b 鉴定 | 第28-35页 |
4.1 材料与方法 | 第29-32页 |
4.1.1 实验材料 | 第29页 |
4.1.2 实验方法 | 第29-32页 |
4.2 实验结果 | 第32-33页 |
4.2.1 精子纯度的鉴定 | 第32-33页 |
4.2.2 miR-34c/miR-449b 在成纤维细胞、精子、卵母细胞中的表达情况 | 第33页 |
4.3 讨论 | 第33-34页 |
4.4 小结 | 第34-35页 |
第五章 miR-34c/miR-449b 诱导表达载体的构建与细胞筛选 | 第35-45页 |
5.1 材料与方法 | 第35-40页 |
5.1.1 实验材料 | 第35-36页 |
5.1.2 实验方法 | 第36-40页 |
5.2 实验结果 | 第40-44页 |
5.2.1 诱导表达载体构建结果 | 第40-42页 |
5.2.2 单克隆细胞结果图 | 第42-43页 |
5.2.3 阳性克隆细胞中 miR-34c 的表达情况 | 第43-44页 |
5.3 讨论 | 第44页 |
5.4 小结 | 第44-45页 |
第六章 miR-34c 对胚胎发育的影响 | 第45-52页 |
6.1 材料与方法 | 第45-47页 |
6.1.1 实验材料 | 第45页 |
6.1.2 实验方法 | 第45-47页 |
6.2 实验结果 | 第47-51页 |
6.2.1 胚胎卵裂情况 | 第47-48页 |
6.2.2 胚胎染色结果 | 第48-50页 |
6.2.3 囊胚凋亡染色结果 | 第50-51页 |
6.3 讨论 | 第51页 |
6.4 小结 | 第51-52页 |
第七章 miR-34c/miR-449b 相关靶基因的初步鉴定 | 第52-59页 |
7.1 材料与方法 | 第54-56页 |
7.1.1 实验材料 | 第54页 |
7.1.2 实验方法 | 第54-56页 |
7.2 实验结果 | 第56-58页 |
7.2.1 双荧光素酶载体构建结果 | 第56-57页 |
7.2.2 Dual-Luciferase 双荧光素酶报告基因检测结果 | 第57-58页 |
7.3 讨论 | 第58页 |
7.4 小结 | 第58-59页 |
全文结论 | 第59-60页 |
本文的创新点和后续研究 | 第60-61页 |
参考文献 | 第61-67页 |
致谢 | 第67-68页 |
作者简介 | 第68页 |